丁德芹，李澄,2,劉璐,2，胡瑤，陳道楨

(1.東南大學(xué) 醫(yī)學(xué)院，江蘇 南京 210009；2.東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院 放射科與核醫(yī)學(xué)科，江蘇 南京 210009； 3.南京醫(yī)科大學(xué)，江蘇 南京 210029；4.南京醫(yī)科大學(xué)附屬無錫婦幼保健院 婦科，江蘇 無錫 214002)

丁德芹1，李澄1,2,劉璐1,2，胡瑤3，陳道楨4

(1.東南大學(xué) 醫(yī)學(xué)院，江蘇 南京 210009；2.東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院 放射科與核醫(yī)學(xué)科，江蘇 南京 210009； 3.南京醫(yī)科大學(xué)，江蘇 南京 210029；4.南京醫(yī)科大學(xué)附屬無錫婦幼保健院 婦科，江蘇 無錫 214002)

1 材料與方法

1.2 實驗細胞及動物

人源Hela細胞株及人正常宮頸上皮細胞HCerEpic由中國科學(xué)院細胞庫購得；Balb/C裸鼠若干只，雌性，4～6周齡，體重18～22 g，購于南京大學(xué)南京生物研究院實驗動物中心，根據(jù)無特殊病原體SPF標準飼養(yǎng)于東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院動物實驗中心。

1.3 細胞培養(yǎng)及傳代

分別取Hela細胞和HCerEpic細胞，加入含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中，置于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中，當細胞生長至80%以上時加入適量胰蛋白酶消化細胞，加入適量培養(yǎng)基制成細胞懸液，離心，PBS洗滌，按1∶3比例加到含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，重復(fù)傳代多次，以備實驗所需。

1.4 Western Blot檢測

1.5 免疫熒光結(jié)合實驗

1.8 荷瘤裸鼠模型建立及SPECT顯像

取對數(shù)生長期的HELA細胞，制備成細胞懸液并計數(shù)，用無菌1 ml注射器抽取100 μl細胞懸液接種到裸鼠右腋皮下，隔天觀察裸鼠生命體征，皮下接種2周左右，瘤體直徑達6～12 mm時備用。

1.9 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

人正常宮頸上皮細胞 宮頸癌細胞

2.2 免疫熒光結(jié)合實驗

表1 標記產(chǎn)物在室溫與血清混合后放化純度(n=3) %

圖2免疫熒光細胞結(jié)合實驗驗×100

全身放射性顯影較淡，而另一組經(jīng)瘤內(nèi)間質(zhì)注射游離99TcmO4-后30 min，可見腫瘤所在部位放射性攝取迅速消退，而胃、肝臟、雙腎及膀胱所在部位仍主要見放射性積聚，且隨著時間推移，放射性攝取逐漸增加，結(jié)果見圖3。

圖3皮下移植瘤裸鼠模型不同時間點SPECT顯像

3 討 論

(1.SchoolofMedicine，SoutheastUniversity，Nanjing210009，China；2.DepartmentofRadiologyandNuclearMedicine，ZhongdaHospital，SoutheastUniversity，Nanjing210009，China；3.NanjingMedicalUniversity，Nanjing210029，China; 4.DepartmentofGynaecology,WuxiMaternalandChildHealthCareHospital，NanjingMedicalUniversity，Wuxi214002，China)

國家自然科學(xué)基金資助項目(81372480)

R445.5

A

顏煥敏)