薄香蘭，劉興，柴英輝，竇勇，高金偉，賈旭穎，周文禮

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pH對(duì)淡水小球藻葉綠素?zé)晒鈪?shù)及生長(zhǎng)的影響

薄香蘭，劉興，柴英輝，竇勇，高金偉，賈旭穎，周文禮通信作者

（天津農(nóng)學(xué)院 水產(chǎn)學(xué)院 天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300384）

以小球藻為研究對(duì)象，研究不同pH對(duì)其葉綠素?zé)晒?、葉綠素含量和細(xì)胞密度的影響，以期找到小球藻最適生長(zhǎng)的pH值，為小球藻的集約化培養(yǎng)提供基礎(chǔ)資料。結(jié)果表明：不同pH對(duì)小球藻的葉綠素?zé)晒?、葉綠素含量和細(xì)胞密度有顯著影響，pH值為9時(shí)最大光能轉(zhuǎn)化速率（F/F）、實(shí)際光能轉(zhuǎn)化效率（）和量子效率均呈下降趨勢(shì)，pH值為9時(shí)潛在活力（F/F）、相對(duì)電子轉(zhuǎn)化速率、葉綠素及小球藻密度上升趨勢(shì)最小，pH為7時(shí)葉綠素含量和細(xì)胞密度均高于其他實(shí)驗(yàn)組，其值分別為1 613.05 μg/L、1.13×107cells/mL，pH9處理組的葉綠素含量和細(xì)胞密度最低，其值為883.82 μg/L、6.77×106cells/mL。小球藻最適生長(zhǎng)pH值為7，pH為9時(shí)會(huì)顯著抑制小球藻生長(zhǎng)。

淡水小球藻；葉綠素?zé)晒?；葉綠素含量；細(xì)胞密度；pH

小球藻（）為綠藻門、綠藻綱、綠球藻目、卵孢藻科、小球藻屬的單細(xì)胞藻類[1]。直徑約3～5 μm，呈球形或橢圓形，具有繁殖快、分布廣、營(yíng)養(yǎng)高等特點(diǎn)[2]。小球藻可以增強(qiáng)動(dòng)物免疫能力，具有促進(jìn)生長(zhǎng)、抗氧化、抗腫瘤等生理功能[3-5]。目前，小球藻已經(jīng)廣泛應(yīng)用于動(dòng)物飼料、食品添加劑、美容產(chǎn)品、食品開發(fā)、醫(yī)藥保健等領(lǐng)域[6]。為了開發(fā)出其巨大的應(yīng)用潛力，首先要獲得大量的小球藻體。因此探討小球藻生長(zhǎng)過程中環(huán)境因子對(duì)其產(chǎn)率和光能轉(zhuǎn)化效率的影響至關(guān)重要。

pH是藻類生長(zhǎng)過程中最重要影響因子之一，它通過改變環(huán)境中酸堿度和碳酸鹽平衡來影響藻類生長(zhǎng)[7]。傳統(tǒng)的測(cè)定藻類最適pH值是通過測(cè)定在不同pH值下培養(yǎng)藻類的細(xì)胞密度，這種方法比較耗費(fèi)時(shí)間。葉綠素?zé)晒馐且环N以光合作用理論為基礎(chǔ)，利用體內(nèi)葉綠素作為天然探針，是鑒定藻類耐逆境能力的良好指標(biāo)之一，具有快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單的特點(diǎn)[8]。藻類體內(nèi)的葉綠素?zé)晒馀c光合作用過程中的各種反應(yīng)密切相關(guān)，因此，可以利用葉綠素?zé)晒庾兓潭葋矸磻?yīng)來確定小球藻受影響程度[9-10]。本試驗(yàn)利用浮游植物分類熒光儀（PHYTO-PAM WALZ）在對(duì)小球藻的一次性培養(yǎng)過程中，通過檢測(cè)實(shí)際光能轉(zhuǎn)化效率（）、潛在活力（F/F）、最大光能轉(zhuǎn)化速率（F/F）、相對(duì)電子轉(zhuǎn)化速率（）、量子效率（）、葉綠素（）及細(xì)胞密度，來研究不同pH值對(duì)其光合特性及生長(zhǎng)的影響，以期為小球藻的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)及大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)提供理論依據(jù)，并且為葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)在確定藻類適宜pH值提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用小球藻（）來源于天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

1.2 培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)條件

小球藻采用 BG-11 培養(yǎng)基在25℃的恒溫培養(yǎng)箱中，在500 mL錐形瓶中進(jìn)行，向200 mL培養(yǎng)基中加入初始密度為1×106cells/mL藻液200 mL，濕度為50% RH，光強(qiáng)為60 μmol/（m2·s），12 h∶12 h的明暗周期培養(yǎng)，試驗(yàn)設(shè)置5個(gè)pH梯度，分別為5、6、7、8、9，每個(gè)梯度設(shè)置3個(gè)平行，試驗(yàn)每天以鹽酸（HCl）、氫氧化鈉（NaOH）調(diào)控pH，每天定時(shí)搖動(dòng)4次，以防小球藻細(xì)胞附壁及下沉。

1.3 試驗(yàn)儀器

浮游植物分類熒光儀（PHYTO-PAM WALZ），超凈工作臺(tái)（SW-CJ-1FD 上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備工廠），高壓蒸汽滅菌鍋（HVE-50 HIRAYMA儀器制造公司），生物顯微鏡（E200 日本Nikon），藻類培養(yǎng)箱（AL-36 美國(guó)珀?duì)柾呶鳎?，電子天平（AS2202X2 RADWAG），pH儀（S220-K 梅特勒）。

1.4 培養(yǎng)基

（1）A5溶液：將2.86 g的H3BO3、1.86 g的MnCl2·4H2O、0.22 g的ZnSO4·7H2O、0.39 g的Na2MoO4·2H2O、0.08 g的CuSO4·5H2O、0.05 g的CO（NO3）2·6H2O依次溶于1 L的蒸餾水中。

（2）BG-11培養(yǎng)基，將1.5 g的NaNO3、0.052 g的K2HPO4×3H2O、0.075 g的MgSO4×7H2O、0.036 g的CaCl2×2H2O、0.006 g的檸檬酸、0.006 g的檸檬酸鐵胺、0.001 g的EDTA-2Na、0.2 g的Na2CO3、1 mL的A5溶液依次溶于1 L的蒸餾水中。

1.5 測(cè)定方法

將處于對(duì)數(shù)期的小球藻接種到預(yù)配好的培養(yǎng)基中，并記錄為試驗(yàn)的第0天，在實(shí)驗(yàn)的第0、2、4、6、8、10天定時(shí)取樣，測(cè)定葉綠素?zé)晒鈪?shù)、葉綠素含量和藻密度。

1.5.1 葉綠素?zé)晒鈪?shù)的測(cè)定

利用浮游植物分類熒光儀（PHYTO-PAM WALZ）對(duì)葉綠素?zé)晒飧鱾€(gè)參數(shù)進(jìn)行測(cè)定，打開Phyto Win軟件，先放置1 cm樣品（每次體積應(yīng)統(tǒng)一）在比色皿中暗適應(yīng)15 min，啟動(dòng)儀器測(cè)定初始熒光產(chǎn)量（F），飽和脈沖后（4 000 μmol/（m2·s））測(cè)定最大熒光產(chǎn)量（F），以此計(jì)算出最大光能轉(zhuǎn)化效率（F/F），打開預(yù)先設(shè)定好的光化學(xué)強(qiáng)度（3 000 μmol/（m2·s）），進(jìn)行1 min的照射（儀器指示燈變綠為光化光結(jié)束），待熒光值穩(wěn)定后，測(cè)定出光化學(xué)后初始熒光（F）和最大熒光（F'）。Settings窗口中設(shè)置為Meas. Freq.為32，切換到Channeles窗口，點(diǎn)擊，測(cè)出葉綠素的含量。測(cè)定的葉綠素?zé)晒鈪?shù)有F、F、F'、F'、F，并根據(jù)熒光儀提供的公式，計(jì)算出F/F、F/F、、、等熒光參數(shù)，具體公式如下：

（5）光合電子傳遞速率：=×DAR×0.5×0.84（μmol·e·m-2·s-1）

1.5.2 藻密度測(cè)定

小球藻密度測(cè)定通過血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)獲得。

1.6 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 19.0進(jìn)行單因素方差分析和多重比較，利用EXCEL 2007進(jìn)行繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 pH對(duì)小球藻葉綠素?zé)晒饣钚缘挠绊?/h3>

2.1.1 pH對(duì)小球藻F/F的影響

F/F代表光反應(yīng)中心PS Ⅱ的最大量子產(chǎn)量，即最大光能轉(zhuǎn)化效率。pH對(duì)小球藻的F/F影響如圖1所示，所有處理組的F/F在第0天維持在1.6±0.01，隨著時(shí)間增長(zhǎng)，pH 6、pH 7處理組F/F有上升趨勢(shì)，其他處理組均呈下降趨勢(shì)，pH 9處理組下降速率最快，培養(yǎng)結(jié)束時(shí)pH 7處理組F/F最高。而pH 6處理組維持在pH 7處理組的97.18%，pH 5和pH8維持在pH 7處理組的77.46%～85.91%，pH 9處理組只有pH 7處理組的59.15%。

圖1 不同pH對(duì)小球藻Fv/Fm的影響

2.1.2 pH對(duì)小球藻F/F的影響

F/F代表PS Ⅱ的潛在活力，pH對(duì)小球藻F/F的影響如圖2所示，各組的F/F均呈增加趨勢(shì)，在第10天pH 7處理組達(dá)到了最高值，同時(shí)pH 5、pH 6和 pH 8處理組維持在pH 7處理組最高值的88.89%～96.48%，pH 9維持在最高值的70.27%。

圖2 不同pH對(duì)小球藻Fv/F0的影響

2.1.3 pH對(duì)小球藻的影響

是指PSⅡ的實(shí)際光能轉(zhuǎn)化效率，pH對(duì)小球藻影響如圖3所示，除pH 9處理組外，其他各處理組隨著時(shí)間增加呈上升趨勢(shì)，pH 7處理組上升較其他組快，pH 5處理組上升趨勢(shì)較慢，pH 9處理組呈下降趨勢(shì)，到試驗(yàn)第10天pH 9處理組的維持在pH 7處理組的71.74%。

圖3 不同pH對(duì)小球藻ΦPSⅡ的影響

2.1.4 pH對(duì)小球藻的影響

是指PSⅡ的量子效率，pH對(duì)小球藻影響見圖4，如圖所示，pH 6和 pH 7處理組的隨時(shí)間增加而增加，以pH 7處理組增長(zhǎng)速率最快，pH 5和 pH 8處理組的yield維持在0.59～0.62，pH 9處理組呈下降趨勢(shì)。

圖4 不同pH對(duì)小球藻Yield的影響

2.1.5 pH對(duì)小球藻的影響

表示光反應(yīng)中心PSⅡ光合電子的傳遞速率。pH對(duì)小球藻影響如圖5所示，整個(gè)試驗(yàn)過程中，pH 9處理組沒有變化，其他各處理組均有上升趨勢(shì)。

圖5 不同pH對(duì)小球藻ETR的影響

2.2 pH對(duì)小球藻葉綠素含量的影響

pH對(duì)小球藻葉綠素含量的影響如圖6所示，葉綠素含量均呈增加趨勢(shì)，在試驗(yàn)第10天，pH 7處理組葉綠素值最高，達(dá)到1 613.05 μg/L，為初始密度的2.01倍，pH 6處理組葉綠素含量至培養(yǎng)結(jié)束時(shí)為初始時(shí)的2.19倍，pH 8 和pH 5處理組次之，至培養(yǎng)結(jié)束時(shí)分別為初始時(shí)的1.57倍和1.53倍，pH 9處理組增加最慢，培養(yǎng)結(jié)束時(shí)為初始時(shí)的1.22倍。

圖6 不同pH對(duì)小球藻CHL的影響

2.3 pH對(duì)小球藻細(xì)胞密度的影響

pH對(duì)小球藻細(xì)胞密度的影響如圖7所示，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，藻細(xì)胞密度均呈上升趨勢(shì)，從培養(yǎng)的第2天開始，pH 6和pH 7處理組的藻細(xì)胞密度均顯著高于其他組（＜0.05），隨著培養(yǎng)繼續(xù)進(jìn)行，pH 6和pH 7處理組的藻細(xì)胞密度始終顯著高于pH 9處理組（＜0.05），同時(shí)，pH 9處理組與其他組之間藻細(xì)胞密度差增大，在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，pH 7處理組藻細(xì)胞密度最高，為1.13×107cells/mL，是初始密度的2.76倍，pH 9處理組的藻細(xì)胞密度最低，僅有pH 7處理組的61.27%。

圖7 不同pH對(duì)小球藻細(xì)胞密度的影響

3 討論

3.1 pH對(duì)小球藻葉綠素?zé)晒獾挠绊?/h3>

3.1.1 pH對(duì)小球藻F/F和F/F的影響

小球藻的光合作用會(huì)受到環(huán)境因素的影響，研究發(fā)現(xiàn)pH過高和過低對(duì)小球藻葉綠素?zé)晒庵稻酗@著影響，pH通過改變環(huán)境中酸堿度和碳酸鹽平衡來影響小球藻生長(zhǎng)[11]。F/F代表光反應(yīng)中心PSⅡ的最大光能轉(zhuǎn)化效率，在非脅迫條件下不會(huì)受到生長(zhǎng)環(huán)境影響，其變化較小，當(dāng)受到脅迫環(huán)境影響時(shí)，該參數(shù)會(huì)明顯降低，F/F代表PSⅡ的潛在活力，其數(shù)值也受到環(huán)境脅迫影響，環(huán)境脅迫會(huì)明顯降低該參數(shù)值，因此，F/F和F/F被用來判斷光合作用光抑制的標(biāo)準(zhǔn)[12]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，培養(yǎng)結(jié)束時(shí)pH 7處理組的F/F參數(shù)值最高，pH 6、pH 7處理組的F/F有上升趨勢(shì)，pH 9處理組有明顯的下降趨勢(shì)。F/F參數(shù)下降，反映了pH過高和過低對(duì)反應(yīng)中心PSⅡ具有破壞作用，當(dāng)pH值為9時(shí)F/F下降，推測(cè)原因pH為9時(shí)可能會(huì)破壞小球藻光合反應(yīng)中心PSⅡ，無法進(jìn)行氨基酸的拼接導(dǎo)致蛋白合成受到限制[13]。pH值為6～7時(shí)F/F沒有下降，反而有上升趨勢(shì)，反映了pH值為7時(shí)不會(huì)對(duì)小球藻光合反應(yīng)中心PSⅡ產(chǎn)生破壞作用。同樣，培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，各處理組的F/F均呈上升趨勢(shì)，以 pH 7處理組F/F最高，pH 9處理組最低，F/F值上升反映小球藻光合反應(yīng)中心PSⅡ的潛在活力強(qiáng)，光合作用能力較強(qiáng)[14]。培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，pH 7處理組的F/F是初始密度的1.59倍，因此，小球藻進(jìn)行光合作用的最適pH值為7。歐陽(yáng)崢嶸等[11]研究表明，淡水小球藻適合在中性環(huán)境中生活。

3.1.2 pH對(duì)小球藻、和的影響

實(shí)際光能轉(zhuǎn)化效率是指在光下PSⅡ反應(yīng)中部分關(guān)閉時(shí)藻類光合作用實(shí)際原初捕獲效率[15]，大量研究表明值與環(huán)境中脅迫程度呈負(fù)相關(guān)作用，值會(huì)隨著環(huán)境脅迫程度增加而減少[16-18]。指在光合作用中每吸收一個(gè)光量子，所固定CO2分子數(shù)或者釋放O2的分子數(shù)[19]。是指光合作用中，受光激發(fā)推動(dòng)的電子從H2O到輔酶Ⅱ（NADP＋）的電子傳遞速率[20]。通常在藻類光合作用中，和都隨著環(huán)境脅迫程度增加而減少[21-22]。本研究結(jié)果表明，pH 9處理組中的和都降低，其他組沒有明顯降低或者處于增加趨勢(shì)，在整個(gè)培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，只有pH 9處理組沒有增加，明顯低于其他組，到試驗(yàn)第10天，pH 9處理組的只有pH 7處理組的71.74%，因此，當(dāng)pH增加到9時(shí)，會(huì)對(duì)小球藻光合作用的、和有抑制作用。

3.2 pH對(duì)小球藻葉綠素含量的影響

葉綠素是植物進(jìn)行光合作用的主要色素之一，在光合作用和光能吸收中起主要轉(zhuǎn)化作用，因此，小球藻體內(nèi)的葉綠素含量與植物生長(zhǎng)、光合作用有密切關(guān)系[23]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，葉綠素含量均呈增加趨勢(shì)，pH 7處理組葉綠素增長(zhǎng)速率最快，培養(yǎng)結(jié)束時(shí)達(dá)到1 613.05 μg/L，為接種時(shí)的2.01倍，pH 9處理組增加最慢，培養(yǎng)結(jié)束時(shí)為接種時(shí)的1.22倍，當(dāng)pH值為7時(shí)葉綠素含量最高，pH值為9時(shí)葉綠素產(chǎn)量就會(huì)下降。這與李艷紅[24]研究銅綠微囊藻時(shí)得到結(jié)果類似。Saygideger等[25]和陳燦等[26]在其它藻類研究中也得到類似結(jié)果。

3.3 pH對(duì)小球藻細(xì)胞密度的影響

pH是小球藻生長(zhǎng)過程中重要的環(huán)境因子之一，大量研究報(bào)道了pH對(duì)小球藻生長(zhǎng)、光合作用和代謝產(chǎn)物的影響[27]。藻類最適生長(zhǎng)pH值因種類不同而有所差異，高于或者低于最適生長(zhǎng)的pH都會(huì)抑制藻類生長(zhǎng)。如銅綠微囊藻（）、水華魚腥藻（）、浮游顫藻（）適宜的pH分別為9.0、8.0～9.0和7.0～8.0，斜生柵藻（）、綠球藻（）、雷氏衣藻（）適宜的pH分別為9.0～10.0、7.0～8.0和7.0[28]。小球藻培養(yǎng)過程中pH不穩(wěn)定，會(huì)隨著藻類的生長(zhǎng)、代謝而不斷改變。以前對(duì)小球藻生長(zhǎng)最適pH的研究大多以起始時(shí)或者終止時(shí)培養(yǎng)基pH為主[29-30]，較少研究將培養(yǎng)過程中固定藻液pH，本研究通過每天用鹽酸（HCl）、氫氧化鈉（NaOH）調(diào)控pH，研究結(jié)果表明，在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，pH 7處理組藻細(xì)胞密度最高，為1.13′107cells/mL，pH為6和7時(shí)小球藻密度明顯高于其他組，當(dāng)pH固定到9時(shí)，小球藻生長(zhǎng)效果最差，藻密度只有6.77′106cells/mL。張虎等[29]研究固定小球藻液pH為6～7時(shí)，生長(zhǎng)速率最快，pH為7～8時(shí)生物質(zhì)產(chǎn)量最高，與本研究結(jié)果相符。劉加慧等[31]通過模型優(yōu)化和驗(yàn)證試驗(yàn)，得出在溫度為26.7 ℃、鹽度為25.5‰和 pH 為7.3時(shí)，小球藻的生長(zhǎng)速率達(dá)到最大值 0.69，與本試驗(yàn)結(jié)果接近。

4 結(jié)論

pH通過影響小球藻的光合作用強(qiáng)度來影響小球藻的生長(zhǎng)發(fā)育。研究結(jié)果表明，pH 7處理組的F/F、F/F、、、、和細(xì)胞密度均高于其他處理組，用葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)來確定藻類適宜生長(zhǎng)指標(biāo)可行。

[1] 王英娟，賀敬，李壯，等. 光密度法測(cè)定蛋白核小球藻生物量[J]. 西北大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2012，42（1）：60-63.

[2] 袁靜，劉樹深，王麗娟，等. 蛋白核小球藻（）微板毒性分析方法優(yōu)化[J]. 環(huán)境科學(xué)研究，2011，24（5）：553-558.

[3] Mukti N A，Sulaiman S，Saad S M，et al.exhibited antioxidant and antitumour effects against liver cancerandstudies[J]. Sains Malaysiana，2009，38（5）：773-784.

[4] Wang X，Zhang X. Separation，antitumor activities，and encapsulation of polypeptide from[J]. Biotechnology Progress，2013，29（3）：681–687.

[5] 汪炬，蒲含林，洪岸，等. 蛋白核小球藻提取物的抑瘤作用及對(duì)免疫功能的影響[J]. 營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2004，26（2）：136-138.

[6] 陳藝煊，劉曉艷，林彤，等. 蛋白核小球藻凍融破壁條件優(yōu)化及對(duì)其抗氧化活性的影響[J]. 食品科技，2016，41（5）：75-80.

[7] 楊勛，郝宗娣，張森，等. 營(yíng)養(yǎng)元素和pH對(duì)若夫小球藻生長(zhǎng)和油脂積累的影響[J]. 南方水產(chǎn)科學(xué)，2013，9（4）：33-38.

[8] 宋麗娜，鄭曉宇，顧詠潔，等. 磷濃度對(duì)海洋小球藻葉綠素?zé)晒饧吧L(zhǎng)的影響[J]. 環(huán)境污染與防治，2010，32（8）：20-24，50.

[9] 梁英，馮力霞，尹翠玲，等. 葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)在微藻環(huán)境脅迫研究中的應(yīng)用現(xiàn)狀及前景[J]. 海洋科學(xué)，2007，31（1）：71-76.

[10] 王通明，陳偉，潘文杰，等. 有機(jī)肥和化肥對(duì)煙葉氣體交換、葉綠素?zé)晒馓匦约叭~綠體超微結(jié)構(gòu)的影響[J]. 植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2015，21（2）：517-526.

[11] 歐陽(yáng)崢嶸，溫小斌，耿亞紅，等. 光照強(qiáng)度、溫度、pH、鹽度對(duì)小球藻（）光合作用的影響[J]. 武漢植物學(xué)研究，2010，28（1）：49-55.

[12] 呂士如. 基于藻類葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)曲線的水質(zhì)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)[D]. 重慶：重慶大學(xué)，2014.

[13] Geider R J，Roche J L，Greene R M，et al. Response of the photosynthetic apparatus of phaeodactylum tricornutum（bacillariophyceae）to nitrate，phosphate，or iron starvation[J]. Journal of Phycology，1993，29（6）：755-766.

[14] You Y，Yuan Z L，Zhang X Y，et al. Effect of plant hormoneo on/and/ofleaves[J]. Henan Science，2007，35（19）：5698-5701.

[15] Maxwell K，Johnson G N. Chlorophyll fluorescence-a practical guide[J]. Journal of Experimental Botany，2000，51（345）：659-668.

[16] 高方勝，王磊，徐坤. 土壤相對(duì)含水量對(duì)不同茬口番茄葉片PSⅡ光化學(xué)活性和光能分配影響[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào)，2017，31（5）：1005-1013.

[17] 易軍，楊國(guó)濤，張玲，等. 稻瘟病菌對(duì)水稻PSⅡ的影響研究[J]. 云南大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2015，37（3）：452-459.

[18] Yan K，Chen N，Qu Y. Tobacco transformed with sweet pepper sensealleviates PSⅡphotoinhibition under high temperature stress[J]. Scientia Agricultura Sinica，2007，40（11）：2468-2473.

[19] Li C，Liu K. Analysis of photosynthesis efficiency of maize hybrids with different yield in the later growth stage[J]. Acta Agronomica Sinica，2002，28（3）：379-383.

[20] 曹春暉，孫世春，王學(xué)魁，等. 錳濃度對(duì)米氏凱倫藻葉綠素?zé)晒馓匦约吧L(zhǎng)的影響[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào)，2010，30（19）：5280-5288.

[21] Li T L，Xie Y H，Hong J P，et al. Effects of nitrogen application rate on photosynthetic characteristics, yield, and nitrogen utilization in rainfed winter wheat in southern Shanxi[J]. Acta Agronomica Sinica2013，39（4）：704.

[22] 王壽兵，徐紫然，馬小雪，等. Cu2＋對(duì)銅綠微囊藻生長(zhǎng)及葉綠素?zé)晒庵饕獏?shù)的影響研究[J]. 中國(guó)環(huán)境科學(xué)，2016，36（12）：3759-3765.

[23] 陳剛，龍茜，李謝穎，等. 不同pH值對(duì)金魚藻光合作用及葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊慬J]. 揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)（農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版），2015，36（1）：65-71.

[24] 李艷紅. 環(huán)境因子對(duì)銅綠微囊藻生長(zhǎng)和光合作用的影響[D]. 南昌：南昌大學(xué)，2010.

[25] Saygideger S，Dogan M，Keser G. Effect of lead and pH on lead uptake，chlorophyll and nitrogen content ofL. andL. [J]. International Journal of Agriculture & Biology，2004，6（1）：168-172.

[26] 陳燦，龔艷，李研，等. 不同光強(qiáng)下pH對(duì)伊樂藻光合機(jī)能的影響[J]. 湖南林業(yè)科技，2009，36（1）：15-17.

[27] 張虎，張桂艷，溫小斌，等. pH對(duì)小球藻. XQ-200419光合作用、生長(zhǎng)和產(chǎn)油的影響[J]. 水生生物學(xué)報(bào)，2014，38（6）：1084-1091.

[28] 許海，劉兆普，袁蘭，等. pH對(duì)幾種淡水藻類生長(zhǎng)的影響[J]. 環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，2009，32（1）：27-30.

[29] Yang X，Hao Z，Zhang S，et al. Effects of trophic elements and pH on growth rate and lipid productivity of[J]. South China Fisheries Science，2013，9（4）：33-38.

[30] 王翠，李環(huán)，王欽琪，等. pH值對(duì)沼液培養(yǎng)的普通小球藻生長(zhǎng)及油含量積累的影響[J]. 生物工程學(xué)報(bào)，2010，26（8）：1074-1079.

[31] 劉加慧，楊洪帥，王輝. 溫度、鹽度和pH對(duì)小球藻生長(zhǎng)率的聯(lián)合效應(yīng)[J]. 水生生物學(xué)報(bào)，2014（3）：446-453.

責(zé)任編輯：張愛婷

Effects of pH on chlorophyll fluorescence parameters and growth of

BO Xiang-lan, LIU Xing, CHAI Ying-hui, DOU Yong, GAO Jin-wei, JIA Xu-ying, ZHOU Wen-liCorresponding Author

（Tianjin Key Lab of Aqua-Ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China）

To determine the optimum pH conditions and provide basic information for intensive production of, the effects of different pH values on chlorophyll fluorescence, chlorophyll content and cell density during its culture process have been studied. The results show that when pH is 9 the maximum energy conversion rate（/）, the actual photochemical efficiency（）and the quantum efficiency（）decreased; meanwhile, the potential energy（F/F）, relative electronic conversion rate（）, chlorophyll content（）and the density ofincreasing trend was minimum. When pH is 7, chlorophyll fluorescence are higher than the other groups with the values 1 613.05 μg/L, 1.13×107cells/mL respectively. The chlorophyll content and cell density of pH 9 treatment group were 883.82 μg/L and 6.77′106cells/mL. The optimum growth pH ofis 7, and pH 9 can obviously inhibit the growth of.

; chlorophyll fluorescence; chlorophyll content; cell density; pH

Q945

A

1008-5394（2018）01-0038-06

10.19640/j.cnki.jtau.2018.01.009

2017-09-20

天津市水產(chǎn)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（ITTFRS2017005）；天津市科技重大專項(xiàng)與工程項(xiàng)目（15ZXBFNC00120）；衛(wèi)星海洋環(huán)境動(dòng)力學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金項(xiàng)目（SOED1419）；農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金項(xiàng)目（FREU2015-04）；天津農(nóng)學(xué)院科學(xué)研究計(jì)劃項(xiàng)目（2013NO8）

薄香蘭（1993-），女，碩士在讀，主要從事微藻資源化利用和水生態(tài)學(xué)研究。E-mail：1065817937@qq.com。

周文禮（1969-），男，研究員，博士，主要從事微藻資源化利用與生態(tài)學(xué)研究。E-mail：saz0908@126.com。