胡捷，劉庚勛，江小工，胡嘉瑋，鐘霞，董勇云，朱燕

[湖南師范大學(xué)第二附屬醫(yī)院（解放軍163醫(yī)院）1.肛腸外科，2.病理科，3.輸血科，湖南 長(zhǎng)沙410003]

冷沉淀外敷對(duì)家兔感染創(chuàng)面修復(fù)的影響*

胡捷1，劉庚勛2，江小工3，胡嘉瑋1，鐘霞1，董勇云1，朱燕1

[湖南師范大學(xué)第二附屬醫(yī)院（解放軍163醫(yī)院）1.肛腸外科，2.病理科，3.輸血科，湖南 長(zhǎng)沙410003]

目的觀察血漿冷沉淀治療家兔感染性創(chuàng)面修復(fù)的效果，闡述血漿冷沉淀促進(jìn)家兔感染性創(chuàng)面修復(fù)的作用機(jī)制。方法將健康的新西蘭成年家兔12只，按照改良付小兵全層皮膚缺損法復(fù)制創(chuàng)傷感染性動(dòng)物體表潰瘍模型，分別予冷沉淀、康復(fù)新液、濕潤(rùn)燒傷膏和凡士林紗布換藥，測(cè)定治療后第3、7、12、17天創(chuàng)面微血管密度（MVD），創(chuàng)面愈合率和新生上皮覆蓋率，創(chuàng)面轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）表達(dá)情況。結(jié)果各組治療第3天MVD均呈上升趨勢(shì)，第3、7天冷沉淀組MVD與其他3組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），第12天后新生血管逐漸減少；冷沉淀組創(chuàng)面愈合率、新生上皮覆蓋率與康復(fù)新液組、凡士林組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），冷沉淀組創(chuàng)面完全愈合時(shí)間與其他3組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（H=11.169，P=0.011），冷沉淀組縮短；冷沉淀組治療早期TGF-β1表達(dá)與其他3組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），并在整個(gè)修復(fù)過(guò)程中維持高表達(dá)。結(jié)論冷沉淀可能通過(guò)上調(diào)創(chuàng)面TGF-β1表達(dá)、加速創(chuàng)面MVD，達(dá)到提高創(chuàng)面新生上皮覆蓋率，促進(jìn)創(chuàng)面快速愈合的目的。

冷沉淀；創(chuàng)面愈合；微血管密度；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1

肛瘺是肛門直腸部位的常見疾病，多為肛周膿腫發(fā)展的延續(xù)，手術(shù)是其主要的治療手段。但因?yàn)槠鋭?chuàng)面受糞便污染，為避免感染，一般采用敞開創(chuàng)面二期愈合的方式，由于組織自行修復(fù)及愈合的時(shí)間較長(zhǎng)，加之術(shù)后創(chuàng)面較大，愈合緩慢，故在肛門疾病手術(shù)后的治療中，創(chuàng)面局部用藥成為促進(jìn)創(chuàng)傷組織愈合的主要手段。在前期臨床研究中，對(duì)肛瘺患者術(shù)后創(chuàng)面采用血漿冷沉淀紗條換藥，并設(shè)對(duì)照組比較，效果滿意[1]。本研究旨在通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，對(duì)冷沉淀局部使用促進(jìn)創(chuàng)面愈合的機(jī)制進(jìn)行初步研究。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與受試物

SPF級(jí)成年新西蘭家兔12只，雌雄各半，由長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（湘）2014-0010，動(dòng)物飼料合格證SCXK（湘）2014-0011。人體血漿冷沉淀，由解放軍長(zhǎng)沙血站按GB18469-2012標(biāo)準(zhǔn)制作[2]，選取體檢指標(biāo)合格者全血400 ml，離心分離血漿，置于-20℃冰箱冷凍保存。制備時(shí)放入20～25℃水浴中融化，待尚有凍感時(shí)，在4℃以下，離心10 min后，移去上清血漿，最后剩余20～30 ml血漿與沉淀一起按3 ml/段預(yù)先裝置于封閉輸血管內(nèi)，貯存于4～8℃冰箱內(nèi)，使用時(shí)臨時(shí)開封。

1.2 儀器設(shè)備與檢驗(yàn)試劑

ZT-14SZ組織自動(dòng)脫水機(jī)（湖北孝感醫(yī)療器械廠），TB-718組織包埋機(jī)（湖北泰維醫(yī)療器械公司），F(xiàn)INSSE325切片機(jī)（英國(guó)Thermo公司），JK-6組織烤片機(jī)（上海松江金屬制品合作工廠），Olympus CX31雙目顯微鏡（日本Olympus公司），MIIS病理圖片分析系統(tǒng)（湖北俊杰AGFA）。兔抗兔血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物 CD34（immunohistochemistry anti-CD34，CD34）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（transforming growth factor-beta 1，TGF-β1）、多聚體兔抗IgG-HRP，采購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 復(fù)制模型 動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后，剪去家兔背部毛發(fā)，按照改良付小兵全層皮膚缺損法[3-4]復(fù)制創(chuàng)傷感染性動(dòng)物體表潰瘍模型。稱重，將其俯臥于手術(shù)固定板上，在其背部正中兩側(cè)共選擇4塊直徑各約2 cm的完整皮膚，生理鹽水洗凈擦干，碘伏局部消毒后，在脫毛處用0.5%利多卡因2 ml行局部麻醉，用組織剪剪一圓形傷口，深達(dá)肌筋膜，破壞部分肌肉表面筋膜，在創(chuàng)面上用4號(hào)絲線固定1個(gè)與創(chuàng)面大小相符的塑料環(huán)，止血后再在傷口表面覆蓋與創(chuàng)面大小相仿的棉球，用1 ml注射器在創(chuàng)面與棉球之間注入濃度為1.0麥?zhǔn)蠁挝坏拇竽c桿菌菌株混懸液（由本院細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室提供），其創(chuàng)面部位予以油紗敷料覆蓋，絲線縫合3針進(jìn)行固定，24 h后去除覆蓋物，動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，給以充足的水和食物，3 d后，創(chuàng)面感染模型成功，待進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。復(fù)制模型成功后可見：創(chuàng)口表面附有黃白色膿性分泌物，組織輕度紅腫，周圍皮溫略升高，造成類似于肛瘺術(shù)后的感染性創(chuàng)面。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)分組 采用自體對(duì)照法將家兔背部4個(gè)創(chuàng)面分為4組，分別為冷沉淀組、康復(fù)新液組、濕潤(rùn)燒傷膏組和凡士林組。

1.3.3 給藥方法 常規(guī)予以0.9%氯化鈉溶液清洗創(chuàng)面，用干棉球拭干，然后冷沉淀組予冷沉淀3 ml滴于無(wú)菌紗布上（2層），均勻覆蓋于創(chuàng)面；康復(fù)新液組予康復(fù)新原液3 ml滴于無(wú)菌紗布上（2層），均勻覆蓋于創(chuàng)面；濕潤(rùn)燒傷膏組予濕潤(rùn)燒傷膏2 g涂于紗布（2層），覆蓋于創(chuàng)面；凡士林組覆蓋2層凡士林無(wú)菌紗布，各組換藥均1次/d，每只家兔換藥后，用無(wú)菌自動(dòng)黏貼敷料覆蓋創(chuàng)面，再用繃帶纏繞固定，防止敷料脫落、動(dòng)物擠蹭、舔食創(chuàng)面。

1.3.4 創(chuàng)面愈合觀察指標(biāo) 分別于治療第3、7、12、17天觀察創(chuàng)面修復(fù)情況：①創(chuàng)面愈合率，治療第7、12、17天用透明方格膜覆蓋描記創(chuàng)面面積，掃描后使用photoshop軟件計(jì)算創(chuàng)面愈合率，計(jì)算公式：創(chuàng)面愈合率=（原始創(chuàng)面面積-未愈合創(chuàng)面面積）/原始創(chuàng)面面積×100%[5]；②治療第7、12、17天觀察新生上皮出現(xiàn)時(shí)間及覆蓋率，創(chuàng)面愈合時(shí)間即實(shí)驗(yàn)觀察期間任一時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面完全上皮化所需要的時(shí)間，上皮化依靠肉眼觀察，以上皮完全覆蓋創(chuàng)面作為愈合標(biāo)準(zhǔn)，痊愈時(shí)間以天為計(jì)算單位；③組織學(xué)檢查，剪取創(chuàng)緣與正常組織交界處1 mm×1 mm組織，10%中性甲醛溶液固定標(biāo)本后送病理科行石蠟包埋，切片分別行HE染色、免疫組織化學(xué)CD34行血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記、TGF-β1抗體行免疫組織化學(xué)標(biāo)記。光鏡下觀察組織炎癥反應(yīng)、肉芽組織生長(zhǎng)及創(chuàng)面微血管生長(zhǎng)和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

1.3.5 CD34免疫組織化學(xué)染色與創(chuàng)面微血管密度（MVD）計(jì)算 每張切片光鏡下觀察，胞質(zhì)呈棕紅色者為CD34標(biāo)記陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞，以CD34陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞或細(xì)胞簇作為1個(gè)血管計(jì)數(shù)單位，于治療第3、7、12、17天在低倍鏡（10×10）下選擇微血管密度（microvessel density，MVD）最高的3個(gè)區(qū)域，于高倍鏡（20×10）下計(jì)數(shù)5個(gè)視野的MVD，取其平均數(shù)為該標(biāo)本的MVD[6]。

1.3.6 創(chuàng)面TGF-β1免疫組織化學(xué)蛋白表達(dá)分析 實(shí)驗(yàn)步驟按試劑盒說(shuō)明書操作，石蠟切片經(jīng)脫臘水化后，采用SP法檢測(cè)創(chuàng)面組織中TGF-β1的表達(dá)情況，用磷酸鹽緩沖液（PBS）做陰性對(duì)照，以DAB顯色。結(jié)果判定：TGF-β1表達(dá)在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜，胞質(zhì)呈棕紅色者為TGF表達(dá)陽(yáng)性成纖維細(xì)胞。分別取治療第3、7、12、17天的組織病理切片，于每張切片上隨機(jī)選取3個(gè)視野，在低倍顯微鏡下（10×10）用MIIS病理圖片分析系統(tǒng)測(cè)定TGF-β1的陽(yáng)性率。于高倍鏡（20×10）下，用病理圖像分析系統(tǒng)計(jì)算每視野中平均光密度，取其平均數(shù)為該標(biāo)本的TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)的光密度（mean optical density，MOD）值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，經(jīng)對(duì)各組數(shù)據(jù)檢驗(yàn)，均不滿足正態(tài)分布及方差齊性條件，故偏態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)和上下四分位數(shù)表示，多組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)Kruskal-WallisH檢驗(yàn)，組間兩兩比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同時(shí)間段4組創(chuàng)面平均愈合率及創(chuàng)面愈合所需時(shí)間比較

治療第7天各組創(chuàng)面均已開始修復(fù)，治療12 d后，冷沉淀組創(chuàng)面愈合率與康復(fù)新組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（z=-2.887，P=0.004），冷沉淀組高于康復(fù)新組；冷沉淀組和凡士林組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（z=-3.175，P=0.001），冷沉淀組高于凡士林組；至17 d，冷沉淀組創(chuàng)面基本愈合，濕潤(rùn)燒傷膏組創(chuàng)面愈合率為97.47%。冷沉淀組創(chuàng)面愈合所需時(shí)間中位數(shù)為18 d，冷沉淀組和濕潤(rùn)燒傷膏組創(chuàng)面愈合率較高，兩組愈合時(shí)間比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；創(chuàng)面愈合時(shí)間4組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（H=11.169，P=0.011，秩均值：冷沉淀組14.96，濕潤(rùn)燒傷膏組23.38，康復(fù)新液組26.13，凡士林組33.54），冷沉淀組愈合所需時(shí)間較康復(fù)新液組和凡士林組短，秩均值顯示，冷沉淀組愈合時(shí)間最短，其次為濕潤(rùn)燒傷膏組，第3為康復(fù)新液組，凡士林組愈合最慢。見表1。

2.2 創(chuàng)面組織修復(fù)情況比較

表1 各時(shí)間段4組創(chuàng)面愈合率及愈合時(shí)間比較 （n =12，M，P25，P75）

HE染色光鏡檢查，4組創(chuàng)面治療第3天均開始出現(xiàn)新生肉芽組織，新生血管增生，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)，第7天冷沉淀組和濕潤(rùn)燒傷膏組新生肉芽紅活，康復(fù)新液組和凡士林組新生肉芽偏少，各組均出現(xiàn)新生上皮，冷沉淀組與其他3組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=20.344，P=0.000）；第12天冷沉淀組肉芽平整，成纖維細(xì)胞排列整齊，濕潤(rùn)燒傷膏組肉芽增生活躍，部分出現(xiàn)水腫及過(guò)度增生現(xiàn)象，康復(fù)新組肉芽平整，凡士林組肉芽增生緩慢平整，冷沉淀組與其他3組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=15.936，P=0.001）；第17天冷沉淀組與其他3組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=13.351，P=0.004）。第17天創(chuàng)面新生上皮覆蓋率冷沉淀組與康復(fù)新液組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（z=-2.146，P=0.032），冷沉淀組與凡士林組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（z=-3.067，P=0.002），創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程中，冷沉淀組創(chuàng)面上皮化早，創(chuàng)面修復(fù)時(shí)間短，第18天基本完成修復(fù)。見表2。

2.3 CD34免疫組織化學(xué)染色MVD比較

CD34為血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物之一。免疫組織化學(xué)染色顯示，新生血管形成伴隨創(chuàng)面愈合全過(guò)程，治療后第3天開始，4組創(chuàng)面MVD均呈上升趨勢(shì)，冷沉淀組治療第3、7天CD34表達(dá)陽(yáng)性率與其余3組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=15.151和27.837，P=0.002和0.000），冷沉淀組較其他3組高（見圖1）。冷沉淀組在術(shù)后第7天為CD34表達(dá)高峰，其后新生血管逐漸減少。第3、7天冷沉淀組與康復(fù)新液組MVD比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（z=-2.490和-2.985，P=0.013和0.003；第3、7天冷沉淀組與凡士林組MVD比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（z=-3.334和-4.112，P=0.001和0.000）（見表 3）。

2.4 TGF-β1表達(dá)陽(yáng)性率

表2 術(shù)后不同時(shí)間段各組創(chuàng)面新生上皮覆蓋率比較 （n =12，%，M，P25，P75）

圖1 各治療組第3、7天血管內(nèi)皮細(xì)胞CD34表達(dá) （EnVision×200）

表3 各時(shí)間點(diǎn)各組MVD比較 （n =12，個(gè)/5HP，M，P25，P75）

治療后第3、7天，冷沉淀組TGF-β1陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率與康復(fù)新組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均z=-3.118，P=0.002），冷沉淀組與凡士林組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（z=-3.291和-3.464，P=0.001和0.002），治療第3、7天，TGF-β1陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率冷沉淀組高于康復(fù)新組和凡士林組，并維持高表達(dá)水平。說(shuō)明冷沉淀具有促進(jìn)TGF-β1在創(chuàng)面高表達(dá)的作用見表4和圖2。

表4 不同時(shí)間段各組創(chuàng)面TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)比較 （n =12，個(gè)/3HP，M，P25，P75）

圖2 各治療組第3、7天TGF-β1陽(yáng)性表達(dá) （EnVision×200）

3 討論

組織損傷修復(fù)過(guò)程是各類修復(fù)細(xì)胞的增殖、分化、遷移和消失的過(guò)程，是一系列不同細(xì)胞、結(jié)構(gòu)蛋白、和生長(zhǎng)因子等形成網(wǎng)絡(luò)式交互作用的結(jié)果[7]。肛瘺術(shù)后由于糞便的反復(fù)污染和排便對(duì)手術(shù)創(chuàng)面的刺激，常導(dǎo)致術(shù)后創(chuàng)面修復(fù)緩慢，嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量，因此肛瘺術(shù)后選用具有促進(jìn)組織修復(fù)、減輕創(chuàng)面疼痛的治療方法是肛腸科醫(yī)生必須考慮的問(wèn)題。

冷沉淀含豐富的纖維蛋白原、凝血因子Ⅷ、纖維黏連蛋白Fn等多種成分，具有良好的止血、封閉作用。其中Fn是一種黏性糖蛋白，具有促進(jìn)纖維蛋白交聯(lián)、細(xì)胞黏著、上皮細(xì)胞移行、修復(fù)和分化的作用，可促進(jìn)損傷組織的肉芽組織增生，為上皮修復(fù)創(chuàng)造環(huán)境條件；同時(shí)作為趨化因子，能提高炎癥區(qū)的白細(xì)胞活性，增強(qiáng)單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能，具有抑菌、抗感染作用，并參與機(jī)體的免疫調(diào)控[8]。冷沉淀臨床多用于凝血功能障礙患者的治療，一般為靜脈輸注止血，隨著研究的深入，近年來(lái)有研究者將冷沉淀局部使用以促進(jìn)組織修復(fù)，李君川[9]及馮秋斌[10]分別使用冷沉淀于肛門疾病術(shù)后換藥，發(fā)現(xiàn)其具有良好的止血效果，能減輕手術(shù)創(chuàng)面疼痛、促進(jìn)創(chuàng)面愈合、縮短愈合時(shí)間、減少創(chuàng)面感染。王登海[11]在研究冷沉淀制劑對(duì)皮膚創(chuàng)面修復(fù)的作用中，通過(guò)與對(duì)照組比較，認(rèn)為使用冷沉淀患者創(chuàng)面治愈率高，恢復(fù)快，瘢痕小。盧立春等[12]使用冷沉淀制劑治療深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面，并設(shè)對(duì)照組局部創(chuàng)面涂磺胺嘧啶銀乳膏，觀察兩組患者疼痛評(píng)分及感染和瘢痕發(fā)生率，結(jié)果顯示冷沉淀處理創(chuàng)面能減輕疼痛，快速控制炎癥，減輕或不留疤痕，且具有治愈時(shí)間短、恢復(fù)迅速等優(yōu)點(diǎn)。

受上述臨床研究啟發(fā)，筆者前期臨床研究[1]顯示冷沉淀能促進(jìn)手術(shù)創(chuàng)面肉芽組織增生，加快創(chuàng)面新生上皮覆蓋率，認(rèn)為血漿冷沉淀中所含有的生物活性成分，能促進(jìn)術(shù)后創(chuàng)面組織細(xì)胞生長(zhǎng)，具有很強(qiáng)的創(chuàng)面修復(fù)作用，是一種良好的用于肛門疾病術(shù)后創(chuàng)面換藥的生物制品。為進(jìn)一步研究冷沉淀促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用機(jī)制，選用SPF級(jí)新西蘭成年家兔進(jìn)行感染創(chuàng)面修復(fù)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示冷沉淀能早期促進(jìn)創(chuàng)面新生毛細(xì)血管生長(zhǎng)及密度分布，成纖維細(xì)胞增生活躍，排列整齊，從而使創(chuàng)面修復(fù)牢固，后期可加速上皮組織修復(fù)，縮短創(chuàng)面愈合時(shí)間，冷沉淀組與康復(fù)新液組、凡士林組比較，創(chuàng)面修復(fù)時(shí)間縮短，新生上皮覆蓋率較高。冷沉淀組與濕潤(rùn)燒傷膏組兩組在創(chuàng)面愈合率、新生上皮覆蓋率比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但冷沉淀組創(chuàng)面組織修復(fù)平整，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)排列規(guī)整，新生上皮覆蓋牢固，濕潤(rùn)燒傷膏組肉芽生長(zhǎng)較快，但欠牢固，肉芽水腫發(fā)生率較高，部分組織需多次予以修剪。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程存在極其復(fù)雜的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)調(diào)控機(jī)制，多種細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子參與了傷口愈合的調(diào)控，與創(chuàng)面愈合過(guò)程中肉芽組織形成，新生血管形成和再上皮化有密切聯(lián)系，其中TGF-β1屬于TGF-β生長(zhǎng)因子超家族，是與創(chuàng)傷愈合關(guān)系密切的生長(zhǎng)因子之一[13]，其具有使成纖維細(xì)胞和炎癥細(xì)胞向傷口聚集，誘導(dǎo)肉芽組織生長(zhǎng)和表皮形成作用，是一類對(duì)創(chuàng)面修復(fù)有重要調(diào)控作用的多功能的生長(zhǎng)因子，其作用機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)控TGF-β1/Smad3信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)的。實(shí)驗(yàn)研究顯示，冷沉淀局部應(yīng)用治療慢性感染性創(chuàng)面，能上調(diào)TGF-β1因子表達(dá)，使用冷沉淀治療后早期局部TGF-β1表達(dá)增強(qiáng)，高于康復(fù)新液組和凡士林組，且呈持續(xù)高表達(dá)狀態(tài)，創(chuàng)面組織修復(fù)亦較其他3組快，創(chuàng)面完全愈合時(shí)間較其他3組縮短，在一定程度上證實(shí)冷沉淀促進(jìn)慢性感染性創(chuàng)面修復(fù)與上調(diào)TGF-β1表達(dá)有關(guān)，這也為臨床推廣應(yīng)用冷沉淀提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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（張蕾 編輯）

Plama cryoprecipitate for repair of infected wounds in rabbits*

Jie Hu1, Geng-xun Liu2, Xiao-gong Jiang3, Jia-wei Hu1, Xia Zhong1, Yong-yun Dong1, Yan Zhu1
[1. Department of Anorectal Surgery, 2. Department of Pathology, 3. Department of Blood Transfusion,the Second Affiliated Hospital of Hunan Normal University (The 163rd Hospital of PLA),Changsha, Hunan 410003, China]

ObjectiveTo observe the effect of plasma cryoprecipitate on the repair of rabbit infective wounds, and then explore the mechanism of the cryoprecipitate in promoting the healing of rabbit infective wounds.MethodsTwelve healthy adult rabbits, according to the improved Fu Xiaobing full-thickness skin defect method, were made into wound infectious animal surface ulcer model, and then were treated respectively with the cryoprecipitate, Kangfuxin solution, MEBO or Vaseline gauze dressing. On the 3rd, 7th, 12th and 17th day of treatment, the microvascular density (MVD), healing rate, new epithelial coverage rate and TGF-β1 expression of the wound were tested.ResultsOn the 3rd day of treatment, MVD rose in all the groups; on the 3rd and 7 th day, MVD in the cryoprecipitate group was statistically different from that of the rest three groups (χ23d= 15.151, χ27d= 27.837;P= 0.002 and 0.000); after the 12th day, new blood vessels gradually reduced. The wound healing rate and the new epithelial coverage rate in the cryoprecipitate group were higher than those in the Kangfuxin solution group and the Vaseline group (P＜ 0.05). The wound healing time in the cryoprecipitate group was significantly shorter than that in the other groups (H= 11.169,P= 0.011). TGF-β1 expression in the cryoprecipitate group was higher than that in the other three groups (χ23d= 17.400, χ27d= 21.969;P= 0.001 and 0.000), and maintained high level during the entire repair process.ConclusionsThe cryoprecipitate can increase MVD of the wound, promote the new epithelial coverage, and accelerate wound healing through up-regulation of TGF-β1 expression in the wounds.

cryoprecipitate; wound repair; microvascular density; TGF-β1

R-332

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.28.004

1005-8982（2017）28-0016-06

2016-12-05

湖南省教育廳項(xiàng)目（No：14C0711）