郭 興 高智濤 王洪剛
(黑龍江省伊春林業(yè)科學(xué)院,伊春 153000)
北五味子(Schisandra chinensis)是主產(chǎn)于我國東北的傳統(tǒng)中藥材[1-2]。五味子中的藥效物質(zhì)主要為木脂素類化合物,果實(shí)中含量豐富,含量達(dá)到18.1%~19.2%[3],包括五味子素(Schisandrin)、五味子醇(Schisadrol)、去氧五味子素(Deoxyse-hisandrin)、Y-五味子素 (Y-Sehisandrin)及偽-Y-五味子素(Pseudo-Y-Sehisandrin)、五味子酯甲(Sehisantherin A)、五味子酯乙、丙、丁、戊(Shciasn-therni B、C、D、E)及五味子醇甲和醇乙等成分,具有多種保健功效[4]。
近年來黑木耳產(chǎn)業(yè)已極具規(guī)模,成為林區(qū)職工致富的優(yōu)選項(xiàng)目,但經(jīng)濟(jì)效益卻增長緩慢,主要是受原料、產(chǎn)品檔次等多方面條件的限制[5]。本研究將五味子添加到黑木耳栽培原料中,通過黑木耳菌絲生長,吸收五味子中的中藥成分,進(jìn)而栽培出具有更多食用保健作用的黑木耳,為黑木耳產(chǎn)品品質(zhì)和檔次的提升奠定了基礎(chǔ)。
五味子由伊春友好林業(yè)局栽培出產(chǎn),挑選無霉?fàn)€的五味子,經(jīng)烘干、粉碎處理,備用。
菌種為黑威15,由黑龍江省科學(xué)院微生物研究所提供。
試驗(yàn)藥品主要有甲醇(分析純)、氯仿(分析純)、變色酸(分析純)、五味子乙素(≥98%)。
1.2.1 試驗(yàn)配方
采用不同比例加入五味子(1.5%、3.0%、4.5%、6.0%、7.5%、9.0%、10.5%共7個(gè)配比),分別添加到黑木耳栽培原料中,按黑木耳正常生產(chǎn)方式進(jìn)行拌料、裝袋等生產(chǎn)操作,各組配方見表1。
表1 試驗(yàn)配方
1.2.2 生產(chǎn)、栽培、管理
每組配方制作100袋(料袋規(guī)格15cm×30cm),經(jīng)高壓蒸汽滅菌,在126℃、1.2 kg/cm2的工藝條件下保持3.5~4 h,然后分別接種黑威15二級(jí)種,置于20~25℃溫度下的菌房進(jìn)行培養(yǎng)。待黑木耳菌絲長滿袋后,進(jìn)行催耳、掛袋管理,并按照配方進(jìn)行單獨(dú)晾曬、單獨(dú)保存。
1.2.3 總木脂素含量的測(cè)定
1.2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
精確稱取五味子乙素5.0 mg,置于10 mL量瓶中,加氯仿至定容刻度線,分別吸取 20、40、60、80、100 μL注入20 mL試管中;另在空白試管中加入100μL氯仿,待氯仿?lián)]發(fā)后,依次加入10%變色酸水溶液 0.5 mL、濃硫酸3.0 mL、蒸餾水1.5 mL,搖勻,沸水浴30 min。此時(shí)溶液為紫紅色,用流水冷卻,在紫外光570 nm處測(cè)定吸收度,建立回歸方程[4]。
1.2.3.2 總木脂素測(cè)定
在不同配方中隨機(jī)抽取一定量的黑木耳進(jìn)行總木脂素含量檢測(cè)。精密稱取經(jīng)過烘干、粉碎的黑木耳細(xì)粉1 g,加甲醇25 mL,采用功率250 W、頻率20 kHz超聲波對(duì)其進(jìn)行超聲處理;30 min后,甲醇有一定損失,將其補(bǔ)回到原來的體積。靜置30 min后,取上清液過濾,把濾好的溶液2 mL用甲醇將其稀釋至10 mL容量瓶中,之后讓其自然干燥。最后依次加入變色酸1mL、濃硫酸7mL、蒸餾水4mL,并搖勻。完成上述操作后,貼上封口膜,置于沸水浴中30 min,待冷卻后用紫外光測(cè)其吸光度[4]。
在不同配方中各抽取10袋,觀察黑木耳菌絲生長情況,結(jié)果(表2)顯示,五味子不同添加比例的各組配方,菌絲生長比空白對(duì)照組均有提高,且菌絲白、粗壯、濃密。經(jīng)對(duì)比觀察,添加五味子量以4.5%~7.5%的比例較適宜。
表2 各組配方黑木耳菌絲生長情況比較
由表3可知,五味子的添加對(duì)提高黑木耳產(chǎn)量具有促進(jìn)作用。7組配方的黑木耳產(chǎn)量比空白對(duì)照組分別提高了 22.68%、30.00%、33.96%、40.56%、48.65%、32.62%、24.26%;絕對(duì)生物轉(zhuǎn)化率比空白對(duì)照組分別提高13.13%、13.91%、14.33%、15.04%、15.90%、14.18%、13.29%。
表3 黑木耳出耳、產(chǎn)量的比較
對(duì)制備好的試樣在紫外光570 nm處測(cè)定其吸光度,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖1)及回歸方程。
圖1 標(biāo)準(zhǔn)曲線
通過進(jìn)行紫外檢測(cè)及數(shù)據(jù)分析處理,建立如下回歸方程
試驗(yàn)結(jié)果(表4)顯示,添加1.5%、3.0%、4.5%、6.0%、7.5%、9.0%、10.5%五味子的各組配方,黑木耳中總木脂素含量比空白組分別提高28.80%、79.98%、121.14%、163.84%、199.08%、228.40%、245.05%。由此看出,通過添加五味子,提高了各配方黑木耳總木脂素的含量;配方5號(hào)(五味子添加比例為7.5%)的單袋總木脂素含量最高。
表4 添加不同比例五味子產(chǎn)出的黑木耳總木脂素含量
試驗(yàn)結(jié)果證明,黑木耳栽培原料中添加五味子可以提高產(chǎn)品的產(chǎn)量和營養(yǎng)含量,使產(chǎn)出的黑木耳含有更多的營養(yǎng)成分總木脂素;培養(yǎng)料中添加7.5%的五味子可使產(chǎn)出的黑木耳產(chǎn)量達(dá)到55.64 g/袋,比空白對(duì)照產(chǎn)量增加48.65%;總木脂素含量達(dá)到29.28 mg/g,較空白對(duì)照提高199.08%,提升了黑木耳的保健效果;平均每袋黑木耳可產(chǎn)出1 629.14 mg總木脂素。
[1] 李愛民.北五味子及其研究進(jìn)展[C].奧巖松,于澤源.96黑龍江園藝進(jìn)展[M].哈爾濱:哈爾濱工程大學(xué)出版社,1996.
[2] 李愛民.北五味子果實(shí)成熟期營養(yǎng)成分變化的研究[J].特產(chǎn)研究,2004,22(3):8-10.
[3] 仰榴青,吳向陽,徐佐旗.五味子及其制劑中木脂素類成分含量測(cè)定的研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志,2005,30(9):650-653.
[4] 張喜軍.五味子酒及飲料中五味子素變化規(guī)律的研究[D].長春:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文,2011.
[5] 高金輝,王維劍,張厚良,等.四種木質(zhì)栽培原料對(duì)黑木耳生長性狀的影響[J].森林工程,2015,31(1):43-45.