郭金林 姜兵 李芳 郭亮

鹽酸胺碘酮屬于Ⅲ類抗心律失常藥，用于室性、室上性心動過速和早搏、陣發(fā)性心房撲動和顫動、預(yù)激綜合征等。該藥為高度親脂性化合物，口服吸收良好但起效慢，生物半衰期長，長期服藥有蓄積中毒的風(fēng)險，對其進(jìn)行血藥濃度監(jiān)測很有必要。本實(shí)驗(yàn)采用反向高效液相色譜法測定血漿中的胺碘酮濃度，以苯丙酸諾龍為內(nèi)標(biāo)，操作簡便，無需繁雜的樣品前處理，方法穩(wěn)定可靠。

1.儀器和試劑

1.1儀器島津LC-20AT高效液相色譜儀，SIL-20A自動進(jìn)樣器，CBM-20A紫外檢測器，KQ-50B超聲清洗器，TGL-16M高速離心機(jī)，TL-4低速離心機(jī)，XX渦旋混勻器，島津工作站，CTO-20A柱溫箱。

1.2試藥胺碘酮標(biāo)準(zhǔn)品和苯丙酸諾龍標(biāo)準(zhǔn)品均由中國藥品生物制品檢定所提供（純度99.9%）。甲醇、乙腈為色譜純，三乙胺、冰醋酸為分析純度，試驗(yàn)用水為去離子水，健康成人血漿由我院血庫提供。

2.方法與結(jié)果

2.1色譜條件C18柱（5*250mm，4.6um）；流動相：甲醇：水：三乙胺：冰醋酸=78：22：0.1：0.08（體積比）；流速1.2毫升/分；紫外線檢測波長為242納米；靈敏度auFs=0.01；柱溫T=25℃。

2.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置將胺碘酮和苯丙酸諾龍對照品分別于105℃下干燥2小時后，精密稱取10毫克和20毫克，分別加甲醇至100毫升容量瓶中溶解，稀釋至刻度，得濃度分別為100毫克/升和200毫克/升的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，4℃冰箱中保存。

2.3血漿樣品處理方法取血漿樣本600微升，加入20微升濃度為200毫克/升的內(nèi)標(biāo)儲備液，混勻后加乙腈400微升，漩渦混合2分鐘，經(jīng)12000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘，取上清液20微升進(jìn)樣。

2.4色譜行為在本試驗(yàn)條件下，胺碘酮與苯丙酸諾龍的保留時間分別為，血漿中的內(nèi)原性雜質(zhì)及可能與胺碘酮合用的藥物，如頭孢菌素類、茶堿類藥物對胺碘酮的測定無干擾。

2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制將配置好的胺碘酮對照液加入潔凈試管中，加入健康血漿600微升與40毫克/升的內(nèi)標(biāo)液20微升，充分混合，使血漿藥物濃度分別為0.4毫克/升、0.6毫克/升、0.8毫克/升、1毫克/升、2毫克/升、4毫克/升、5毫克/升。按2.3項(xiàng)下操作，每一濃度平行2份，測定峰面積。以胺碘酮與內(nèi)標(biāo)的峰面積比對胺碘酮濃度作線性回歸，可以得出回歸方程，y=2555.8x+29.987，r=0.996。以信噪比（S/N）不小于3計算最低檢測限。

2.6回收率與精密度由低到高依次配置0.4毫克/升、1毫克/升、4毫克/升3種濃度的血漿樣品，按2.3項(xiàng)操作，每天測定6份，連續(xù)測定3天，測得日內(nèi)RSD和日間RSD。

2.7回收率測定同2.3項(xiàng)下方法配置0.4毫克/升、1毫克/升、4毫克/升標(biāo)準(zhǔn)含藥血清，依法測定。結(jié)果見表：

3.討論

本研究所采取的樣品處理方法簡便、實(shí)用，不需進(jìn)行繁瑣且耗時的氮?dú)獯蹈蛇^程，且回收率完全滿足要求。

柱溫會極大影響樣品的分離度及胺碘酮的出峰效果。柱溫設(shè)定為35℃時，胺碘酮無法和雜質(zhì)有效分離，且有明顯拖尾；柱溫設(shè)定為25℃時，胺碘酮可以和雜質(zhì)有效分離，且無明顯拖尾，出峰時間也略有縮短。

胺碘酮在體內(nèi)有多種代謝物，且以去乙基胺碘酮為主，該代謝物不但有生理活性，還會抑制胺碘酮的代謝，故該藥的藥動學(xué)行為較為復(fù)雜，單純通過測定胺碘酮濃度指導(dǎo)臨床用藥可能達(dá)不到理想效果。本研究因未能采購到去乙基胺碘酮標(biāo)準(zhǔn)品，且紫外檢測器的靈敏度也不夠高，故未能同時測定該代謝物，這是本實(shí)驗(yàn)的局限性。

【參考文獻(xiàn)】

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