李威霖,趙吉臣,孫成波
(廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院甲殼動(dòng)物遺傳育種和繁殖實(shí)驗(yàn)室,廣東 湛江 524088)
中國(guó)是世界上最大的對(duì)蝦生產(chǎn)國(guó),對(duì)蝦產(chǎn)業(yè)是水產(chǎn)養(yǎng)殖的支柱性產(chǎn)業(yè)[1],凡納濱對(duì)蝦是最主要的養(yǎng)殖品種。近年來(lái),隨著養(yǎng)殖密度的增大和養(yǎng)殖水質(zhì)的惡化,凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei Boone)養(yǎng)殖中遇到很多問(wèn)題[2-3],人們?cè)噲D從免疫、病害和水質(zhì)環(huán)境等方面嘗試各種新的養(yǎng)殖模式,來(lái)提高養(yǎng)殖成活率。對(duì)蝦養(yǎng)殖中,中間培育是重要的一個(gè)環(huán)節(jié),從蝦苗培育到一定大小,再投入大塘養(yǎng)殖,有利于提高對(duì)蝦養(yǎng)成率。鄒宏海[4]等通過(guò)合理使用淺表水、加蓋遮陽(yáng)網(wǎng)、加強(qiáng)通風(fēng)等技術(shù)措施,使虹鱒魚(yú)(Oncorhynchus mykiss)室內(nèi)的養(yǎng)殖水溫終年控制在5~25℃,較好地解決了虹鱒魚(yú)在江蘇的度夏難題;梅肖樂(lè)[5]等通過(guò)加遮陽(yáng)網(wǎng)將史氏鱘(Acipenser schrencki Brandt)室內(nèi)養(yǎng)殖溫度終年控制在一定的范圍內(nèi),以有利于史氏鱘的生長(zhǎng)。2015年7月正大集團(tuán)卜蜂(北海)水產(chǎn)飼料有限公司推出全新養(yǎng)殖模式——夏季遮陽(yáng)網(wǎng)養(yǎng)殖模式,并在廣東省湛江市東海島與當(dāng)?shù)卣箴B(yǎng)殖戶進(jìn)行交流探討[6]。國(guó)內(nèi)外關(guān)于凡納濱對(duì)蝦遮陽(yáng)網(wǎng)模式的中間培育報(bào)道極少,其他水生生物的遮陽(yáng)網(wǎng)覆蓋養(yǎng)殖的報(bào)道也較少。本實(shí)驗(yàn)設(shè)置了遮陽(yáng)網(wǎng)條件下對(duì)凡納濱對(duì)蝦幼苗進(jìn)行中間培育,與露天組分析對(duì)比了兩種情況下的一些水質(zhì)指標(biāo)和生長(zhǎng)指標(biāo),希望可以給予養(yǎng)殖戶一定的基礎(chǔ)技術(shù)指導(dǎo)。
實(shí)驗(yàn)時(shí)間:2016年8月23日至2016年9月21日,共25 d。實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):選取湛江海洋高新科技園的6個(gè)室外對(duì)蝦中間培育池塘為實(shí)驗(yàn)池,池塘規(guī)格:寬 5 m、長(zhǎng) 10 m、高 2.0 m,2-6#、2-7#、2-8#池塘正上方完全搭蓋遮陽(yáng)網(wǎng)為實(shí)驗(yàn)組,3-20#、3-21#、3-22#池塘露天為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)對(duì)象:凡納濱對(duì)蝦幼苗,其平均體長(zhǎng)0.587 cm,平均體質(zhì)量0.0012 g,購(gòu)買(mǎi)于海南中正水產(chǎn)科技有限公司。樣品采集:每個(gè)實(shí)驗(yàn)池進(jìn)水1.5 m和放150 000尾蝦苗,8月23日8:00開(kāi)始取樣檢測(cè)各種指標(biāo),每隔5 d定時(shí)檢測(cè)三氮一磷、細(xì)菌總數(shù)、弧菌總數(shù)、浮游動(dòng)物、浮游植物、體長(zhǎng)和體質(zhì)量指標(biāo);溫度每天檢測(cè)一次;實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到第15天,24 h檢測(cè)溫度、pH、鹽度和溶解氧。實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件:實(shí)驗(yàn)養(yǎng)殖用水均經(jīng)過(guò)砂濾沉淀、強(qiáng)氯精消毒處理;除了搭蓋遮陽(yáng)網(wǎng)和露天條件不同,其他實(shí)驗(yàn)條件完全相同;實(shí)驗(yàn)到了第15天開(kāi)始定量換水,每個(gè)池塘每天定時(shí)定量換水20 cm(約池水總量10%)。
1.2.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑和用品 磺胺溶液(10 g/L)、鹽酸萘乙二胺溶液(1 g/L)、氯化鎘溶液(20%)、氯化鈉溶液(20%)、1∶1鹽酸溶液、400 g/L氫氧化鈉溶液、磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯備液(0.30 g/mL)、抗壞血酸溶液(0.1 g/mL)無(wú)氨蒸餾水、TBCS培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基等等。
1.2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器 分光光度計(jì)及配套比色皿、精密測(cè)量?jī)x、離心機(jī)搖床、電爐、抽濾瓶和濾膜抽濾裝置、真空脫氣機(jī)、移液槍、60 mL廣口瓶、25具塞比色管、45 μm微孔濾膜、25 mL比色管燒杯、量筒、玻璃棒等等。
1.2.3 實(shí)驗(yàn)方法 三氮一磷的檢測(cè)采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn):海水化學(xué)要素調(diào)查[7],其中,硝酸氮的測(cè)定采用鋅-鎘還原法;亞硝酸氮的測(cè)定采用重氮-偶氮光度法;氨氮的測(cè)定采用次溴酸鈉氧化法;養(yǎng)殖水體中可溶性活性磷濃度測(cè)定采用鉬藍(lán)比色法。檢測(cè)水體中的弧菌采用TBCS平板分離培養(yǎng)基檢測(cè)法[8];檢測(cè)水體中細(xì)菌采用營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基檢測(cè)法;采用血球計(jì)數(shù)法檢測(cè)水體中浮游動(dòng)物的濃度[9];檢測(cè)水體中浮游植物的濃度變化趨勢(shì)采用葉綠素a含量測(cè)定法[10],并由Lorenzen公式[11]的修正式計(jì)算出葉綠素a含量;采用碘量法測(cè)量水體中的溶解氧濃度[12];對(duì)蝦的體長(zhǎng)和體質(zhì)量采用直接測(cè)量法。
以Excel對(duì)數(shù)據(jù)做平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)處理并作得折線趨勢(shì)圖和條形圖,用SPSS軟件對(duì)遮陽(yáng)網(wǎng)組和露天組數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析。
0~25 d,遮陽(yáng)網(wǎng)組的氨氮濃度范圍為0.0127~2.346 mg/L,而露天組的氨氮濃度范圍為0.0124~2.495 mg/L,兩組實(shí)驗(yàn)的氨氮濃度相差不大,沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P>0.05),見(jiàn)圖1。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,兩組實(shí)驗(yàn)的硝酸氮濃度和亞硝酸氮濃度沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P>0.05)。遮陽(yáng)網(wǎng)組的活性磷濃度明顯高于露天組的活性磷濃度,遮陽(yáng)網(wǎng)的活性磷濃度最高值達(dá)到了 26.26 μmol/L,而露天組的為 17.97 μmol/L,兩組實(shí)驗(yàn)的活性磷濃度有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P<0.05),詳細(xì)見(jiàn)圖 2。
圖1 氨氮的濃度變化曲線
圖2 活性磷的濃度變化曲線
0~15 d露天組的弧菌濃度范圍為 550×103~9.7×103CFU/mL,遮陽(yáng)網(wǎng)組弧菌濃度范圍為 97×103~9.3×103CFU/mL;15 d后遮陽(yáng)網(wǎng)組的弧菌反而高于露天組的,到了20 d時(shí)達(dá)到了最高值為1.9×104CFU/mL,露天組弧菌濃度最高為5.8×103CFU/mL。兩組實(shí)驗(yàn)的弧菌含量有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P<0.05),詳細(xì)見(jiàn)圖3。0~10 d,露天組的細(xì)菌總菌含量高于遮陽(yáng)網(wǎng)組的細(xì)菌總菌含量;10~25 d,遮陽(yáng)網(wǎng)組的細(xì)菌總菌數(shù)量高于露天組的。兩組實(shí)驗(yàn)的細(xì)菌總菌含量沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P>0.05)。
圖3 24 h弧菌菌落的濃度變化曲線
整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,露天組的浮游植物密度都比遮陽(yáng)網(wǎng)組的高,兩組實(shí)驗(yàn)的浮游植物密度有極具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異性(P<0.01),詳細(xì)見(jiàn)圖4。露天組的浮游動(dòng)物密度略高于遮陽(yáng)網(wǎng)組的浮游動(dòng)物密度,兩者之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P>0.05)。
圖4 葉綠素a的密度變化曲線
實(shí)驗(yàn)中,露天組的凡納濱對(duì)蝦的體長(zhǎng)都高于遮陽(yáng)網(wǎng)組的對(duì)蝦體長(zhǎng);25 d后露天組凡納濱對(duì)蝦的平均體長(zhǎng)為4.40 cm,遮陽(yáng)網(wǎng)組的平均體長(zhǎng)為4.10 cm;兩組實(shí)驗(yàn)的體長(zhǎng)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P>0.05);詳細(xì)見(jiàn)圖5。25 d后露天組的凡納濱對(duì)蝦平均體質(zhì)量為0.58 g,遮陽(yáng)網(wǎng)組的平均體質(zhì)量為0.40 g,兩組實(shí)驗(yàn)的凡納濱對(duì)蝦體質(zhì)量極具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P<0.01),詳細(xì)見(jiàn)圖 6。
圖5 凡納濱對(duì)蝦體長(zhǎng)的變化曲線
圖6 凡納濱對(duì)蝦體質(zhì)量的變化曲線
露天組24 h的溫度處于32.4~34.5℃范圍,遮陽(yáng)網(wǎng)組的溫度處于29.4~29.8℃范圍,遮陽(yáng)網(wǎng)組24 h溫度變化0~0.4℃,露天組溫度變化0~2℃,露天組溫度比遮陽(yáng)網(wǎng)組溫度高3.0~4.9℃,詳細(xì)見(jiàn)圖7。遮 陽(yáng) 網(wǎng) 組 在 7:00—11:00、21:00—24:00 和00:00—7:00時(shí)間段的pH值大于露天組的。露天組與遮陽(yáng)網(wǎng)組的鹽度相差不大,基本處于29.5。9:00—17:00時(shí)間段,露天組的溶解氧高于遮陽(yáng)網(wǎng)組的,其他時(shí)間段,遮陽(yáng)網(wǎng)組溶解氧濃度高于露天組,詳細(xì)見(jiàn)圖8。
楊章武[13]等曾研究過(guò)溫度對(duì)凡納濱對(duì)蝦幼體生長(zhǎng)的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明溫度為29℃和35℃時(shí)對(duì)蝦生長(zhǎng)緩慢,31~32℃對(duì)蝦生長(zhǎng)較快。王吉橋[14]等開(kāi)展了水溫和鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦幼蝦能量收支的影響,表明水溫33℃時(shí)幼蝦日平均攝食率是最高的。實(shí)驗(yàn)中,露天組的24 h的溫度接近33℃,而遮陽(yáng)網(wǎng)組溫度長(zhǎng)期處于29.5℃,所以露天組的水溫更合適凡納濱對(duì)蝦幼苗的生長(zhǎng)。遮陽(yáng)網(wǎng)對(duì)養(yǎng)殖水體中的鹽度影響不大,兩組實(shí)驗(yàn)的鹽度24 h檢測(cè)中多數(shù)時(shí)間穩(wěn)定在29.5左右。海洋生物的最佳pH值范圍為7.5~8.5之間[15],兩組池塘的pH值大部分時(shí)間都屬于這個(gè)范圍之內(nèi),對(duì)對(duì)蝦的生長(zhǎng)沒(méi)有影響。因?yàn)榘滋礻?yáng)光充足,遮陽(yáng)網(wǎng)組光合作用明顯比遮陽(yáng)網(wǎng)組的強(qiáng),所以白天露天組的溶解氧高于遮陽(yáng)網(wǎng)組。沒(méi)有了陽(yáng)光,在充氧條件相同的情況下,露天組的對(duì)蝦因?yàn)殚L(zhǎng)得快和浮游生物多,需要消耗的氧氣更多,所以同時(shí)期的遮陽(yáng)網(wǎng)組的溶解氧高于露天組。
圖7 24 h溫度變化曲線
圖8 24 h溶解氧變化曲線
植物吸收氮磷進(jìn)行生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的各種代謝活動(dòng)[16],由于遮陽(yáng)網(wǎng)組的浮游植物含量比露天組低,三氮一磷無(wú)機(jī)物不能被更好吸收,所以遮陽(yáng)網(wǎng)組的三氮含量略高于露天組,遮陽(yáng)條件下的活性磷積累明顯較多。
浮游植物是第一生產(chǎn)者,光照是影響其生長(zhǎng)的最重要因素[17]。露天組,陽(yáng)光充足,氮磷更好地被浮游植物吸收,所以浮游植物生長(zhǎng)旺盛,浮游植物密度高于遮陽(yáng)網(wǎng)組。一些有益微藻能調(diào)節(jié)水體溶氧量(DO)和酸堿度(pH),吸收氨氮和亞硝氮等有害物質(zhì),有效地調(diào)控養(yǎng)殖環(huán)境[18]。浮游植物有利于調(diào)節(jié)水體中的有害物質(zhì),有利于對(duì)蝦生長(zhǎng),而搭蓋遮陽(yáng)網(wǎng)抑制浮游植物的生長(zhǎng),浮游植物數(shù)量減少,反而增加了有害物質(zhì)的積累。因?yàn)楦∮蝿?dòng)物多數(shù)作為第一消費(fèi)者以浮游植物為食,所以露天組的浮游動(dòng)物也偏高。養(yǎng)殖前期對(duì)蝦主要以浮游動(dòng)物為食[19],而浮游動(dòng)物通過(guò)攝食浮游植物大量繁殖可以為對(duì)蝦提供部分食物。所以遮陽(yáng)網(wǎng)條件下,抑制了浮游植物和浮游動(dòng)物的生長(zhǎng),不利于有害物質(zhì)的降解循環(huán),減少了對(duì)蝦的食物來(lái)源。
養(yǎng)殖對(duì)蝦的高密度和投餌使得水體中的有機(jī)物含量升高,導(dǎo)致了異養(yǎng)細(xì)菌大量繁殖[20-21]。實(shí)驗(yàn)中主要檢測(cè)的是異養(yǎng)細(xì)菌,前期兩組池子中的細(xì)菌濃度一直升高,12 d后由于換水開(kāi)始下降,然后再增長(zhǎng),兩組池子的細(xì)菌含量沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異,遮陽(yáng)網(wǎng)條件下對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)影響不明顯。海水中的弧菌主要以溶藻弧菌和副溶血弧菌為主,副溶血弧菌是主要的致病弧菌,所以副溶血弧菌含量高低影響著對(duì)蝦生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)中選取TBCS培養(yǎng)基,用于分離副溶血弧菌和培養(yǎng)。副溶血弧菌主要與溫度、鹽度、pH值有關(guān)[22],前期由于露天組的溫度較高更適合弧菌的生長(zhǎng),所以露天組的弧菌含量高于遮陽(yáng)網(wǎng)組;中后期每天定時(shí)定量換海水,遮陽(yáng)網(wǎng)組的細(xì)菌和弧菌迎來(lái)一個(gè)生長(zhǎng)期,新進(jìn)的海水帶進(jìn)部分有機(jī)物,遮陽(yáng)網(wǎng)組的細(xì)菌、弧菌會(huì)迅速增長(zhǎng);而同期換定量海水的露天組,由于浮游植物含量高,生態(tài)系統(tǒng)中的有機(jī)物始終處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài),少量的海水添?yè)Q對(duì)露天組水泥池影響不大,所以細(xì)菌、弧菌濃度比遮陽(yáng)網(wǎng)組低。遮陽(yáng)網(wǎng)組的弧菌含量和露天組的弧菌含量有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異,遮陽(yáng)網(wǎng)條件下,前期可以抑制弧菌生長(zhǎng),但后期弧菌數(shù)量增長(zhǎng)較快。
遮陽(yáng)網(wǎng)池凡納濱對(duì)蝦成活率為61.4%;露天組池凡納濱對(duì)蝦成活率為68.5%,遮陽(yáng)網(wǎng)養(yǎng)殖條件下對(duì)蝦成活率更低。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,每次取樣都會(huì)檢查對(duì)蝦的健康和活力,水泥池中隨機(jī)取一瓢對(duì)蝦,用手?jǐn)噭?dòng),露天組的逆流對(duì)蝦相對(duì)較多,表明露天組對(duì)蝦活力較好。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,露天組的體長(zhǎng)和體質(zhì)量都大于遮陽(yáng)網(wǎng)組的,所以露天條件下的凡納濱對(duì)蝦在中間培育過(guò)程中生長(zhǎng)更快。
夏天室外水泥池對(duì)蝦中間培育中,搭蓋遮陽(yáng)網(wǎng)可以降低養(yǎng)殖水溫3.0~4.9℃,溫度長(zhǎng)期保持28.9~29.8℃;水中pH穩(wěn)定,略高于露天條件下的pH;鹽度沒(méi)有較大變化。遮陽(yáng)網(wǎng)條件下:亞硝酸氮、硝酸氮和氨氮含量偏高,活性磷濃度明顯升高;前12 d可以降低細(xì)菌和弧菌的含量,但后期細(xì)菌和弧菌積累更多,抑制了浮游生物的生長(zhǎng),對(duì)蝦生長(zhǎng)相對(duì)緩慢,成活率偏低。
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