王秀麗 展翼翼 周欣

摘要目的：探討非小細(xì)胞肺癌患者血清中肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子水平檢測(cè)與EGFR基因突變的關(guān)系。方法：收治ⅢB～Ⅳ期非小細(xì)胞肺癌患者69例，檢測(cè)血清中肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）水平，分析血清HGF水平與EGFR基因突變的關(guān)系。結(jié)果：69例非小細(xì)胞肺癌患者中檢出EGFR野生型和耐藥突變（20-T790M）32例（46.4%）；EGFR基因敏感突變型35例（50.7%），其中Exon-19 Del 16例，Exon-21 L858R 19例；未知類型2例；EGFR基因敏感突變組在給予一線分子靶向治療后，出現(xiàn)耐藥14例，耐藥后血漿HGF水平[（989.4±11.5）pg/m Ll較治療前[（421.1±11.7）pg/mL]明顯升高（P<0.05）。結(jié)論：血清肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子在一定程度上可以預(yù)測(cè)EGFR基因突變情況，進(jìn)而可以預(yù)測(cè)非小細(xì)胞肺癌患者EGFR-TKI耐藥情況。

關(guān)鍵詞非小細(xì)胞肺癌；肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子；EGFR；基因突變

在臨床工作中，我們發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)1年酪氨酸激酶抑制劑（TKI）治療后大部分表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）敏感突變的非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者都產(chǎn)生了獲得性耐藥，其耐藥機(jī)制尚不完全明確?；A(chǔ)研究表明肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）信號(hào)通路的異常激活在耐藥過(guò)程中產(chǎn)生重要影響。本研究通過(guò)檢測(cè)晚期NSCLC患者TKI治療前后血清中HGF的含量以及EGFR基因突變情況，探討NSCLC患者血清HGF與EGFR基因突變之間的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

資料與方法

2015年4月-2016年10月收治ⅢB～Ⅳ期NSCLC患者69例，男36例，女33例；年齡34～85歲，平均（58.3±4.9）歲；臨床分期：ⅢB期15例，Ⅳ期54例；病理類型：腺癌52例，鱗癌15例，未確定2例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理或細(xì)胞學(xué)證實(shí)為NSCLC；②均為初治患者；③患者及家屬知情同意，愿意配合本次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有EGFR-TKI治療禁忌證；②合并嚴(yán)重感染或其他重要器官疾患；③預(yù)期生存時(shí)間<3個(gè)月。

方法：①EGFR基因檢測(cè)：所有納入對(duì)象均進(jìn)行EGFR基因突變檢測(cè)，根據(jù)基因檢測(cè)結(jié)果分為EGFR基因敏感突變型（19-Del、21-L858R）與EGFR野生型。EGFR基因敏感突變（19-Del、21-L858R]患者確診后給予EGFR-TKI藥物治療。EGFR基因檢測(cè)方法：采用實(shí)時(shí)熒光PCR及多重PCR-STR方法檢測(cè)，主要檢測(cè)突變點(diǎn)18、19、20和21號(hào)外顯子。②HGF的測(cè)定：抽取患者清晨空腹血5 mL，分離血漿，置于20%冰箱保存。采用ELISA方法測(cè)定血漿中HGF含量，EGFR基因敏感突變患者出現(xiàn)耐藥后再次測(cè)定其血清HGF水平。

觀察指標(biāo)：記錄患者EGFR基因突變情況以及血清HGF水平。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用（x±s）形式表示，采用t檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

EGFR突變狀態(tài)：69例NSCLC癌患者中檢出EGFR野生型32例（46.4%）；EGFR基因敏感突變型35例（50.7%），其中Exon-19 De]16例，Exon-21 L858R 19例；未知類型2例。納入患者一般資料，見(jiàn)表1。

EGFR基因突變型、野生型與血清HGF水平的比較：與野生型相比，EGFR敏感突變型血清HGF水平明顯低于野生型（P<0.05）；亞組分析，男性、鱗癌、吸煙、EGFR野生型腫瘤患者的HGF水平較高，而女性、腺癌、不吸煙、EGFR敏感突變型血清HGF水平較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

TKI耐藥前后患者血清HGF水平的比較：EGFR基因敏感突變患者在給予一線分子靶向治療后，至2017年3月，出現(xiàn)疾病進(jìn)展14例，在疾病進(jìn)展后，二線治療前，再次抽取患者血清，檢測(cè)HGF水平，對(duì)比14例患者靶向治療前與出現(xiàn)耐藥后的血清HGF水平，耐藥后血清HGF水平（989.4±11.5）pg/mL較治療前血漿HGF水平（421.1±11.7）pg/mL明顯升高（P<0.05），見(jiàn)表3。

討論

我國(guó)肺癌病死率較高，臨床工作中我們常用EGFR-TKI治療晚期NSCLC，已取得良好的遠(yuǎn)近期療效，能明顯提高患者的生活質(zhì)量。然而EGFR-TKI可存在嚴(yán)重的原發(fā)和繼發(fā)耐藥問(wèn)題，嚴(yán)重影響藥物的長(zhǎng)期使用。在眾多EGFR-TKI耐藥機(jī)制中，HGF/上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化因子（MET）信號(hào)通路的異常激活在原發(fā)性耐藥和繼發(fā)性耐藥中都發(fā)揮了重要作用。肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體（HGFR）是一種酪氨酸激酶受體，與HGF結(jié)合后通過(guò)觸發(fā)HGFR二聚化，進(jìn)而啟動(dòng)下游信號(hào)通路，從而影響細(xì)胞的增殖、運(yùn)動(dòng)等功能。HGF/MET信號(hào)通路異常激活包括HGF和HGFR過(guò)表達(dá)、MET擴(kuò)增和突變。其中發(fā)生率最高的是HGF和HGFR過(guò)表達(dá)。

本研究結(jié)果顯示NSCLC患者69例中檢出EGFR野生型32例（46.4%）；EGFR基因敏感突變型35例（50.7%），其中Exon-19 Del 16例，Exon-21 L858R 19例；未知類型2例；與野生型相比，EGFR敏感突變患者血清HGF水平明顯低于野生型（P<0.05）。由此可見(jiàn)，EGFR野生型患者血清HGF水平明顯高于EGFR突變者，這支持不同EGFR基因狀態(tài)患者應(yīng)用吉非替尼后所表現(xiàn)的不同結(jié)果。

EGFR基因敏感突變患者在給予一線分子靶向治療后，出現(xiàn)耐藥14例，耐藥后血清HGF水平較治療前明顯升高（P<0.05），說(shuō)明患者血清HGF水平是促進(jìn)EGFR-TKI藥物耐藥的重要因素。

耐藥現(xiàn)象對(duì)于癌癥患者療效以及生存期產(chǎn)生重要影響，克服耐藥是臨床醫(yī)師研究的熱點(diǎn)，針對(duì)不同耐藥機(jī)制聯(lián)合靶向治療可在保證藥物療效的同時(shí)，避免耐藥的發(fā)生。本研究證實(shí)了HGF可通過(guò)多種途徑干擾耐藥的發(fā)生，針對(duì)HGF的多個(gè)靶向藥物與EGFR-TKI藥物聯(lián)用，或許可以延長(zhǎng)患者的生存期，但仍需進(jìn)行大量研究證實(shí)。