乳腺癌中主要發(fā)生在女性，男性很少[1]。目前治療乳腺癌主要是以前哨淋巴結(jié)活檢(sentinel lymph node biopsy，SLNB)代替腋窩淋巴結(jié)清掃(axillary lymph node dissection，ALND)來進(jìn)行治療。前哨淋巴結(jié)(sentinel lymph node，SLN)是原發(fā)腫瘤所必經(jīng)的第一批特殊的淋巴結(jié)，最能反映淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移檢測不準(zhǔn)確，是淋巴結(jié)陰性腫瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)的原因之一，前哨淋巴結(jié)活檢是結(jié)合了淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移對患者進(jìn)行檢測，明確了腫瘤的分期，為患者的治療提供了準(zhǔn)確信息[2]。隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展和各個(gè)專家的研究，用放射性膠體和γ-探測儀定位乳腺癌前哨淋巴結(jié)和帶放射性標(biāo)記的血清白蛋白定位前哨淋巴結(jié)，成功率高達(dá)95%，但國內(nèi)相關(guān)應(yīng)用比較少，因此需進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)將對乳腺癌前哨淋巴結(jié)活檢及微轉(zhuǎn)移檢測對乳腺癌的臨床診療價(jià)值做出分析。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2015年5月至2017年6月間，于本院確診并接受治療的乳腺癌患者共133例，患者均為女性，年齡29～71歲，病程時(shí)間2～6年，活檢病理診斷為浸潤性導(dǎo)管癌或單純性導(dǎo)管原位癌。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床無腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，腫塊經(jīng)粗針穿刺或活檢病理診斷為浸潤性導(dǎo)管癌，無腋部手術(shù)史的患者；自愿加入本次研究的患者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：存在術(shù)前放化療史以及切取SLN后沒有進(jìn)行監(jiān)測的患者；不愿加入本次研究的患者。

1.3 研究方法

參與本次研究的133例患者，先行前哨淋巴結(jié)定位活檢術(shù)，然后行腋窩淋巴結(jié)清掃術(shù)[3-4]。每例患者淋巴結(jié)切除6～25枚，共計(jì)1995枚。每例檢出前哨淋巴結(jié)1～5枚，共399枚；每例檢出非前哨淋巴結(jié)5～20枚，共1596枚。將每例患者切除的淋巴結(jié)1867枚行常規(guī)單層切片HE染色，并每枚隔100 μm的深度連續(xù)切片進(jìn)行卡納琳免疫組化染色法。用微波修復(fù)抗原法將其置入微波爐加熱10～15 min，取出后自然冷卻。PBS每次間隔3～5 min進(jìn)行沖洗；依次滴加AE1/AE3-抗工作液、第二代生物標(biāo)記二抗工作液、第二代辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液，每次滴加工作液后進(jìn)行PBS沖洗3次，放置室溫進(jìn)行孵育。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌患者淋巴結(jié)切除情況

參與本次研究的133例乳腺癌患者中，人均切除淋巴結(jié)(32.3±14.7)枚，共1995枚。每例檢出前哨淋巴結(jié)1～5枚，平均3枚，共399枚；每例檢出非前哨淋巴結(jié)5～20枚，平均(12.5±2.4)枚，共1596枚。

2.2 前哨淋巴結(jié)內(nèi)轉(zhuǎn)移灶情況

研究中發(fā)現(xiàn)，單一層面切片的HE染色，前哨淋巴結(jié)發(fā)現(xiàn)45枚(8例)(17.7%)、非前哨淋巴結(jié)41枚(14例)(34.1%)發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移。對365枚前哨淋巴結(jié)行多層切片HE染色及免疫組化染色檢測，發(fā)現(xiàn)單層切片常規(guī)HE染色前哨淋巴結(jié)均有微小轉(zhuǎn)移，余下HE染色陰性的前哨淋巴結(jié)有微小轉(zhuǎn)移灶，直徑均小于2 mm，累計(jì)有96枚前哨淋巴結(jié)內(nèi)有轉(zhuǎn)移灶。

對常規(guī)單一層面切片HE染色的患者，非前哨淋巴結(jié)行多層切片HE染色檢測，發(fā)現(xiàn)有微小轉(zhuǎn)移灶；對多層切片HE染色的患者進(jìn)行多層連續(xù)切片及免疫組化，發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)存在微轉(zhuǎn)移；對前哨淋巴結(jié)無微轉(zhuǎn)移患者的非前哨淋巴結(jié)行多層連續(xù)切片及免疫組化研究，尚未發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)有微轉(zhuǎn)移灶。

2.3 前哨淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移檢出情況

多層切片HE染色及免疫組化染色法對早期乳腺癌前哨淋巴結(jié)的陽性檢出率為41.37%(151/365)，單一層面切片HE染色法陽性檢出率為27.67%(101/365)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.952，P=0.031)。

3 討論

乳腺癌是婦女最常見的惡性腫瘤之一，是導(dǎo)致女性死亡的首要原因，我國以每年新增3%～4%的發(fā)病率逐年上升[5]。單純的DCIS術(shù)后沒有1例發(fā)生前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，而術(shù)前此類診斷為浸潤性導(dǎo)管癌的病例中有出現(xiàn)前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，因此乳腺導(dǎo)管原位癌是否需行前哨淋巴結(jié)活檢亟待明確[6-8]。因此，能夠在術(shù)前術(shù)中做出正確的前哨淋巴結(jié)活檢技術(shù)受到廣泛的關(guān)注。

前哨淋巴結(jié)是腫瘤細(xì)胞經(jīng)淋巴管轉(zhuǎn)移的第一站淋巴結(jié)，前哨淋巴結(jié)的存在為乳腺癌前哨淋巴結(jié)活檢技術(shù)奠定了基礎(chǔ)。本次研究說明了前哨淋巴結(jié)活檢可以準(zhǔn)確反映腋窩淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況[9-10]，并且更安全、可靠、行之有效。多層切片結(jié)合免疫組化檢測比常規(guī)單一層面的HE染色更容易發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)的癌轉(zhuǎn)移情況，并且有助于微小轉(zhuǎn)移灶的檢出。對常規(guī)HE染色陰性者采用多層切片及免疫組化AE1/AE3法發(fā)現(xiàn)有前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象[11-12]。對乳腺癌前哨淋巴結(jié)進(jìn)行免疫組化染色、HE檢查、多層面切片均發(fā)現(xiàn)有微小轉(zhuǎn)移，本次研究對常規(guī)HE染色患者行多層面切片也均發(fā)現(xiàn)有微轉(zhuǎn)移。癌轉(zhuǎn)移是細(xì)胞蛋白在淋巴結(jié)中的表達(dá)，采用不同方法進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)AE1/AE3是免疫組化最適合的抗體。資料表明，常規(guī)的病理檢測和治療，在術(shù)后復(fù)發(fā)率高達(dá)35%，且前哨淋巴結(jié)有癌轉(zhuǎn)移現(xiàn)象，因此，乳腺癌前哨淋巴結(jié)活檢亟待去證明使用，減少患者不必要的痛苦和負(fù)擔(dān)。通過本次研究發(fā)現(xiàn)連續(xù)切片及免疫組化染色AE1/AE3法與普通HE染色方法相比，對前哨淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移檢出率明顯提高，連續(xù)切片及免疫組化染色AE1/AE3法可提高腫瘤分期的精確性，還提高了前哨淋巴結(jié)對腋淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移的敏感率[13-14]。

綜上所述，前哨淋巴結(jié)活檢及微轉(zhuǎn)移的檢測可以用來指導(dǎo)是否對乳腺癌患者進(jìn)行常規(guī)腋淋巴結(jié)清掃，對其進(jìn)行連續(xù)切片及免疫組化染色檢測比普通HE染色檢出率明顯提高。