廖翠樂,戴洪法,米沛明,徐志威,潘杰文
(清遠市婦幼保健院,廣東 清遠511500)
巨細胞病毒性肺炎是患者感染巨細胞病毒 (CMV)后,以被感染細胞核及胞質(zhì)內(nèi)形成巨大的包涵體為特征的病毒性肺炎,多數(shù)為無癥狀隱性感染,但在免疫功能低下的嬰幼兒中表現(xiàn)較為嚴重,甚至導致死亡[1]。因此,對免疫功能低下的嬰幼兒CMV感染進行早期診斷具有重要的臨床意義。有研究[2]顯示,CMV-PP65抗原作為CMV感染早期表達的特異性蛋白,CMV-PP65抗原陽性表達可作為CMV肺炎的臨床診斷標準之一。本研究以免疫功能低下疑似巨細胞病毒性肺炎患兒為對象,應用化學發(fā)光法對患兒外周血CMV-PP65抗原進行檢測,探討化學發(fā)光法在免疫功能低下患兒巨細胞病毒性肺炎診斷中的臨床應用價值,具體報道如下。
1.1 一般資料
選取我院2016年1月至2017年6月間收治的100例免疫功能低下疑似巨細胞病毒性肺炎的患兒作為觀察組,所有患兒臨床ELISA檢測血清免疫五項中IgG<4 mg/L,患兒經(jīng)CT、胸片檢查符合巨細胞病毒性肺炎診斷標準[3]。其中男性56例,女性44例;年齡0~1歲,平均 (7.43±2.35)個月。另選取本院健康體檢兒童100例作為對照組,其中男性57例,女性43例;年齡0~1歲,平均 (7.76±2.42)月。兩組患兒的一般資料比較,差異均無統(tǒng)計學意義 (P>0.05)。
1.2 檢測方法
采用化學發(fā)光法對外周血多形核白細胞中CMV-PP65抗原進行檢測,取兒童外周靜脈血5 mL,經(jīng)離心分離后獲得血清,并將分離出的血清放置在-20℃的環(huán)境下保存等待檢測,注意所分離的血清不要進行反復凍融,檢測前對樣本進行常規(guī)質(zhì)控;樣本檢測結(jié)果S/Co≥1.0為陽性。同時應用ELISA法對所有樣本血清CMV-IgG及IgM抗體進行檢測[4],作為對照分析,樣本檢測結(jié)果S/Co≥1.02為陽性。本研究所用的檢驗試劑、體外診斷試劑盒及鼠抗人CMV-PP65抗原單克隆抗體、羊抗鼠IgG單克隆抗體等均來自于鄭州安圖生物工程股份有限公司,檢驗過程所有操作步驟均嚴格按照使用說明書進行。
1.3 檢測結(jié)果判斷
取所有檢測結(jié)果為陽性的兒童的血液,如果CMV-IgM陽性,則提示近期存在巨細胞病毒感染。
1.4 統(tǒng)計學方法
數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件進行分析,計數(shù)資料以率(%)表示,行χ2檢驗,以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。
2.1 兩組的化學發(fā)光法CMV-PP65抗原陽性率比較
觀察組的CMV-PP65抗原陽性率顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義 (P <0.05), 見表 1。
表1 兩組的化學發(fā)光法陽性率結(jié)果比較 [n(%)]
2.2 兩種檢測方法的陽性檢出率比較
觀察組中,化學發(fā)光法CMV-PP65抗原的陽性檢出率顯著高于ELISA法檢測血清CMV-IgM抗體的陽性檢出率 (χ2=15.171, P = 0.000)。 所有 100 例樣本中, CMV-PP65 抗原陽性為45例,CMV-IgM抗體陽性為13例,二者均陽性為11例,陽性一致率為11.00%,陰性一致率為53.00%。見表2。
表2 CMV-PP65抗原與血清CMV-IgM抗體檢測結(jié)果比較 [n(%)]
巨細胞病毒 (CMV)作為臨床易感染型病毒,在人群中的感染率非常高,可達90%以上,一旦感染便會終身攜帶[5]。CMV在免疫功能正常的感染者體內(nèi)多為隱性感染,無臨床感染癥狀,而當患者免疫功能低下時,如嚴重性疾病、器官移植后及新生兒等,CMV便會由潛伏狀態(tài)變?yōu)榛钴S狀態(tài),誘發(fā)感染性疾?。?]。臨床報道顯示,多數(shù)嬰幼兒由于免疫能力低下極易感染巨細胞病毒性肺炎,可導致患兒死亡[7]。我科每年收治大約5 000例肺炎患兒,嬰幼兒占30%左右。因此,盡早診斷出CMV性肺炎感染患兒對臨床治療及預后具有重要的意義。
傳統(tǒng)的CMV感染診斷方法以ELISA法為主,主要是通過檢測感染者體內(nèi)CMV-IgM抗體的形式對CMV感染進行診斷,對CMV活動性感染者具有一定的確診價值[8]。由于感染者機體CMV-IgM抗體的出現(xiàn)具有較長時間的延遲,當檢測結(jié)果為陽性時,患者由于感染所致的并發(fā)癥已經(jīng)處于較嚴重的狀態(tài),診斷已無實際意義。因此,臨床上需要一種敏感度和特異度均較高的診斷方法?;瘜W發(fā)光法能夠?qū)gG和IgM抗體水平進行定量分析,并且檢測全過程均由機器進行操作,避免了檢測過程或檢測結(jié)果因操作者本身或其他外界因素影響出現(xiàn)的偏差,其對IgG和IgM抗體的陽性檢出率和對CMV的診斷靈敏度、特異度以及陽性預測值都比ELISA法明顯更好[9-10]。臨床上對于CMV性肺炎的治療目前主要以抗病毒及增強免疫功能為主。因此對免疫功能低下的CMV性肺炎患兒在病毒感染早期進行診斷,對其臨床治療及預后具有重要的作用。本研究結(jié)果顯示,化學發(fā)光法的陽性檢出率明顯高于ELISA法,差異有統(tǒng)計學意義 (P<0.05),且敏感度及特異度均較高。
綜上所述,應用化學發(fā)光法能夠在巨細胞病毒感染早期快速確診,為免疫功能低下巨細胞病毒性肺炎患兒的早期預防、診斷及治療提供一定的依據(jù),有利于改善患兒預后。
[1] 陳杰華,鄭躍杰,馬紅玲,等.免疫正常嬰兒肺泡灌洗液巨細胞病毒DNA檢測陽性與抗病毒治療必要性探討 [J].兒科藥學雜志,2017,28(2):4-8.
[2] 陳杰華,鄭躍杰,馬紅玲,等.免疫正常嬰兒肺泡灌洗液巨細胞病毒DNA檢測陽性與抗病毒治療必要性探討 [J].兒科藥學雜志,2017,23(2):4-8.
[3] Ego A,Preiser JC,Vincent JL.Impact of diagnostic criteria on the incidence of ventilator-associated pneumonia[J].Chest,2015,147(2):347-355.
[4] 楊莉,萬紅.巨細胞病毒感染與早產(chǎn)兒支氣管肺發(fā)育不良的相關性探討 [J].臨床肺科雜志,2013,18(12):2220-2221.
[5] Ran LH,Bao L.Research advances in breast milk-acquired cytomegalovirus infection in premature infants[J].Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi,2016,18(10):931-936.
[6] Giménez E,Blanco-Lobo P,Munoz-Cobo B,et al.Role of cytomegalovirus(CMV)-specific polyfunctional CD8+T-cells and antibodies neutralizing virus epithelial infection in the control of CMV infection in an allogeneic stem-cell transplantation setting[J].J Gen Virol,2015,96(9):2822-2831.
[7] 王姝,馮斌.支氣管肺泡灌洗液聯(lián)合血清學診斷免疫正常嬰兒巨細胞病毒肺炎分析 [J].罕少疾病雜志,2016,23(2):14-16.
[8] 張川,邵勇,高治忠,等.即刻早期抗原-mRNA測定對腎移植后巨細胞病毒感染的診斷價值 [J].中國綜合臨床,2013,29(7):714-717.
[9] 趙林勝,趙麗,張愛華,等.CMVpp65抗原血癥改良法檢測兒童外周血1536例 [J].武警后勤學院學報 (醫(yī)學版),2016,10(5):386-388.
[10]王建,曹偉鋒,毛月燕,等.流式細胞術檢測人巨細胞病毒活動性感染檢測方法的建立及檢測效果評價 [J].病毒學報,2017,9(3):450-454.