肖漢祥,劉明津,李燕芳,張 揚(yáng),張振飛,李怡峰

(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,廣東省植物保護(hù)新技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州 510640)

廣東稻區(qū)褐飛虱對(duì)烯啶蟲胺和呋蟲胺的敏感性測(cè)定

肖漢祥,劉明津*,李燕芳**,張 揚(yáng),張振飛,李怡峰

(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,廣東省植物保護(hù)新技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州 510640)

為了科學(xué)用藥和抗性治理提供理論依據(jù)，在室內(nèi)采用稻莖浸漬法測(cè)定了采自廣東省廣州、南雄、雷州、連州、海豐、懷集和大埔等7個(gè)地方田間褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺、呋蟲胺的敏感性。 試驗(yàn)結(jié)果表明:廣東地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺的敏感性LC50值為2.3187-7.1489mg /L，抗性倍數(shù)分別為4.93-15.21倍，南雄地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺仍處于敏感階段；廣州、海豐和雷州等3個(gè)地區(qū)褐飛虱對(duì)烯啶蟲胺已產(chǎn)生低水平抗性, 大埔、連州和懷集等3個(gè)地方褐飛虱已對(duì)烯啶蟲胺產(chǎn)生中等水平抗性。廣東地區(qū)褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性LC50值為3.6696-11.8093 mg/L，抗性倍數(shù)為26.21-84.35倍，表明廣東省不同地區(qū)褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺均產(chǎn)生中等水平抗性。建議在防治褐飛虱時(shí)，對(duì)于低水平抗性的烯啶蟲胺應(yīng)輪用、混用，對(duì)中等水平抗性的呋蟲胺應(yīng)限制使用。

廣東；褐飛虱；烯啶蟲胺；呋蟲胺；敏感性

褐飛虱Nilaparvatalugens(St?l )是亞洲水稻生產(chǎn)上的一種隨季風(fēng)遷移、典型的r-對(duì)策型害蟲，在外界條件適宜時(shí)易于暴發(fā)成災(zāi)(Heinrichs，1994)。褐飛虱以成蟲和若蟲直接刺吸稻株的韌皮部汁液，造成水稻生長(zhǎng)緩慢、分蘗期延遲、癟粒增加，為害嚴(yán)重時(shí)造成水稻稻株枯死，呈“虱燒”。除造成直接危害外，褐飛虱還可以傳水稻病毒病，水稻在秧苗期感染后出現(xiàn)矮縮、不抽穗，嚴(yán)重時(shí)會(huì)影響產(chǎn)量，甚至絕收。長(zhǎng)期以來(lái)，化學(xué)防治一直被作為防治褐飛虱的最有效途徑(李汝鐸，1996)。但化學(xué)殺蟲劑持續(xù)、大量或過(guò)量、不合理使用等,致使亞洲不少國(guó)家和地區(qū)的褐飛虱對(duì)常規(guī)的有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、新煙堿類、昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑類、吡啶類、苯基吡唑類殺蟲劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性(Heinrichs，1994；梁天錫等，1996；王彥華等，2009；劉鳳沂等，2010；邵振潤(rùn)等，2011；王鵬等，2013；Mastumuraetal., 2014; 張小磊等，2016; Garroodatal., 2016)。

20世紀(jì)80年代中后期，噻嗪酮開始用于褐飛虱的防治，但在使用20后年，2005年監(jiān)測(cè)到褐飛虱對(duì)噻嗪酮產(chǎn)生低水平抗性(Wangetal., 2008a)，目前所有褐飛虱對(duì)噻嗪酮都已產(chǎn)生高水平抗性(Zhangetal., 2016)。1995年新煙堿類殺蟲劑吡蟲啉被引入我國(guó)防治褐飛虱，一直是水稻上的主要防治藥劑，但在2005年由于褐飛虱對(duì)其產(chǎn)生極高水平抗性，2005年9月28日，全國(guó)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心農(nóng)技植保函(2005)270號(hào)文件《關(guān)于中晚稻褐飛虱對(duì)吡蟲啉抗藥性情況的通報(bào)》，建議各地在水稻褐飛虱防治中暫時(shí)停止使用吡蟲啉，然而最近報(bào)道發(fā)現(xiàn)褐飛虱對(duì)吡蟲啉抗性依然有上升趨勢(shì)(Mastumuraetal., 2014; Zhangetal., 2016)。氟蟲腈也由于其對(duì)甲殼類水生生物和蜜蜂具有高風(fēng)險(xiǎn)，而且在水和土壤中降解慢，在2009年 10月1日起在水稻等水田作物中已被禁止使用。目前，烯啶蟲胺和呋蟲胺作為防治褐飛虱的主要藥劑，在一些地方被大規(guī)模使用，了解廣東不同地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺和呋蟲胺的敏感性，可以掌握褐飛虱對(duì)烯啶蟲胺和呋蟲胺的抗藥性變化，對(duì)延緩和避免其抗藥性發(fā)展、因地制宜地制定防治策略具有十分重要的意義。本文采用稻莖浸漬法，測(cè)定了廣東省廣州、南雄、雷州、連州、海豐、懷集和大埔等7個(gè)地方田間褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺、呋蟲胺的敏感性，為這兩種藥劑的科學(xué)用藥提供依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 供試?yán)ハx

分別于2015年和2016年從廣東省7個(gè)不同地方(見表1)采回褐飛虱高齡若蟲或成蟲，以未用藥劑處理過(guò)的分蘗期TN1水稻植株在溫室飼養(yǎng)，待下一代若蟲孵出，挑選蟲齡一致的3齡若蟲進(jìn)行測(cè)定。

表1 廣東褐飛虱田間種群信息

1. 2 供試藥劑

96.5%呋蟲胺原藥由江蘇常隆農(nóng)化有限公司提供；96%烯啶蟲胺原藥由安徽常泰化工有限公司提供。

1. 3 試驗(yàn)方法

采用中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《水稻褐飛虱抗藥性監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)程》的稻莖浸漬法進(jìn)行(中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部，2009)。在萬(wàn)分之一電子天平上準(zhǔn)確稱取藥劑, 用丙酮稀釋成一定濃度的母液, 以含有0.1%吐溫-80的蒸餾水作為稀釋液,按等比稀釋成5個(gè)系列濃度,備用。連根挖取健壯一致的分蘗盛期的稻株，清洗干凈，剪成長(zhǎng)約10 cm的連根稻莖，3株1組，于陰涼處晾至表面無(wú)水痕備用。將稻莖完全浸泡于藥液中約30 s，以含0.1%吐溫-80的蒸餾水為對(duì)照。取出自然晾干，以浸濕的脫脂棉包住根部放入玻璃培養(yǎng)杯中，接入標(biāo)準(zhǔn)一致的3齡若蟲，放入水平側(cè)放的玻璃培養(yǎng)杯中，每杯20頭蟲，待若蟲全部爬上稻莖或杯壁后豎直培養(yǎng)杯，每濃度重復(fù)3次。接蟲后放入26℃±1℃，光周期L ∶D=16 h ∶8 h的人工氣候箱中。處理后注意保持稻莖根中脫脂棉濕潤(rùn)，防止稻莖干枯。96 h后檢查死亡蟲數(shù)，對(duì)照組死亡率超過(guò)10%時(shí)試驗(yàn)無(wú)效。

1. 4 數(shù)據(jù)處理

采用DPS數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算藥劑毒力回歸方程、LC50值、95%置信限以及卡方值，并以LC5095%置信限是否重疊作為判斷不同地方褐飛虱對(duì)殺蟲劑的敏感性是否差異顯著的標(biāo)準(zhǔn)?？剐员稊?shù)(RR)=所測(cè)種群LC50/敏感種群LC50。抗性水平分析分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：抗性倍數(shù)為5及以下為敏感；5-10為低水平抗性；10-100為中等水平抗性；抗性倍數(shù)100以上為高水平抗性(邵振潤(rùn)等，2013)。褐飛虱對(duì)烯啶蟲胺和呋蟲胺的敏感基線分別為L(zhǎng)C50=0.47 mg/L和LC50=0.14 mg/L (王彥華等，2009；Wangetal.，2008b)。

2 結(jié)果與分析

2.1 廣東褐不同地區(qū)虱種群對(duì)烯啶蟲胺的敏感性測(cè)定

廣東不同地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺表現(xiàn)出不同的敏感性。在測(cè)定的幾個(gè)地區(qū)的褐飛虱種群中，南雄褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺的敏感性最高，LC50為2.3187 mg/L；其次依次為廣州褐飛虱種群，LC50為2.5309 mg/L；海豐褐飛虱種群，LC50為3.3323 mg/L；雷州褐飛虱種群，LC50為4.6362 mg/L；大埔褐飛虱種群，LC50為5.0280 mg/L；連州褐飛虱種群，LC50為5.4418 mg/L；懷集褐飛虱種群的敏感性最差，LC50為7.1489 mg/L。以LC5095%置信限是否重疊作為判定，只有懷集地區(qū)褐飛虱種群和海豐地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺的敏感性之間存在差異，其它地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺的敏感性無(wú)差異(表2)。

表2 廣東褐不同地區(qū)虱種群對(duì)烯啶蟲胺的敏感性測(cè)定

2.1 廣東不同地方褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性測(cè)定

廣東不同地區(qū)褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺表現(xiàn)出不同的敏感性。在測(cè)定的幾個(gè)地區(qū)的褐飛虱種群中，雷州褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性最高，LC50為3.6693 mg/L；其次依次為南雄褐飛虱種群，LC50為3.7877 mg/L；廣州褐飛虱種群，LC50為4.2837 mg/L；大埔褐飛虱種群，LC50為7.0028 mg/L；連州褐飛虱種群，LC50為 9.1622 mg/L；海豐褐飛虱種群，LC50為11.2104 mg/L；懷集褐飛虱種群的敏感性最差，LC50為11.8093 mg/L。以LC5095%置信限是否重疊作為判定，雷州褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性與連州褐飛虱種群、海豐褐飛虱種群和懷集褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性之間差異顯著，南雄褐飛虱種群和廣州褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性與海豐褐飛虱種群和懷集褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性之間差異顯著，其它地區(qū)褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性差異不顯著(表3)。

3 結(jié)論與討論

不同的藥劑，由于其本身的性質(zhì)、作用方式及作用機(jī)理等不同，從而在測(cè)定方法上會(huì)有所不同。用于褐飛虱對(duì)殺蟲劑的敏感性測(cè)定方法主要有點(diǎn)滴法(Nagate，1982)、藥膜法(王蔭長(zhǎng)等，1996)、浸苗法(張存政等，2002)和稻莖浸漬法(莊永林等，2000)。烯啶蟲胺具有卓越的內(nèi)吸性、滲透作用；呋蟲胺不僅具有觸殺、胃毒活性，而且具有極強(qiáng)的內(nèi)吸性。因此，點(diǎn)滴法和藥膜法不能顯示出它們的滲透或內(nèi)吸活性，而采用3齡若蟲作為試蟲的稻莖浸漬法則能反映出藥劑的觸殺、內(nèi)吸或滲透作用。

表3 廣東不同地方褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性測(cè)定

本研究測(cè)定的結(jié)果表明：廣東省不同地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺的敏感性不同。廣東地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺的敏感性LC50值在2.3187-7.1489 mg /L，抗性倍數(shù)分別為4.93-15.21倍，南雄褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺仍處于敏感階段；廣州、海豐和雷州等3個(gè)地區(qū)褐飛虱對(duì)烯啶蟲胺已產(chǎn)生低水平抗性；大埔、連州和懷集等3個(gè)地方褐飛虱已對(duì)烯啶蟲胺產(chǎn)生中等水平抗性。王彥華等(2009)報(bào)道褐飛虱杭州種群和寧波群對(duì)烯啶蟲胺的抗性倍數(shù)分別為0.8倍和1.4倍；劉鳳沂等(2010)報(bào)道惠州地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺的抗性倍數(shù)為0.5倍；李燕芳等(2013)報(bào)道廣州地區(qū)褐飛虱對(duì)烯啶蟲的抗性倍數(shù)為1.06倍，仍處于敏感水平。本文測(cè)定的廣東7個(gè)地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺的抗性倍數(shù)為4.93-15.21倍，說(shuō)明經(jīng)過(guò)最近幾年的持續(xù)用藥，廣東部分地方褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺已產(chǎn)生低至中等水平抗性。

廣東省不同稻區(qū)褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性不同。廣東省不同地區(qū)褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺的敏感性LC50值在3.6696-11.8093 mg /L，抗性倍數(shù)分別26.21-84.35倍。呋蟲胺為第3代新煙堿類殺蟲劑，自2005年泰國(guó)開始使用呋蟲胺防治褐飛虱，Punyawattoe等(2016)報(bào)道在泰國(guó)褐飛虱對(duì)呋蟲胺已產(chǎn)生低水平抗性。在日本，Matsumura等(2014)連續(xù)8年監(jiān)測(cè)了褐飛虱對(duì)呋蟲胺的抗藥性，結(jié)果表明褐飛虱對(duì)呋蟲胺的抗藥性上升，并且2012年呋蟲胺對(duì)褐飛虱的毒力顯著低于2006年呋蟲胺對(duì)褐飛虱的毒力。在我國(guó)，王彥華等(2008)報(bào)道褐飛虱對(duì)呋蟲胺仍處于敏感階段；張小磊等(2016)報(bào)道湖北省鄂州和武漢地區(qū)褐飛虱對(duì)呋胺已產(chǎn)生中等水平抗性。本文測(cè)定的廣東7個(gè)地區(qū)褐飛虱種群對(duì)烯啶蟲胺的抗性倍數(shù)為26.21-84.35倍，說(shuō)明經(jīng)過(guò)最近幾年的用藥，廣東省不同地區(qū)褐飛虱種群對(duì)呋蟲胺已產(chǎn)生中等水平抗性。

測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，廣東省不同地區(qū)褐飛虱種群對(duì)同一種殺蟲劑的敏感性差異較大。其中對(duì)烯啶蟲胺的敏感性，懷集地區(qū)褐飛虱種群的敏感性是南雄地區(qū)褐飛虱種群的3.08倍(7.1489/2.3187=3.08)，說(shuō)明南雄地區(qū)田間褐飛虱種群受烯啶蟲胺的選擇壓力明顯小于懷集地區(qū)田間褐飛虱種群。對(duì)呋蟲胺的敏感性，懷集地區(qū)褐飛虱種群的敏感性是雷州地區(qū)褐飛虱種群的3.22倍(11.8093/3.6693=3.08)，說(shuō)明雷州地區(qū)田間褐飛虱種群受呋蟲胺的選擇壓力明顯小于南雄田間褐飛虱種群。褐飛虱是一種遷飛性害蟲，不同地區(qū)褐飛虱種群對(duì)同一種殺蟲劑的敏感性差異，與蟲源地殺蟲劑的施用密切相關(guān)。因此，跟蹤了解蟲源地殺蟲劑的施用水平，密切監(jiān)測(cè)不同地區(qū)褐飛虱種群對(duì)本地常用殺蟲劑的敏感性變動(dòng)，根據(jù)褐飛虱種群對(duì)常用殺蟲劑的敏感性差異，因地制宜地選擇不同殺蟲劑來(lái)防治褐飛虱，從而達(dá)到既保證防治效果，又降低農(nóng)藥成本和減少農(nóng)藥對(duì)環(huán)境污染的目的。

殺蟲劑的抗性是影響水稻褐飛虱化學(xué)藥劑防治效果的主要原因，因此必需進(jìn)行有效的抗藥性治理。在水稻生長(zhǎng)中前期，使用烯啶蟲胺、呋蟲胺等速效性好、持效期長(zhǎng)的新煙堿類殺蟲劑。但在水稻生長(zhǎng)后期，田間褐飛虱成蟲和高齡若蟲過(guò)多時(shí)，建議使用毒死蜱或敵敵畏等藥劑。總之，在對(duì)褐飛虱抗藥性水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)的基礎(chǔ)上，有針對(duì)性地合理使用化學(xué)殺蟲劑，如暫停使用高水平抗藥性的藥劑，如吡蟲啉、噻嗪酮、噻蟲嗪等；限制使用中等水平抗性農(nóng)藥，如呋蟲胺，每個(gè)生長(zhǎng)季節(jié)使用1-2次為宜；輪用或混用低水平抗性的農(nóng)藥，如烯啶蟲胺。并通過(guò)選用抗蟲品種、改進(jìn)耕作方法及加強(qiáng)肥水管理等措施，來(lái)惡化其生境，或通過(guò)生物防治，來(lái)減少殺蟲劑的使用量，降低藥劑對(duì)褐飛虱的壓力，延緩抗性發(fā)展。

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DeterminationofsusceptibilityofNilaparvatalugens(St?l)tonitenpyramanddinotefuraninGuangdong

XIAO Han-Xiang, LIU Ming-Jin*,LI Yan-Fang**, ZHANG Yang， ZHANG Zhen-Fei, LI Yi-Feng

(Guangdong Provincial Key Laboratory of High Technology for Plant Protection,Plant Protection Research Institute Guangdong Academy of Agricultural Science, Guangzhou 510640, China )

To provide theoretical basis for the scientific application of insecticides and its resistance management, the susceptibility of nitenpyram and dinotefuran were tested by stem-dip method in laboratory and the tested populations ofNilaparvatalugens(St?l) collected from Guangzhou, Nanxiong, Leizhou, Lianzhou, Haifeng, Huaiji and Dapu. The results showed that different populations ofN.lugenshad different susceptibility of nitenpyram for which the LC50ranged from 2.3178 to 0.1538 mg/L, the resistance ratio ranged from 4.93 to 15.21, the population of Nanxiong was still in the sensitive stage to nitenpyram, the populations of Guangzhou, Haifeng and Leizhou had a low level of resistance to nitenpyram, the populations of Dapu, Lianzhou and Huaiji had a medium level of resistance to nitenpyram. And different populations ofN.lugenshad different susceptibility of dinotefuran for which the LC50ranged from 3.6696 to 11.8093 mg /L, the resistance ratio ranged from 26.21 to 84.35, show that the populations ofN.lugensin different areas of Guangdong Province had a medium level of resistance to the dinotefuran. It is suggested that the low level resistance of nitenpyram should be rotation and mixture, another the medium level resistance of dinotefuran should be restricted-use in the control ofN.lugens.

Guangdong;Nilaparvatalugens(St?l); nitenpyram; dinotefuran; susceptibility

肖漢祥,劉明津,李燕芳,等.廣東稻區(qū)褐飛虱對(duì)烯啶蟲胺和呋蟲胺的敏感性測(cè)定[J].環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào)，2017,39(6):1369-1373.

Q968.1;S433.39

A

1674-0858(2017)06-1369-05

廣東省省級(jí)科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015A020224011，2015A020209049,2016B020202002)；廣東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)

肖漢祥，男，1972年生，湖北天門人，副研究員，從事水稻害蟲研究工作，E-mial:290432210@qq.com

*共同第一作者Co-first author，E-mail：519734046@qq.com

**通訊作者 Author for correspondence，E-mial: 328159805 @qq.com

Received: 2017-02-24; 接受日期Accepted: 2017-07-12