徐小艷，徐正軍，王相子，開 妍，陳昌海

（江蘇省動物疫病預防控制中心，江蘇南京 210036）

2016年江蘇省豬偽狂犬病血清流行病學調(diào)查

徐小艷，徐正軍，王相子，開 妍，陳昌海

（江蘇省動物疫病預防控制中心，江蘇南京 210036）

為了解江蘇省豬偽狂犬病病毒（PRV）感染和免疫情況，采用ELISA方法，對2016年采集的2 715份豬血清樣品進行PRV gE和gB抗體檢測。結果顯示：PRV gE樣品陽性率為18.49%，場點陽性率為25.07%；PRV gB樣品陽性率為55.35%，場點陽性率為70.21%。結果表明：江蘇省PRV野毒感染情況較嚴重，且免疫效果并不理想；各地市的防控效果差異較大；規(guī)模場是凈化該病的關鍵。

豬偽狂犬病；流行病學調(diào)查；監(jiān)測分析

豬偽狂犬?。≒seudorabies，PR）是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的一種急性傳染病。該病在豬群中常呈暴發(fā)性流行，引起公豬不育，妊娠母豬流產(chǎn)及產(chǎn)死胎和木乃伊胎，新生仔豬呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)障礙，育肥豬呼吸困難、生長停滯等，是危害全球養(yǎng)豬業(yè)的重大傳染病之一。2011年開始，我國暴發(fā)的一輪PR疫情對我國的養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴重損失。其突出特點是疫情范圍廣，斷奶仔豬發(fā)病也很嚴重。疫情過后許多PR陰性場轉變?yōu)殛栃詧鯷1]。研究表明，此輪疫情的主要病原是一種毒力顯著增強的PRV。其主要保護性抗原基因與以前毒株相比，發(fā)生了基因插入或缺失，是一種變異株[2-5]。為掌握江蘇省PRV野毒感染抗體和免疫抗體水平，2016年在江蘇省轄區(qū)內(nèi)采集豬血清進行PRV gE和gB抗體檢測，為該病的凈化和防控提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 樣品與采集

以行政區(qū)劃為基準，將全省劃分為13個監(jiān)測區(qū)域（地市）。每季度在13個地市進行同步抽樣監(jiān)測。養(yǎng)殖場點選擇采用隨機抽取方法，參照農(nóng)業(yè)部制定的檢查方案，1～4季度在每地市抽樣的規(guī)模豬場數(shù)量分別不少于2、3、3和3個，散養(yǎng)戶數(shù)量不少于2、4、4和4個；必要時采集屠宰場樣品。每個規(guī)模豬場或屠宰場采集樣品數(shù)量不少于15份，每個散養(yǎng)戶采集樣品3～5份。

2016年共采集13個市35個縣（市、區(qū)）339個場點的豬血清樣品2 715份。

1.2 試劑與檢測方法

1.2.1檢測試劑 豬偽狂犬病gE抗體檢測ELISA試劑盒和豬偽狂犬病gB抗體檢測ELISA試劑盒：購自洛陽萊普生信息科技有限公司。

1.2.2檢測方法 按照豬偽狂犬病gE抗體檢測ELISA試劑盒和豬偽狂犬病gB抗體檢測ELISA試劑盒說明書進行；每季度抽樣結束后即對當季采集的樣品進行抗體檢測。

1.3 結果判定

經(jīng)免疫情況調(diào)查，本調(diào)查所采集的樣品均來自使用PRV gE基因缺失疫苗的豬場，或未進行PRV疫苗免疫的散養(yǎng)戶，或經(jīng)確認豬只來自使用PRV gE基因缺失疫苗豬場的屠宰場，因此PRV gE抗體陽性可判定為PRV野毒感染。只要豬場、散養(yǎng)戶和屠宰場有1份樣品判定為抗體陽性，則判定該場點為PRV gE/gB抗體陽性場。

2 結果

2.1 PRV gE抗體檢測

共檢測豬血清2 715份，其中PRV gE抗體陽性502份，樣品陽性率為18.49%；檢測339個場點，PRV gE抗體陽性場點85個，場點陽性率為25.07%。

2.1.1不同季度檢測 1～4季度的PRV gE樣品陽性率分別為15.42%、20.59%、27.18%和14.52%，場點陽性率分別為21.74%、11.81%、59.09%和33.33%。各季度檢測結果差異極顯著（χ2=30.21，P＜0.01）。

2.1.2不同地市檢測 全省13個地市均檢出PRV gE抗體陽性樣品，各地市檢測結果差異較大，樣品陽性率和場點陽性率最高的均達100%（表1）。

2.1.3不同場點類型檢測 本調(diào)查采集的樣品來自散養(yǎng)戶、規(guī)模場和屠宰場。因屠宰場樣品數(shù)量較少，且只有1季度和3季度有檢測結果，故只比較散養(yǎng)戶和規(guī)模場兩類場點的檢測數(shù)據(jù)。散養(yǎng)戶和規(guī)模場中均檢出PRV gE抗體陽性樣品，檢測結果差異較大。樣品陽性率最高的是2季度規(guī)模場，為27.38%，場點陽性率最高的是3季度規(guī)模場，為59.09%（表2）。

表1 不同地市PRV gE抗體檢測樣品和場點陽性率統(tǒng)計單位：%

表2 不同場點類型PRV gE抗體檢測樣品和場點陽性率統(tǒng)計 單位：%

2.2 PRV gB抗體檢測

檢測豬血清2 699份，PRV gB抗體陽性1 494份，樣品陽性率為55.35%；檢測339個場點，PRV gB抗體陽性場點238個，場點陽性率為70.21%。

2.2.1不同季度檢測 1～4季度的PRV gB樣品陽性率分別為52.05%、48.22%、72.70%和60.07%，場點陽性率分別為78.26%、49.31%、95.45%和85.33%。各季度檢測結果差異極顯著（χ2=66.85，P＜0.01）。

2.2.2 不同地市檢測 13個地市中，PRV gB抗體檢測結果差異較大，樣品陽性率和場點陽性率最高的均達100%（表3）。

2.2.3不同場點類型檢測 散養(yǎng)戶和規(guī)模場PRV gB抗體檢測結果差異較大，樣品陽性率最高的是3季度的規(guī)模場，為72.70%，場點陽性率最高的是4季度的規(guī)模場，為96.67%（表4）。

表3 不同地市PRV gB抗體檢測樣品和場點陽性率統(tǒng)計單位：%

表4 不同場點類型PRV gB抗體檢測樣品和場點陽性率統(tǒng)計 單位：%

3 分析

3.1 時間分布

1～4季度，PRV gE和gB樣品抗體陽性率呈現(xiàn)相似的變化趨勢，兩種抗體場點陽性率呈現(xiàn)相同的變化趨勢，且與樣品陽性率變化趨勢基本一致（圖1），說明PRV gE和gB抗體呈現(xiàn)一定的正相關關系。3季度的抗體陽性率最高，PRV gE抗體樣品和場點陽性率分別為27.18%和59.09%，PRV gB樣品和場點陽性率分別為72.70%和95.45%，提示第3季度可能是PRV野毒最活躍的季節(jié)。

圖1 不同季度PR抗體變化趨勢

3.2 空間分布

13個地市中，有7個市的PRV gE樣品陽性率和場點陽性率較高，說明江蘇省PRV野毒感染范圍較廣，感染情況也較嚴重。

3.3 群間分布

不同監(jiān)測場點中，規(guī)模場PRV gE和gB抗體陽性率普遍高于散養(yǎng)戶，只有第4季度的PRV gE抗體略低于散養(yǎng)戶，說明規(guī)模場的PR流行較嚴重。

4 討論

本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，2016年江蘇省PRV gE樣品陽性率為18.49%，場點陽性率為25.07%；PRV gB樣品陽性率為55.35%，場點陽性率為70.21%。85個PRV gE抗體陽性場點中，樣品陽性率≤10%的5個，占5.88%；樣品陽性率在10%～50%的40個，占47.06%；樣品陽性率≥50%的40個，占47.06%。這說明江蘇省的PRV野毒感染情況較為嚴重。這些調(diào)查數(shù)據(jù)與國內(nèi)其他報道的數(shù)據(jù)有差異。周迎春等[6]在2015年安徽省部分中小規(guī)模豬場豬偽狂犬病定點監(jiān)測中，檢出PRV gE樣品陽性率為20.4%，PRV gB樣品陽性率為72.1%。林文耀等[7]開展的2011—2015年規(guī)?；i場偽狂犬病野毒感染血清流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)，全國21個省市PRV gE樣品陽性率為31.6%，場點陽性率為64.0%；江蘇省PRV gE樣品陽性率為18.7%，場點陽性率為59.6%。黨占國等[8]在2012—2015年我國部分地區(qū)規(guī)模化豬場偽狂犬病血清流行病學調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，全國16個省市PRV gE樣品陽性率為43.9%，場點陽性率為99.2%；江蘇省PRV gE樣品陽性率為42.0%。這可能與采樣地區(qū)、采樣時間、采樣群體不同密切相關。但這些調(diào)查中的PRV gE樣品陽性率、場點陽性率居高不下，PRV gB樣品陽性率、場點陽性率并不理想的結論是一致的。這提示PR在未來較長的一段時間內(nèi)仍是我國養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病之一，其預防和凈化形勢不容樂觀。

本調(diào)查發(fā)現(xiàn)的豬PRV gB樣品陽性率為55.35%。謝海波等[9]研究指出豬PRV gB樣品陽性率達到80%以上，才能較為有效地預防該病流行。江蘇省2016年4個季度的PRV gB樣品陽性率均低于80%，說明目前PR的免疫效果并不理想，疫苗使用尚未在豬群中形成有效的免疫屏障。分析其原因，可能與疫苗質(zhì)量、免疫程序合理性、豬群免疫抑制性疫病隱性感染、豬場生物安全措施等密切相關。

第3季度的PRV野毒感染情況較嚴重。該結果與黨占國等[8]的第3季度PRV gE樣品陽性率最高的結論一致。但各季度樣品陽性率變化趨勢不盡相同，原因可能與樣品采集地區(qū)有關。黨占國等[8]的研究覆蓋全國16個省市，涉及華北、西北、華東、中南、華南等區(qū)域，樣品采集區(qū)域的氣候差別很大，免疫程序也各不相同?？臻g分布中，PRV野毒感染情況較重的3個地市位于經(jīng)濟發(fā)展水平相對較好的蘇南境內(nèi)，2個市位于蘇中境內(nèi)，2個市屬于蘇北境內(nèi)；PR野毒感染情況相對較輕的2個市分別位于蘇北、蘇中境內(nèi)。因此，PR實際防控效果與當?shù)氐慕?jīng)濟發(fā)展水平無明顯相關性。各地市對該病是否足夠重視、是否將各項防控措施落到實處才是重中之重。群間分布中，規(guī)模場4個季度的PRV gE抗體樣品陽性率和場點陽性率大多顯著高于散養(yǎng)戶，說明規(guī)模場是該病防控和凈化的關鍵。

PR綜合防控是一個需要持續(xù)改進的系統(tǒng)工程。疫苗雖然能防止感染豬群發(fā)病，但不能完全阻止病毒傳播。王繼春等[10]用PR活疫苗（Bartha K61株）免疫偽狂犬病母源抗體陰性的仔豬1周后，再用致死量PRV變異株強毒攻毒，發(fā)現(xiàn)免疫過的豬只對攻毒有完全的臨床保護，沒有出現(xiàn)體溫升高等臨床癥狀，仔豬排毒持續(xù)時間和排毒量都顯著降低，但并不能完全阻止排毒。因此，除了做好PR疫苗免疫，豬場的常規(guī)消毒也需要加強。此外，偽狂犬病可自然發(fā)生于豬、牛、綿羊、犬和貓，以及多種野生動物、肉食動物。豬是該病的貯存宿主，做好豬場滅鼠工作，嚴格控制犬、貓等其它易感動物進入豬場，是阻斷場內(nèi)PR流行的必要手段。對該病的防控，需要從加強免疫，持續(xù)監(jiān)測PRV gE/gB抗體，盡早淘汰野毒感染豬只，加強生物安全管理等多方面入手，堅持不懈。只有這樣，才能構建PRV野毒感染陰性場群，最終達到凈化標準。

5 結論

本研究對2016年采集的2 715份豬血清樣品進行PRV gE和gB抗體檢測，發(fā)現(xiàn)PRV gE樣品陽性率為18.57%，場點陽性率為25.07%；PRV gB樣品陽性率為55.49%，場點陽性率為70.21%。這說明江蘇省PR野毒感染情況較嚴重，且免疫效果并不理想；各地市對該病的防控效果差異較大；與散養(yǎng)戶相比，規(guī)模場是凈化該病的關鍵。

[1] 魏春華，劉建奎，楊小燕，等. 豬偽狂犬病毒的分離鑒定及其gE基因序列分析[J]. 福建畜牧與獸醫(yī)，2012，34（4）：1-3.

[2] YU X，ZHOU Z，HU D，et al．Pathogenic pseudorabies virus，China，2012[J]. Emerging infectious diseases journal，2014，20（1）：102-104.

[3] YE C，ZHANG Q，TIAN Z，et al．Genomic characterization of emergent pseudorabies virus in China reveals marked sequence divergence：Evidence for the existence of two major genotypes[J]. Virology，2015，483：32-43.

[4] WU R，BAI C，SUN J，et al. Emergence of virulent pseudorabies virus infection in northern China [J]. Journal of veterinary science，2013，14（3）：363-365.

[5] AN T，PENG J，TIAN Z，et al. Pseudorabies virus variant in bartha-k61-vaccinated pigs，China，2012 [J].Emergence infection disease，2013，19（11）：1749-1755.

[6] 周迎春，劉華，王軍，等. 2015年安徽省部分中小規(guī)模豬場豬偽狂犬病定點監(jiān)測[J]. 動物醫(yī)學進展，2016，37（10）：127-130.

[7] 林文耀，曾容愚，李聰，等. 2011—2015年規(guī)?；i場偽狂犬病野毒感染血清流行病學調(diào)查[J]. 養(yǎng)豬，2016（2）：113-116.

[8] 黨占國，高進勇，孫哲，等. 2012—2015年我國部分地區(qū)規(guī)模化豬場偽狂犬病血清流行病學調(diào)查[J]. 畜牧與獸醫(yī)，2016，48（8）：76-79.

[9] 謝海波，何小華. 豬偽狂犬病的流行情況和預防措施[J]. 中國獸醫(yī)雜志，2001，37（6）：212-213.

[10] 王繼春，曾容愚，DANIEL T，等. 豬偽狂犬病活疫苗（Bartha K61株）對變異株的保護效力[J]. 畜牧與獸醫(yī)，2015，47（12）：1-4.

Sero Epidemiological Investigation of Porcine Pseudorabies in Jiangsu Province in 2016

Xu Xiaoyan，Xu Zhengjun，Wang Xiangzi，Kai Yan，Chen Changhai

（Jiangsu Provincial Animal Disease Prevention and Control Center，Nanjing，Jiangsu 210036，China）

In order to recognize the infection and immunity status of porcine pseudorabies virus（PRV）in Jiangsu Province，2 715 serum specimens were collected and analyzed by the ELISA to detect PRV gE and gB antibodies. The results showed that the antibody positive rate of PRV gE was 18.49%，the herd positive rate was 25.07%，the antibody positive rate of PRV gB was 55.35%，and the herd positive rate was 70.21%. The results indicated that the infection of wild-type PRV was severe and the immune effect was not ideal in Jiangsu Province. The prevention and control effect in different cities was different. And the scaled farms were the key to purify this disease.

porcine pseudorabies；surveillance；analysis

江蘇省農(nóng)業(yè)三新工程項目（SXGC〔2016〕276、SXGC〔2017〕231）

S855.3

A

1005-944X（2018）01-0007-04

10.3969/j.issn.1005-944X.2018.01.002

朱迪國）