査文勇

（上海上藥第一生化藥業(yè)有限公司，上海200240）

0 引言

長(zhǎng)期以來(lái)注射用腺苷鈷胺中原料腺苷輔酶維生素B12含量的不穩(wěn)定性一直限制著產(chǎn)品質(zhì)量的提升，不僅影響生產(chǎn)進(jìn)度，而且產(chǎn)品的合格率低。因此，解決腺苷鈷胺中維生素B12含量不穩(wěn)定的問(wèn)題成了首要任務(wù)。我們?cè)陂L(zhǎng)期的注射用腺苷鈷胺生產(chǎn)與小樣試驗(yàn)過(guò)程中，逐漸發(fā)現(xiàn)了問(wèn)題的癥結(jié)所在，并進(jìn)行了不斷的改進(jìn)研究，通過(guò)改良生產(chǎn)工藝，采用避光、控制水溫、通入氮?dú)獾确椒?，改善了影響維生素B12含量穩(wěn)定性的因素，其中水溫控制尤為關(guān)鍵。

本文針對(duì)腺苷鈷胺注射用水的水溫控制這個(gè)重要因素進(jìn)行了一系列試驗(yàn)并記錄了相關(guān)數(shù)據(jù)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果改良了生產(chǎn)工藝，使得產(chǎn)品的合格率及成品率都得到了一定的提高。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 處方組成

注射用腺苷鈷胺的處方組成如表1所示。

1.1.2 器具

試驗(yàn)用器具包括：不銹鋼桶、攪拌棒、不銹鋼勺、玻璃棒、不銹鋼杯子、剪刀、不銹鋼棒、高效液相色譜儀、色譜柱。

表1 處方組成

1.2 方法

1.2.1 配制注射用腺苷鈷胺

先取配制總量一半的注射用水于不銹鋼桶內(nèi)，然后稱(chēng)取一定配制量的氯化鈉加入上述不銹鋼桶內(nèi)，用玻璃棒攪拌溶解均勻后，精確稱(chēng)取腺苷，加入上述溶液中，用玻璃棒攪拌溶解均勻；再稱(chēng)取一定配制量的腺苷輔酶維生素B12原料，置于塑料容器內(nèi)，用注射用水溶解后，加入上述溶液中，用玻璃棒攪拌溶解均勻；最后，將一定配制量的甘露醇溶液加入上述溶液中，用注射用水稀釋至總量，并用玻璃棒攪拌溶解均勻。取樣分析所配制注射用腺苷鈷胺的pH值，應(yīng)控制在5.5～7.0。

1.2.2 分析項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)

中間體分析項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)如表2所示。

（4）精確度，從重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性三個(gè)層次考察，一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示；

（5）穩(wěn)定性考察；

（6）檢測(cè)限，從樣品中檢測(cè)待測(cè)物質(zhì)的最小濃度或最小量，一般以基質(zhì)空白所產(chǎn)生的儀器背景信號(hào)3倍值的相應(yīng)量，或者以基質(zhì)空白產(chǎn)生的背景信號(hào)平均值加上3倍的均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差為檢測(cè)限；

（7）定量限，樣品中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具有一定的準(zhǔn)確度，常用信噪比法確定定量限。

表2 中間體分析項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)

1.2.2.1 腺苷鈷胺片中腺苷鈷胺含量的HPLC測(cè)定方法

建立產(chǎn)品定量分析色譜方法首先需要查閱文獻(xiàn)等相關(guān)資料，了解產(chǎn)品的物理、化學(xué)性質(zhì)及其預(yù)處理方法，確定儀器配置（包括使用的HPLC型號(hào)、色譜柱類(lèi)型、檢測(cè)器類(lèi)型、流動(dòng)相等），再確定初始試驗(yàn)條件，進(jìn)一步優(yōu)化試驗(yàn)條件。

在優(yōu)化試驗(yàn)條件時(shí)，一般用相鄰峰的分離度作為考察指標(biāo)之一，分離度R大于1.5作為相鄰兩組峰已完全分離的標(biāo)志。

當(dāng)確定好試驗(yàn)條件后，需要進(jìn)一步作方法驗(yàn)證，包括：

（1）專(zhuān)屬性試驗(yàn)，確定被測(cè)組分色譜峰的一致性；

（2）線性關(guān)系考察，證明產(chǎn)品在某質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，濃度與峰面積的線性關(guān)系良好；

（3）準(zhǔn)確度，一般用回收率表示，指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度；

劉紅莉等在建立腺苷鈷胺片腺苷鈷胺含量的HPLC測(cè)定方法時(shí)，提出采用Inertsil的ODS-3色譜柱（250 mm×4.6 mm，5μm），以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液（15∶85，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.2）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)260 nm，流速1.0 mL/min。測(cè)定結(jié)果：腺苷鈷胺質(zhì)量濃度在20～500μg/mL范圍內(nèi)，與峰面積的線性關(guān)系良好，得到的回歸方程為：A=8.797 36C+4.202 2（r=0.999 9）。結(jié)論：HPLC測(cè)定法操作簡(jiǎn)單，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，可用于腺苷鈷胺片腺苷鈷胺的含量和含量均勻度的測(cè)定。

1.2.2.2 測(cè)定原理

高效液相色譜儀系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次吸附-解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。

本試驗(yàn)所用高效液相色譜儀系統(tǒng)由1個(gè)LC-10ATvp溶劑輸送泵、Rheodyne 7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥、SPD-10Avp紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器、色譜數(shù)據(jù)工作站和電腦等組成，另外還包括打印機(jī)、不間斷電源等輔助設(shè)備。

表3 30～39℃水溫下維生素B12的pH值及含量

表4 40～50℃水溫下維生素B12的pH值及含量

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同水溫小樣試驗(yàn)（規(guī)格：0.5 mg/瓶）

現(xiàn)用同一批號(hào)的原料輔酶腺苷維生素B12（02140906）進(jìn)行不同配制水溫對(duì)腺苷鈷胺中維生素B12含量影響的小樣試驗(yàn)。

2.1.1 30～39℃水溫小樣試驗(yàn)

首先，量取一半體積的注射用水至配液桶中，投入輔料氯化鈉及腺苷，待其溶解后，避光稱(chēng)取腺苷輔酶維生素B12，放入小勺加入注射用水，用玻璃棒攪拌溶解，由于B12量比較多，一次溶解不徹底，所以待小勺藥液沉淀后將上層的已溶解的藥液倒入大桶中，小勺繼續(xù)加入注射用水?dāng)嚢枞芙?，如此重?fù)，直至小勺中的B12充分溶解。最后，倒入賦形劑甘露醇，因?yàn)檫^(guò)早加賦形劑會(huì)導(dǎo)致水溫快速下降，使得大桶中的B12得不到充分溶解。取樣測(cè)藥液中維生素B12的pH值及含量，結(jié)果如表3所示。

由表3可知，170301批、170302批的維生素B12含量均不符合工藝要求，觀察配液桶中藥液發(fā)現(xiàn)，配液桶中有少量B12未能充分溶解，沉淀于桶底，繼續(xù)攪拌仍未能溶解。

2.1.2 40～50℃水溫小樣試驗(yàn)

首先，量取一半體積的注射用水至配液桶中，投入輔料氯化鈉及腺苷，待其溶解后，避光稱(chēng)取腺苷輔酶維生素B12，放入小勺加入注射用水，用玻璃棒攪拌溶解，由于B12量比較多，一次溶解不徹底，所以待小勺藥液沉淀后將上層的已溶解的藥液倒入大桶中，小勺繼續(xù)加入注射用水?dāng)嚢枞芙猓绱酥貜?fù)，直至小勺中的B12充分溶解。最后，倒入賦形劑甘露醇。取樣測(cè)藥液中維生素B12的pH值及含量，結(jié)果如表4所示。

由表4可知，四批小樣中的維生素B12均充分溶解，并且pH值及含量均符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.1.3 51～60℃水溫小樣試驗(yàn)

首先，量取一半體積的注射用水至配液桶中，投入輔料氯化鈉及腺苷，待其溶解后，避光稱(chēng)取腺苷輔酶維生素B12，放入小勺加入注射用水，用玻璃棒攪拌溶解，由于B12量比較多，一次溶解不徹底，所以待小勺藥液沉淀后將上層的已溶解的藥液倒入大桶中，小勺繼續(xù)加入注射用水?dāng)嚢枞芙?，如此重?fù)，直至小勺中的B12充分溶解。最后，倒入賦形劑甘露醇。取樣測(cè)藥液中維生素B12的pH值及含量，結(jié)果如表5所示。

由表5可知，170310批、170311批、170312批的維生素B12含量均低于控制下限，觀察藥液溶解情況發(fā)現(xiàn)，維生素B12并無(wú)沉淀，藥液已得到充分溶解。

2.1.4 61～70℃水溫小樣試驗(yàn)

首先，量取一半體積的注射用水至配液桶中，投入輔料氯化鈉及腺苷，待其溶解后，避光稱(chēng)取腺苷輔酶維生素B12，放入小勺加入注射用水，用玻璃棒攪拌溶解，由于B12量比較多，一次溶解不徹底，所以待小勺藥液沉淀后將上層的已溶解的藥液倒入大桶中，小勺繼續(xù)加入注射用水?dāng)嚢枞芙猓绱酥貜?fù)，直至小勺中的B12充分溶解。最后，倒入賦形劑甘露醇。取樣測(cè)藥液中維生素B12的pH值及含量，結(jié)果如表6所示。

由表6可知，四批小樣中的維生素B12均徹底溶解，但含量均不符合標(biāo)準(zhǔn)。

表5 51～60℃水溫下維生素B12的pH值及含量

表6 61～70℃水溫下維生素B12的pH值及含量

表7 30～39℃水溫下維生素B12的pH值及含量

2.2 不同水溫小樣試驗(yàn)（規(guī)格：1.5 mg/瓶）

現(xiàn)用同一批號(hào)的原料輔酶腺苷維生素B12（02160904）進(jìn)行不同配制水溫對(duì)腺苷鈷胺中維生素B12含量影響的小樣試驗(yàn)。

2.2.1 30～39℃水溫小樣試驗(yàn)

首先，量取一半體積的注射用水至配液桶中，投入輔料氯化鈉及腺苷，待其溶解后，避光稱(chēng)取腺苷輔酶維生素B12，放入小勺加入注射用水，用玻璃棒攪拌溶解，由于B12量比較多，一次溶解不徹底，所以待小勺藥液沉淀后將上層的已溶解的藥液倒入大桶中，小勺繼續(xù)加入注射用水?dāng)嚢枞芙猓绱酥貜?fù)，直至小勺中的B12充分溶解。最后，倒入賦形劑甘露醇。取樣測(cè)藥液中維生素B12的pH值及含量，結(jié)果如表7所示。

由表7可知，由于水溫不高且維生素B12量多，導(dǎo)致B12溶解不充分，桶底有較多的原料未溶解，維生素B12含量均不符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.2.2 40～50℃水溫小樣試驗(yàn)

首先，量取一半體積的注射用水至配液桶中，投入輔料氯化鈉及腺苷，待其溶解后，避光稱(chēng)取腺苷輔酶維生素B12，放入小勺加入注射用水，用玻璃棒攪拌溶解，由于B12量比較多，一次溶解不徹底，所以待小勺藥液沉淀后將上層的已溶解的藥液倒入大桶中，小勺繼續(xù)加入注射用水?dāng)嚢枞芙?，如此重?fù)，直至小勺中的B12充分溶解。最后，倒入賦形劑甘露醇。取樣測(cè)藥液中維生素B12的pH值及含量，結(jié)果如表8所示。

由表8可知，四批小樣中的維生素B12均充分溶解，且桶底未見(jiàn)未溶解的維生素B12原料，維生素B12的pH值及含量均符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.2.3 51～60℃水溫小樣試驗(yàn)

首先，量取一半體積的注射用水至配液桶中，投入輔料氯化鈉及腺苷，待其溶解后，避光稱(chēng)取腺苷輔酶維生素B12，放入小勺加入注射用水，用玻璃棒攪拌溶解，由于B12量比較多，一次溶解不徹底，所以待小勺藥液沉淀后將上層的已溶解的藥液倒入大桶中，小勺繼續(xù)加入注射用水?dāng)嚢枞芙?，如此重?fù)，直至小勺中的B12充分溶解。最后，倒入賦形劑甘露醇。取樣測(cè)藥液中維生素B12的pH值及含量，結(jié)果如表9所示。

由表9可知，170810批、170811批、170812批，三批小樣中維生素B12的含量均低于控制下限，觀察藥液溶解情況發(fā)現(xiàn)，維生素B12并無(wú)沉淀，藥液已得到充分溶解。

表8 40～50℃水溫下維生素B12的pH值及含量

表9 51～60℃水溫下維生素B12的pH值及含量

表10 61～70℃水溫下維生素B12的pH值及含量

2.2.4 61～70℃水溫小樣試驗(yàn)

首先，量取一半體積的注射用水至配液桶中，投入輔料氯化鈉及腺苷，待其溶解后，避光稱(chēng)取腺苷輔酶維生素B12，放入小勺加入注射用水，用玻璃棒攪拌溶解，由于B12量比較多，一次溶解不徹底，所以待小勺藥液沉淀后將上層的已溶解的藥液倒入大桶中，小勺繼續(xù)加入注射用水?dāng)嚢枞芙?，如此重?fù)，直至小勺中的B12充分溶解。最后，倒入賦形劑甘露醇。取樣測(cè)藥液中維生素B12的pH值及含量，結(jié)果如表10所示。

由表10可知，四批小樣中的維生素B12均徹底溶解，桶底部未見(jiàn)未溶解的原料，但維生素B12的含量均不符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.3 小樣試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)以上不同水溫、不同規(guī)格的小樣試驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論：在配制注射用腺苷鈷胺時(shí)，注射用水的溫度控制在40～50℃時(shí)，注射用腺苷鈷胺中的主要原料維生素B12溶解最徹底，用于溶解的不銹鋼勺以及配制用的不銹鋼桶底部都未見(jiàn)未溶解的維生素B12，并且用該溫度配制的藥液中維生素B12的含量也均符合工藝要求，在0.5 mg/瓶與1.5 mg/瓶?jī)蓚€(gè)規(guī)格中都是如此。但是，在其他不同注射用水水溫的小樣測(cè)試中，配制的藥液在溫度低時(shí)，存在維生素B12溶解不徹底的情況，有大量的維生素B12未溶解且粘附于不銹鋼桶底部，導(dǎo)致成品率低。而配制的藥液在溫度高時(shí)，雖然維生素B12溶解徹底，但其中間體含量不穩(wěn)定，達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn)或僅達(dá)到最低限度標(biāo)準(zhǔn)，影響成品率。

3 相關(guān)問(wèn)題討論

3.1 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析

根據(jù)以上注射用水溫度對(duì)腺苷鈷胺中維生素B12含量的影響試驗(yàn)數(shù)據(jù)，可以發(fā)現(xiàn)：在40～50℃時(shí)，兩個(gè)規(guī)格的腺苷鈷胺中維生素B12的含量控制都很好，完全符合工藝要求，并且達(dá)到了100%以上；在30～39℃時(shí)，維生素B12由于水溫偏低得不到充分溶解，尤其是在規(guī)格為1.5 mg/瓶的腺苷鈷胺中，由于維生素B12的量比較多，放在不銹鋼勺中由于水溫低無(wú)法溶解，大量沉積于不銹鋼桶底部，最終無(wú)法得到充分溶解，使得腺苷鈷胺的B12含量不能保證完全控制在工藝范圍內(nèi)；在51～60℃和61～70℃時(shí)，注射用水溫度偏高，雖然維生素B12得到了充分溶解，但是對(duì)維生素B12也造成了一定的破壞，導(dǎo)致含量不穩(wěn)定。因此，水溫控制在40～50℃最為適宜。此外，對(duì)藥液配制及灌裝環(huán)境的要求也很?chē)?yán)格，全程需避光操作，因?yàn)榫S生素B12不穩(wěn)定，遇光容易分解。

經(jīng)過(guò)改進(jìn)，如今腺苷鈷胺的B12含量已趨于穩(wěn)定，這不僅大大提高了生產(chǎn)產(chǎn)量，還提高了產(chǎn)品的合格率、成品率。

3.2 腺苷鈷胺的配制問(wèn)題

3.2.1 配制的特殊性

注射用腺苷鈷胺的主要原料為腺苷輔酶維生素B12，它是遇光、遇熱極不穩(wěn)定的維生素品種。在日光下直接照射5 min，可使主藥腺苷輔酶維生素B12被完全破壞；在日光燈下直接照射24～48 h，主藥含量下降3%～5%。因此，要求在注射用腺苷鈷胺的配制過(guò)濾、灌封、燈檢、印刷包裝等過(guò)程中及各工序產(chǎn)品放置時(shí)必須嚴(yán)密避光，要求用黑布遮蓋，盡可能減少與日光燈接觸的時(shí)間。若長(zhǎng)期未生產(chǎn)該品種，則應(yīng)在再次生產(chǎn)前三批控制好產(chǎn)品中間體含量、pH值（含量控制：90%～110%；pH控制：5.5～7.0），且生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格做好避光工作。

維生素B12除在稱(chēng)料、配制、灌裝過(guò)程中需全程避光操作外，配制的水溫、攪拌均勻度等也要嚴(yán)加控制，其中配制藥液的水溫尤其關(guān)鍵。溫度過(guò)低，導(dǎo)致維生素B12溶解不徹底，含量不穩(wěn)定。以往生產(chǎn)過(guò)程中，為了能充分、快速溶解維生素B12，常用溫度略高的注射用水來(lái)溶解B12，經(jīng)測(cè)水溫在60℃左右，雖然這個(gè)溫度的注射用水能迅速溶解維生素B12，但是在一定程度上也破壞了B12，導(dǎo)致成品含量接近下限或者不達(dá)標(biāo)。在配制1.5 mg/瓶規(guī)格的注射用腺苷鈷胺時(shí)，維生素B12的量非常大，導(dǎo)致一次性無(wú)法溶解，需多次攪拌并及時(shí)將溶解的藥液傾倒入大桶中充分溶解；水溫稍微低點(diǎn)也會(huì)影響其溶解度，導(dǎo)致無(wú)法徹底溶解，影響含量。

3.2.2 現(xiàn)場(chǎng)配制注意事項(xiàng)

在配制前，應(yīng)對(duì)注射用水的溫度進(jìn)行嚴(yán)格控制，在放注射用水之前先用溫度計(jì)測(cè)試流動(dòng)注射用水的溫度，使其控制在40～50℃（最好在45℃以上）。然后，將水放在不銹鋼桶內(nèi)用作配制。注射用水的準(zhǔn)備時(shí)間不宜過(guò)早，為了使維生素B12在配制過(guò)程中更快溶解，所放的注射用水水溫偏高容易蒸發(fā)降溫，所以只需在配制之前放就可以了。

在溶解維生素B12過(guò)程中，先將原料倒在不銹鋼勺中，然后加注射用水，為了使維生素B12能充分溶解，注射用水水溫可以稍高，但不能超過(guò)50℃；再用不銹鋼棒按同一個(gè)方向攪拌3 min左右；將溶解藥液的不銹鋼勺沿?cái)嚢璋袈齼A倒入大不銹鋼桶內(nèi)，繼續(xù)加注射用水到不銹鋼勺中繼續(xù)溶解未完全溶解的維生素B12，重復(fù)多次，直到不銹鋼勺中的維生素B12溶解完為止。由于注射用腺苷鈷胺有0.5 mg/瓶和1.5 mg/瓶?jī)蓚€(gè)規(guī)格，在配制1.5 mg/瓶規(guī)格時(shí)，以上過(guò)程應(yīng)該多重復(fù)幾次，攪拌時(shí)間稍微增加1～2 min，保證維生素B12充分溶解。考慮到輔料中有大量的甘露醇會(huì)影響到最后藥液的溫度，所以最后加注射用水時(shí)，注射用水的水溫可以稍微高點(diǎn)，但不能超過(guò)50℃，使最后的藥液溫度保持在40～50℃，從而使藥品含量保持在規(guī)定范圍內(nèi)。

最后，將注射用水加至最終體積后，用不銹鋼攪拌棒繼續(xù)攪拌10 min，使腺苷鈷胺中的維生素B12在不銹鋼大桶中得到充分溶解，避免B12沉積于不銹鋼桶底部，影響藥品含量。

除了在藥液配制方面需要注意以外，無(wú)菌灌裝、人員操作等也是需要關(guān)注的環(huán)節(jié)。灌裝用瓶子必須為2 mL的棕色管制瓶。在灌裝過(guò)程中要注意避光操作，應(yīng)減少照明燈打開(kāi)的數(shù)量、時(shí)間，減少灌裝時(shí)間。藥液也需用遮光布蓋嚴(yán)實(shí)，保證避光到位，確保成品含量。

3.2.3 配制過(guò)程中遇到的問(wèn)題及解決方法

（1）放置注射用水時(shí)間過(guò)早，水溫在40～50℃，但B12含量仍偏低的問(wèn)題：在溶解維生素B12過(guò)程中，適當(dāng)增加攪拌時(shí)間以及溶解次數(shù)。如果還是無(wú)法徹底溶解，更換溶解用的注射用水。

（2）攪拌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致體積減少的問(wèn)題：根據(jù)體積的減少程度，如果少于總體積的3%水量，可以補(bǔ)充至所需體積即可。如果體積減少的量大于總體積的3%水量，應(yīng)根據(jù)減少量計(jì)算需補(bǔ)充的輔料及水量。

（3）1.5 mg/瓶規(guī)格的注射用腺苷鈷胺中維生素B12無(wú)法一次性溶解的問(wèn)題：適當(dāng)提高用于溶解的注射用水水溫，但不能超過(guò)50℃，增加溶解次數(shù)。

（4）稱(chēng)量原料時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致水溫變化的問(wèn)題：由于一些原因?qū)е路Q(chēng)量原料的時(shí)間增加，要及時(shí)測(cè)量水溫，確保水溫在所需范圍內(nèi)，如果水溫過(guò)低，應(yīng)及時(shí)更換注射用水，更換時(shí)也需注意水溫控制。

3.3 維生素B12投料量與水溫的控制

由于在配制腺苷鈷胺中存在兩個(gè)規(guī)格，在配制0.5 mg/瓶規(guī)格的腺苷鈷胺時(shí)，維生素B12的投料量不是特別多，水溫控制在40～50℃對(duì)溶解維生素B12不存在任何問(wèn)題。但是，在配制1.5 mg/瓶規(guī)格的腺苷鈷胺時(shí)，由于維生素B12投料量比較大，導(dǎo)致溶解不是非常徹底，有少量B12粘附于不銹鋼勺底部，要多次加水?dāng)嚢璨拍苁蛊涑浞秩芙?。是否可以通過(guò)提高溶解時(shí)的水溫來(lái)使維生素B12徹底溶解呢？通過(guò)試驗(yàn)可以看出，提高水溫雖然可以提高維生素B12的溶解度，溫度越高，效果越明顯，但同時(shí)發(fā)現(xiàn)最后的含量無(wú)法完全達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)或者只是接近最低標(biāo)準(zhǔn)限度。因此，只能適當(dāng)提高溶解溫度，使水溫接近但不能超過(guò)最佳溫度50℃。

在溶解時(shí)要注意不銹鋼勺中的維生素B12要充分溶解，如果加水一次不能溶解，可以先將溶解的維生素B12沿?cái)嚢璋袈齼A倒入大桶中，然后繼續(xù)加水溶解直至不銹鋼勺中的維生素B12全部溶解。

結(jié)論：投料量的增加不影響對(duì)水溫的控制，只需適當(dāng)提高水溫即可，但要注意維生素B12應(yīng)充分溶解。

3.4 賦形劑的加入順序是否影響水溫對(duì)含量的控制

在配制腺苷鈷胺時(shí)，需要加入大量的賦形劑甘露醇，由于甘露醇是液體且溫度接近常溫注射用水，大量甘露醇的加入會(huì)直接影響水溫。如果在配制時(shí)先加入甘露醇，水溫會(huì)適當(dāng)下降，可以通過(guò)加入注射用水來(lái)調(diào)節(jié)大桶內(nèi)的水溫，使其水溫控制在40～50℃。然后，再將溶解在不銹鋼勺中的維生素B12慢慢傾倒入大桶中，邊傾倒邊攪拌，防止最后大桶底部有殘留未溶解的維生素B12，影響含量。如果先在大桶內(nèi)加入溶解在不銹鋼勺中的維生素B12，邊傾倒邊攪拌，然后再加入賦形劑甘露醇，這時(shí)甘露醇的加入會(huì)影響大桶中藥液的溫度，有可能使少量的維生素B12沉積于大桶底部，不能充分溶解，即使始終用不銹鋼棒攪拌，溫度的降低仍會(huì)影響維生素B12的溶解，最后影響其含量。因此，在配制腺苷鈷胺時(shí)，賦形劑甘露醇必須在維生素B12之前加入，通過(guò)重新加入注射用水將甘露醇加入時(shí)降低的溫度重新調(diào)節(jié)到最佳溫度，再加入維生素B12就可以使其得到充分溶解。

結(jié)論：賦形劑的加入順序會(huì)影響水溫對(duì)腺苷鈷胺中維生素B12的含量，在配制中需要時(shí)刻注意，必須按照先加賦形劑再加維生素B12的投料順序操作。

3.5 其他可能影響腺苷鈷胺中維生素B12含量的因素

在配制注射用腺苷鈷胺過(guò)程中，還有一些影響維生素B12含量的因素，比如光照，本藥品屬于需避光的藥品，特別是其中的主要原料維生素B12，遇光易分解，從而影響在腺苷鈷胺中的含量。在配制過(guò)程中需要注意減少光對(duì)藥液的照射時(shí)間，盡量避免光對(duì)藥液的照射。配制完成后，應(yīng)及時(shí)將不銹鋼桶蓋上，避免燈光直接照射。

在攪拌過(guò)程中會(huì)有適當(dāng)?shù)乃幰罕徽舭l(fā)掉，少量的蒸發(fā)不會(huì)影響藥液的含量，但如果攪拌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，蒸發(fā)掉的水分將會(huì)影響藥品的含量，甚至超出標(biāo)準(zhǔn)范圍；攪拌時(shí)間過(guò)短，則會(huì)使維生素B12溶解不徹底或者不充分，從而影響最終的含量。因此，在注射用腺苷鈷胺配制過(guò)程中，攪拌時(shí)間一般控制在10 min左右為宜。

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