李月明

摘 要：本文采用高校液相測(cè)定了洛伐他汀膠囊中洛伐他汀的含量，固定相為：安捷倫Cl8（4.6mm×250mm，5um），甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（70：30）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為238nm，流速1.0mL·min-1，柱溫：30℃。洛伐他汀在30～110μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。洛伐他汀的平均回收率為99.3%，RSD為0.81%（n=6）；此方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于洛伐他汀膠囊中洛伐他汀的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：洛伐他汀膠囊；洛伐他汀；含量

洛伐他汀膠囊在體內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)性地抑制膽固醇合成過程中的限速酶羥甲戊二酰輔酶A還原酶，使膽固醇的合成減少，也使低密度脂蛋白受體合成增加，結(jié)果使血膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平降低，適用于高脂血癥，高膽固醇血癥等癥狀。洛伐他汀膠囊還可降低血清甘油三酯水平和增高血高密度脂蛋白水平。洛伐他汀膠囊最常見的不良反應(yīng)為胃腸道不適、腹瀉、脹氣等。本文采用高校液相測(cè)定了洛伐他汀膠囊中洛伐他汀的含量。

1 儀器與試藥

Dura 12/24超純水系統(tǒng)（上海和泰儀器有限公司）；CLEAN PH200便攜式酸堿度測(cè)試儀（西安優(yōu)普儀器設(shè)備有限公司）；SPECORD250 PLUS紫外可見分光光度計(jì)（德國(guó)耶拿分析儀器股份公司）；實(shí)驗(yàn)室玻璃器皿自動(dòng)洗瓶機(jī)（西安優(yōu)普儀器設(shè)備有限公司）；PTX-FA110萬分之一天平（上海鑫倉(cāng)電子科技有限公司）；KQ250DE超聲波清洗器超聲波檢測(cè)儀器（煙臺(tái)鑫康商貿(mào)有限公司）；LDW-S實(shí)驗(yàn)室污水處理機(jī)（上海路島分析儀器有限公司）；LC3000高效液相色譜儀（山東滕州市滕海分析儀器有限公司）。洛伐他汀對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。乙腈（山東浩中化工科技有限公司）、三乙胺（山東浩中化工科技有限公司）、磷酸（武漢市偉琪博星生物科技有限公司）、甲醇（山東浩中化工科技有限公司）、甲酸銨（山東浩中化工科技有限公司）、甲酸（山東浩中化工科技有限公司）、冰醋酸（山東浩中化工科技有限公司）、磷酸氫二鈉（武漢市偉琪博星生物科技有限公司）、三乙胺（山東浩中化工科技有限公司）、氫氧化鈉（山東浩中化工科技有限公司）。

2 含量測(cè)定

2.1 色譜條件。依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果 ，確定色譜條件如下[1-5]。色譜柱為安捷倫Cl8規(guī)格為（4.6mm×250mm，5um）；甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（70：30）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為238nm。理論板數(shù)按洛伐他汀峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

2.2 供試品溶液的制備。取洛伐他汀膠囊內(nèi)容物，精密稱取，加甲醇超聲處理5分鐘，放冷，濾過，濾液置25ml量瓶中，用流動(dòng)相分次洗滌容器和殘?jiān)?，洗液濾人同一量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3 對(duì)照品溶液的制備。精密稱取洛伐他汀對(duì)照品約5mg，用甲醇溶解并稀釋成每1ml中含50？滋g的溶液，作為對(duì)照溶液。

2.4 陰性溶液的制備。依照處方取除洛伐他汀的原輔料，按樣品制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，照供試品溶液的制備方法制成陰性液，依上述方法測(cè)定，結(jié)果在洛伐他汀出峰處陰性液無色譜峰，結(jié)果陰性試驗(yàn)沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 準(zhǔn)曲線的制備。制備濃度為30、40、50、60、70、80、90、100、110μg·mL-1的對(duì)照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A(chǔ)（μg）為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。試驗(yàn)表明，洛伐他汀對(duì)照品在30～110μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.6 精密度試驗(yàn)。依照2.3項(xiàng)下制備對(duì)照品溶液，精密吸取洛伐他汀對(duì)照品溶液10μL重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積積分值，對(duì)照品峰面積積分值的RSD為0.79%。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)精密度良好。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)。稱取同一批的洛伐他汀膠囊樣品6份，按測(cè)定方法項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.73%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)。依照2.2項(xiàng)下供試品制備方法制備供試品溶液，分別在0，2，4小時(shí)精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進(jìn)樣測(cè)定，供試品洛伐他汀峰面積積分值的RSD為0.81%。結(jié)果表明洛伐他汀至少在4小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 回收率試驗(yàn)。采用加樣回收試驗(yàn)，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的洛伐他汀對(duì)照品，按供試品制備所述方法制備供試品溶液，測(cè)定含量（同時(shí)測(cè)定樣品含量），計(jì)算回收率。6次測(cè)定的平均回收率為99.3%，RSD為0.81%。

2.10 樣品含量測(cè)定。依照上述含量測(cè)定方法，測(cè)定洛伐他汀膠囊三批樣品中洛伐他汀的含量，含量為標(biāo)示量的99.1%、99.3%、100.5%。

3 討論

分別考察甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（70：30），甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（60：40），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（10：20：70），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)節(jié)至pH3.0）（10：10：80），0.1%磷酸液（用氫氧化鈉調(diào)pH4.0）-乙腈（40：60），甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（55：45），甲醇-0.02mol/L磷酸二氫銨（0.1%三乙胺，磷酸調(diào)pH至7.0）（75∶25），甲醇-0.02mol/L磷酸二氫銨（0.1%三乙胺，磷酸調(diào)pH至6.0）（70∶30）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（70：30）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（70：30）為流動(dòng)相。此方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于洛伐他汀膠囊中洛伐他汀的含量測(cè)定。洛伐他汀膠囊中洛伐他汀的含量應(yīng)為標(biāo)示量的95-105%。

參考文獻(xiàn)

[1]孫瑋，于明明，王遠(yuǎn)紅，呂志華.大鼠血漿中洛伐他汀的HPLC測(cè)定及藥動(dòng)學(xué)研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008（12）.

[2]韓媛媛，趙燕燕，李月秋，杜光玲，白潔.洛伐他汀膠囊質(zhì)量控制的高效液相色譜方法[J].河北大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2010（06）.

[3]申屠建中，章霞，陳志根，吳麗花，史美甫.固相萃取反相高效液相色譜法檢測(cè)人血漿中辛伐他汀濃度[J].藥物分析雜志，2002（01）.

[4]王麗娟，陳四喜，楊雁冰，孫福金，王俊峰，李謎，燕學(xué)波.HPLC法測(cè)定血脂康膠囊中Monacolin類成分的含量[J].中國(guó)療養(yǎng)醫(yī)學(xué)，2015（05）.

[5]李雪梅，薛嵐，符鵬，段震文，郭樹仁.HPLC法測(cè)定血脂康膠囊中洛伐他汀和洛伐他汀酸的含量[J].中國(guó)藥師，2012（02）.endprint