姚芳園 邵征洋

1 浙江省杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院 浙江 杭州 310008

2 浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 浙江 杭州 310003

實驗研究

調(diào)中湯對功能性消化不良幼年大鼠胃腸激素的影響*

姚芳園1邵征洋2

1 浙江省杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院 浙江 杭州 310008

2 浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 浙江 杭州 310003

目的：通過觀察調(diào)中湯對功能性消化不良幼年大鼠血清胃泌素、生長抑素水平的影響，探討其作用機(jī)制。方法：將清潔級SD雄性幼年大鼠按照完全設(shè)計隨機(jī)法分組，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血清胃泌素和生長抑素含量。結(jié)果：調(diào)中湯能明顯升高模型組血清胃泌素含量（P＜0.05），降低血清生長抑素含量（P＜0.01），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：調(diào)中湯能升高功能性消化不良幼年大鼠血清胃泌素含量及降低血清生長抑素含量，并趨于正常范圍，可能是調(diào)中湯治療功能性消化不良的作用機(jī)制之一。

調(diào)中湯 功能性消化不良 幼年大鼠 胃泌素

生長抑素功能性消化不良(FD)是指有持續(xù)存在或反復(fù)發(fā)作的上腹痛、腹脹、早飽、噯氣、厭食、燒心、反酸、惡心、嘔吐等消化功能障礙癥狀,經(jīng)各項檢查排除器質(zhì)性疾病的一組臨床癥候群。本研究采用邵征洋教授的經(jīng)驗方--調(diào)中湯，以“胃腸激素”為切入點，觀察調(diào)中湯對FD幼年大鼠血清胃泌素(GAS)、生長抑素(SS)水平的影響，探討本方對FD幼年大鼠的作用機(jī)制，從而為調(diào)中湯治療功能性消化不良提供理論依據(jù)。

1 材料

1.1 實驗動物：清潔級SD雄性幼年大鼠（日齡35～40d，體重50～70g)，由浙江中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心提供。

1.2 藥物：調(diào)中湯(柴胡、白術(shù)、芍藥、陳皮、莪術(shù)、炒延胡索、半夏各6g，枳實9g，甘草3g)由浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院制劑室生產(chǎn)。多潘立酮（嗎丁啉糖漿）：西安楊森制藥有限公司，批號140215028。生理鹽水：杭州民生藥業(yè)有限公司，批號D1405014。

1.3 試劑與儀器：胃泌素、生長抑素ELISA檢測試劑盒均購自武漢博士德公司（GAS批號：E2014053005，SS批號：E2014053006）。低溫大容量高速離心機(jī)（型號：KDC-2046 低溫大容量離心機(jī)，中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)科技實業(yè)有限公司）。全波長多功能酶標(biāo)儀：Thermo公司。

2 方法

2.1 模型建立與實驗分組：清潔級SD幼年大鼠在浙江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心飼養(yǎng)室飼養(yǎng)。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，按照完全隨機(jī)設(shè)計法將36只幼年大鼠分為6組，分別為空白組、模型組、多潘立酮組、調(diào)中湯高劑量組、調(diào)中湯中劑量組、調(diào)中湯低劑量組，每組6只。除對照組每日常規(guī)飼養(yǎng)不予造模外，其余組采用不規(guī)則喂養(yǎng)、飲用冰水及夾尾刺激法造模2周后，如大鼠出現(xiàn)緊張易怒反應(yīng)，進(jìn)食飲水量明顯減少，體重減輕等情況，表明造模成功[1-4]。

2.2 給藥方法：自造模結(jié)束日起，恢復(fù)正常飲食和飲水，開始灌藥，依據(jù)文獻(xiàn)[5]及臨床經(jīng)驗總結(jié)，調(diào)中湯高、中、低劑量組分別為13.6g/kg，6.8g/kg，3.4g/kg；多潘立酮組予多潘立酮（嗎丁啉糖漿）2.1mg/kg；對照組及模型組以等體積生理鹽水灌胃，每天給藥1次，從造模后第7天開始用藥，持續(xù)給藥14天。

2.3 血清GAS和SS測定：腹主動脈取血5ml，3000r/min離心5min，取上清液-20℃保存?zhèn)溆?，測定血清GAS、SS，按照武漢博士德公司GAS、SS的ELISA試劑盒說明書進(jìn)行檢測，用酶標(biāo)分析儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），在計算機(jī)上建立EXCEL表格，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)OD值為縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按照曲線方程計算血清GAS、SS的濃度值。

2.4 統(tǒng)計學(xué)處理方法：應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 17.0軟件統(tǒng)計包建立數(shù)據(jù)庫，計量資料數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s)表示，多組間比較采用方差分析及兩兩比較，P＜0．05有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 日均體重：與正常組比較，模型組日均體重增長不明顯，有顯著性差異（P＜0.01），多潘立酮組和調(diào)中湯高、中、低劑量組均能增加功能性消化不良幼年大鼠日均體重，見表1。

3.2 胃泌素：與正常組比較，模型組大鼠血清GAS含量明顯降低(P＜0.01)；用藥組均能不同程度升高血清GAS含量（P＜0.05），調(diào)中湯高劑量組高于多潘立酮組、調(diào)中湯中、低劑量組(P＜0.05)，調(diào)中湯中、低劑量組之間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05),見表2。

表1 調(diào)中湯對FD幼年大鼠日均體重的影響（±s)

表1 調(diào)中湯對FD幼年大鼠日均體重的影響（±s)

注：與正常組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。

日均體重（g）8.78±1.35 6.01±1.21**8.65±1.02▲▲8.68±2.15▲▲8.17±1.62▲▲7.12±1.84▲組別正常組模型組多潘立酮組調(diào)中湯高劑量組調(diào)中湯中劑量組調(diào)中湯低劑量組動物數(shù)（n）666666

3.3 生長抑素：與正常組比較，模型組大鼠血清SS含量明顯升高(P＜0.01)，除低劑量組(P＞0.05),其余用藥組均能不同程度降低血清SS含量(P＜0.01)，調(diào)中湯高劑量組、中劑量組與正常組之間無明顯差異(P＞0.05)，低于多潘立酮組(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，見表2。

表2 各組FD幼年大鼠血清GAS、SS的含量（x±s)

4 討論

相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，兒童FD的發(fā)病率為10%～20%，而在兒科門診其發(fā)生率為2%～4%[6]。FD的發(fā)病機(jī)制尚不明確，國內(nèi)對FD的研究成人消化科較多，兒科FD研究尚屬初級階段。胃腸激素又稱腦腸肽，是產(chǎn)生于胃腸道內(nèi)分泌細(xì)胞與神經(jīng)細(xì)胞的一種小分子肽類活性物質(zhì)，其分泌失調(diào)是導(dǎo)致FD的重要因素。其中重要的活性物質(zhì)就是胃泌素（GAS）和生長抑素（SS）。GAS是由胃竇及十二指腸黏膜G細(xì)胞分泌，刺激胃酸、胃蛋白酶及胰液的分泌；促進(jìn)胃竇、胃體的收縮，增加胃腸道的運動，同時促進(jìn)幽門收縮，以加速胃排空[7]。有研究表明[8[9]，F(xiàn)D的發(fā)生與血清SS水平過高有關(guān)。

中醫(yī)將功能性消化不良?xì)w類于“胃脘痛”“痞滿”“厭食”等范疇，F(xiàn)D的病因以飲食、寒邪和情志為多見，其中飲食是FD最主要的病因，這與脾胃的受納、腐熟水谷功能密切相關(guān)[10]。小兒肝常有余，脾常不足，若肝失疏泄，乘犯中土，橫逆犯胃，脾失健運而致食欲下降，挑食厭食。調(diào)中湯是筆者在長期對兒科疾病的研究、治療中總結(jié)出的經(jīng)驗方，可有效改善FD患兒的胃電圖[11]，在臨床上治療兒童功能性消化不良及小兒厭食癥取得了良好的療效。方中柴胡疏肝理氣，白術(shù)益氣健脾，白芍柔肝緩急，陳皮、半夏健脾和胃燥濕，延胡索活血化瘀止痛，莪術(shù)行氣消積，甘草調(diào)和諸藥，合而用之，共奏疏肝理氣、健脾和胃之功。本實驗結(jié)果顯示，調(diào)中湯能增加功能性消化不良幼年大鼠日均體重，并明顯升高模型組血清GAS含量，降低血清SS含量。調(diào)中湯能調(diào)節(jié)血清GAS及SS含量，使其趨向于正常范圍，這可能是調(diào)中湯治療FD的作用機(jī)制之一，其他分子生物學(xué)機(jī)制有待進(jìn)一步深入研究。

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浙江省中醫(yī)藥科技計劃項目調(diào)中湯對脾虛肝旺型功能性消化不良幼鼠胃排空及胃動素、干細(xì)胞因子的影響研究，編號：2014ZA087

2017-08-07