趙子龍 張冠軍

COX-2及NF-κB p65在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及臨床意義

趙子龍 張冠軍

目的探討COX-2及NF-κB p65在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法選擇正常子宮內(nèi)膜組織者60例(對(duì)照組)，子宮內(nèi)膜癌60例(觀察組)，兩組都進(jìn)行COX-2及NF-κB p65的表達(dá)檢測(cè)，同時(shí)進(jìn)行了相關(guān)性分析。結(jié)果對(duì)照組COX-2陽(yáng)性表達(dá)率為3.3%，觀察組為55.0%。對(duì)照組NF-κB p65陽(yáng)性表達(dá)率為23.3%，觀察組為63.3%，對(duì)比差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在觀察組中，隨著子宮內(nèi)膜癌的病理分期增加、分化程度的減少、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生，COX-2、NF-κB p65的陽(yáng)性表達(dá)率都呈現(xiàn)增高的趨勢(shì)，對(duì)比差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Spearman 等級(jí)相關(guān)分析結(jié)果顯示COX-2與NF- κB p65的表達(dá)呈正相關(guān)(γ=0.307，P<0.05)。結(jié)論COX-2、NF-κB p65在子宮內(nèi)膜癌中呈現(xiàn)高表達(dá)狀況，且分化程度低、分期晚、發(fā)生轉(zhuǎn)移者高于分化程度高、分期早、未發(fā)生轉(zhuǎn)移者，兩者在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中起共同促進(jìn)作用。

子宮內(nèi)膜癌；COX-2；NF-κB p65；相關(guān)性

子宮內(nèi)膜癌是1種發(fā)生于子宮內(nèi)膜的上皮惡性腫瘤，占女性生殖器惡性腫瘤的20%～30%[1]。目前子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚[2-5]。研究顯示多個(gè)癌基因的異常激活和編碼蛋白的過(guò)度表達(dá)以及抑癌基因的缺失、突變失活導(dǎo)致細(xì)胞增殖失控而惡性轉(zhuǎn)化，可能是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的分子生物學(xué)基礎(chǔ)[6]。環(huán)氧化酶-2(COX-2)又稱前列腺素過(guò)氧化物合成酶，其mRNA表達(dá)和蛋白水平在人體內(nèi)保持相對(duì)穩(wěn)定，可促進(jìn)前列腺素合成，維持人體正常功能，但是其在多數(shù)組織的炎癥過(guò)程和腫瘤中誘導(dǎo)性地表達(dá)升高[7-8]。NF-κB p65為1種核轉(zhuǎn)錄因子，幾乎存在于所有真核細(xì)胞中，可作用于多種靶基因，與多種腫瘤疾病的過(guò)度上調(diào)與癌癥的發(fā)生、發(fā)展、分期及預(yù)后均有一定的相關(guān)性[9-10]。本文具體探討了COX-2及NF-κB p65在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及臨床意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2006年8月到2016年7月我院婦產(chǎn)科收治的子宮內(nèi)膜癌樣本120例，其中正常子宮內(nèi)膜組織60例(對(duì)照組)，子宮內(nèi)膜癌組織60例(觀察組)，納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者的臨床病例資料完整；年齡在20～60歲；未接受過(guò)手術(shù)、化療或者激素治療；獲得標(biāo)本得到入選者的知情同意。對(duì)照組年齡28～57歲，平均年齡(48.33±3.11)歲。觀察組年齡29～58歲，平均(49.11±2.87)歲；病理分期：Ⅰ期34例，Ⅱ期20例，Ⅲ期6例；肌層浸潤(rùn)≤1/2者69例，肌層浸潤(rùn)>1/2者51例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：無(wú)轉(zhuǎn)移45例，有轉(zhuǎn)移15例。兩組的年齡對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 資料調(diào)查

調(diào)查了受試者的性別、病案號(hào)、年齡、聯(lián)系電話、病理分期、肌層浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等情況。同時(shí)詳細(xì)記錄了兩組的組織標(biāo)本中免疫組織化學(xué)染色COX-2、NF-κB p65的表達(dá)情況。

1.3 標(biāo)本檢測(cè)

所有的石蠟樣本組織均經(jīng)10%福爾馬林液固定，常規(guī)脫水、浸蠟、包埋，連續(xù)以4 μm的厚度切片。采用3%的H2O2室溫孵育10 min以去除內(nèi)源性的過(guò)氧化物酶，微波爐中高溫抗原修復(fù)10 min。二甲苯脫蠟后，進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，滴加不同的單克隆抗體(稀釋度1∶1000)，陰性對(duì)照以PBS代替一抗，4 ℃過(guò)夜后用PBS沖洗3 次，每次5 min，后續(xù)步驟按照組織化學(xué)染色說(shuō)明書完成，封片鏡檢。

本文選擇的兔抗人COX-2單克隆抗體購(gòu)自購(gòu)自DAKO公司，鼠抗人NF-κB p65免疫組化多克隆抗體購(gòu)自福建邁新技術(shù)開發(fā)公司。其他常用化學(xué)試劑均購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)，純度均為分析純。

1.4 結(jié)果判定

COX-2、NF-κB p65均以細(xì)胞核內(nèi)存在棕黃色顆粒為陽(yáng)性，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)數(shù)進(jìn)行判定，≤5%陰性(-)，6%～25%弱陽(yáng)性(+)，26%～50%中度陽(yáng)性(++)，>50%強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 20.00 for windows軟件，計(jì)數(shù)資料用χ2法或Fisher精確概率法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，計(jì)量數(shù)據(jù)對(duì)比采用t檢驗(yàn)分析，相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，以P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 COX-2、NF-κB p65在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)

對(duì)照組COX-2陽(yáng)性表達(dá)率為3.3%，觀察組為55.0%。對(duì)照組中NF-κB p65陽(yáng)性表達(dá)率為23.3%，觀察組為63.3%，比較差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 COX-2、NF-κB p65在不同子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)情況(例，%)

2.2 COX-2、NF-κB p65表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的臨床病理特征關(guān)系

在觀察組中，隨著子宮內(nèi)膜癌的病理分期增加、分化程度的降低、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生，COX-2、NF-κB p65的陽(yáng)性表達(dá)率都呈現(xiàn)增高的趨勢(shì)，比較差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 COX-2、NF-κB p65表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系(例，%)

2.3 子宮內(nèi)膜癌組織中COX-2和NF-κB p65表達(dá)的相關(guān)性

在觀察組中，Spearman 等級(jí)相關(guān)分析結(jié)果顯示:COX-2與GLUT-1的表達(dá)呈正相關(guān)(γ=0.307，P<0.05)。

3 討論

癌癥的發(fā)生、發(fā)展與多個(gè)癌基因、抑癌基因突變相關(guān)，是多個(gè)因素、多個(gè)步驟協(xié)同長(zhǎng)期作用的結(jié)果，其作用機(jī)制十分復(fù)雜[11-12]。

在子宮內(nèi)膜組織中，對(duì)于從原癌基因激活、抑癌基因突變、細(xì)胞異常增殖中，目前多數(shù)研究?jī)H局限于單一指標(biāo)，然而從生物學(xué)角度看，各指標(biāo)之間可能存在著極其復(fù)雜的關(guān)系[13-14]。COX-2可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡。COX-2不僅表達(dá)于腫瘤組織中，而且在其新生血管和轉(zhuǎn)移灶的血管上也有表達(dá)。COX-2可增強(qiáng)腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移能力。還通過(guò)上調(diào)影響細(xì)胞侵襲力的其它一些因素，抑制機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng)[15]。COX-2還可以刺激腫瘤細(xì)胞釋放前列腺素，促使內(nèi)皮細(xì)胞遷移、生長(zhǎng)，誘導(dǎo)血管生成。NF-κB 是1種多向性、多功能的核轉(zhuǎn)錄因子，p65的生物活性比較高，為NF-κB的典型代表[16]。生理狀況下的靜息細(xì)胞中，NF-κB p65蛋白主要通過(guò)與其內(nèi)源性抑制蛋白κB家族以非共價(jià)方式在胞質(zhì)中結(jié)合。NF-κB p65可上調(diào)細(xì)胞周期素D1表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞周期G1/G0期向S期轉(zhuǎn)化引發(fā)細(xì)胞無(wú)限增殖。有學(xué)者通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，提高NF-κB p65的活性能使子宮內(nèi)膜細(xì)胞凋亡增加，特別是NNF-κB p65的過(guò)度活化，使得NF-κB p65對(duì)細(xì)胞正常的生長(zhǎng)調(diào)控功能，特別是細(xì)胞程序性增殖，從而在子宮內(nèi)膜惡性轉(zhuǎn)化中起重要作用[17]。本研究顯示COX-2在對(duì)照組的陽(yáng)性表達(dá)率為3.3%，在觀察組的陽(yáng)性表達(dá)率為55.0%。NF-κB p65在對(duì)照組的陽(yáng)性表達(dá)率為23.3%，在觀察組的陽(yáng)性表達(dá)率為63.3%，對(duì)比差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在觀察組中，隨著子宮內(nèi)膜癌的病理分期增加、分化程度的減少、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生，COX-2、NF-κB p65的陽(yáng)性表達(dá)率都呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)，對(duì)比差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示子宮內(nèi)膜癌患者都呈現(xiàn)COX-2和NF-κB p65高表達(dá)狀況。

本研究顯示在觀察組中，Spearman 等級(jí)相關(guān)分析結(jié)果顯示COX-2與NF- κB p65的表達(dá)呈正相關(guān)(γ=0.307，P<0.05)。COX-2可參與MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)，當(dāng)其形成受體二聚體后，細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶區(qū)域被激活，使其受體發(fā)生自身磷酸化，激活三級(jí)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，使核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子發(fā)生磷酸化，促進(jìn)細(xì)胞的有絲分裂與NF-κB p65的高表達(dá)[18-19]。而隨著遺傳學(xué)損傷的不斷積累，更多的抑癌基因失活而大量的癌基因被激活后，在外界環(huán)境的雙重作用下，導(dǎo)致子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生后，兩者的關(guān)系也會(huì)越來(lái)越密切，共同加快了腫瘤的發(fā)展，增加了腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移的能力[20-21]。

總之，COX-2、NF-κB p65在子宮內(nèi)膜癌中呈現(xiàn)高表達(dá)狀況，且分化程度低、分期晚、發(fā)生轉(zhuǎn)移者高于分化程度高、分期早、未發(fā)生轉(zhuǎn)移者，兩者在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中起共同促進(jìn)作用。

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ExpressionandClinicalSignificanceofCOX-2andNF-κBp65inEndometrialCancer

ZHAOZilong,ZHANGGuanjun.

AnkangCentralHospital,Ankang,725000

ObjectiveTo investigate the expression and clinical significance of COX-2 and NF- κB p65 in endometrial cancer.Methods120 endometrial tissue samples were selected,including 60 cases of normal endometrial tissue (the control group) and 60 cases of endometrial cancer (the observation group),the expression of COX-2 and NF- κB p65 were detected and analyzed.ResultsThe positive expression rate of COX-2 in the control group was 3.3%,and in the observation group was 55%.The positive expression rate of NF- κB p65 in the control group was 23.3%,in the observation group was 63.3%,and the difference between the 2 groups were statistically significant (p65) (P<0.05).In the observation group, the pathological staging of endometrial cancer were increased,differentiation were decreased,lymph node were metastasis,the positive expression of COX-2 and NF- κB p65 were increased,the difference were statistically significant (P<0.05).Spearman rank correlation analysis showed that COX-2 was positively correlated with the expression of NF- κB p65(γ=0.307,P<0.05).ConclusionCOX-2 and NF- κB p65 in endometrial cancer showed high expression,and patients with low degree of differentiation,late stage,metastasis rate are higher than those with high degree of differentiation,early stage,without metastasis,both promote the development of endometrial cancer.

Endometrial cancer;COX-2;NF- κB p65;Correlation

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1777～1779)

725000 陜西省安康市中心醫(yī)院(趙子龍)；710061 西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院(張冠軍)

張冠軍

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.11.011

R737.33

A

1001-5930(2017)11-1777-03

2017-05-24

2017-08-02)

(編輯：吳小紅)