查 琳 易 霞 周天予

(四川省內江市農業(yè)科學院,四川內江 641000)

靈芝多糖對接種PRRSV弱毒苗生長育肥內江豬抗氧化能力的影響

查 琳 易 霞 周天予

(四川省內江市農業(yè)科學院,四川內江 641000)

為了探討了飼糧中添加靈芝多糖對接種PRRSV弱毒苗生長育肥內江豬抗氧化能力的影響,本試驗選擇50頭生長育肥內江豬(分為2組,每組40頭)為研究對象。試驗按照2×2的因子設計:因子一設接種PRRSV弱毒苗和不接種兩種處理;因子二為靈芝多糖添加水平,設0,50mg/kg兩個水平。在試驗的第1d和29d接種弱毒苗。結果顯示:接種疫苗組的抗氧化能力下降。與對照組比,接種疫苗組在第7d和第14d這一時段中,血清中總抗氧化能力下降顯著(p＜0.05),在第1d血清丙二醇(MDA)含量上升。GLP組在第14d血清中的MDA顯著下降(p＜0.01)。飼糧中添加靈芝多糖能提高機體抗氧化能力。

靈芝多糖;PRRSV;抗氧化能力;內江豬

靈芝是一種珍貴的食藥兩用的真菌，研究表明靈芝之所以具有益壽延年，補中增智，益心補氣等滋補功效，源自于其含有多種活性物質，其中靈芝多糖是主要的活性成分。研究表明，靈芝多糖具有一定的抗衰老的生物學功能[1-2]。

PRRSV是一種感染豬的病毒。PRRS是由PRRSV引起的一種傳染病，它只感染豬，以厭食、懷孕母豬早產、死胎、木乃伊胎，仔豬呼吸困難為主要病理特征，感染本病后容易引起免疫抑制而繼發(fā)其他疾病。現在用的PRRSV疫苗主要是弱毒活疫苗、滅活疫苗。其中弱毒活疫苗的效果最好。PRRSV弱毒苗被廣泛使用，但其安全性和有效性存在不一致的結果，在某些條件下注射弱毒苗還存在毒力返強的情況，用PRRS弱毒苗注射豬還存在向非疫苗豬傳播PRRSV致病性的情況[3]。為探討在飼糧中添加靈芝多糖對接種PRRSV弱毒苗生長育肥內江黑豬抗氧化能力的影響，我們開展了本試驗。

1 材料與方法

（1）試驗材料：試驗豬：60kg左右的內江豬，源自四川省內江市農科院畜牧研究所豬場；飼養(yǎng)方為自由飲水、自由采食，確保舍內溫度適宜、清潔、空氣流通，并定期對圈舍進行清洗消毒；靈芝多糖，購買于上?？抵壅婢嗵怯邢薰?；PRRSV弱毒苗：北美ATCC VR-2332 PRRS株活疫苗（Ingelvac?PRRSV MLV，每頭分含TCID50為104.8）。主要儀器設備：各種規(guī)格移液器，普通離心機等。

（2）試驗分組及處理：試驗期為42d。試驗按照2×2的因子設計：因子一為接種PRRSV弱毒苗和不接種兩種處理；因子二為靈芝多糖添加水平，設0，50mg/kg兩個水平（表示為CON和GLP）。試驗共4個處理，每個處理組5個重復，每個重復4頭豬，共80頭豬。

表1 試驗動物分組

（3）檢測指標及方法：每個組隨機選取一頭豬，在試驗的7d、14d、21d、28d、35d、42d靜脈采血5ml，收集血清，-70℃冰箱保存待測。用分光光度計測定血清中的測定T-AOC值，用硫代巴比妥酸法測定血清中MDA的含量。試驗結束的豬屠宰后，迅速分別取其肝臟部、肌肉部3g，每個樣取3份。將取出的肉樣用經DEPC處理的生理鹽水迅速沖洗，用液氮速凍，-70℃保存?zhèn)溆谩?/p>

（4）統計分析：用spss進行數據統計，結果用平均數±標準差表示。p＜0.05認為有統計學意義。

2 結果與分析

（1）靈芝多糖對接種PRRSV弱毒苗內江豬血清T-AOC的影響 接種疫苗組的豬血清中T-AOC都有所降低，且在接種疫苗后的前14d降低程度較大。接種疫苗組與PBS對照組相比，在接種疫苗后的第7d和第14d，接種疫苗組的豬的血清中T-AOC 顯著降低（p＜0.05）。此外，在接種疫苗之后的第28d，接種疫苗組豬血清中T-AOC值低于PBS對照組。就日糧的影響而言，GLP組豬血清中T-AOC的濃度更高，在接種疫苗后的第14d和第35d差異顯著（p＜0.05）。結果顯示，日糧和免疫交互對豬血清中T-AOC濃度的影響不顯著（p＞0.05）（表2）。

表2 靈芝多糖對內江黑豬血清中T-AOC影響

（2）靈芝多糖對接種PRRSV弱毒苗內江豬血清MDA的影響接種疫苗組的豬血清中MDA水平有所提高。同時，在接種疫苗后的第28d，豬血清中MDA趨于正常的水平。接種疫苗組與PBS對照組相比，在接種疫苗后14d內，接種疫苗組的內江豬血清MDA濃度不斷升高。就日糧而言，GLP組豬血清中MDA的濃度降低，且在接種疫苗后的第14d達到顯著差異（p＜0.05）。結果顯示，日糧和免疫交互對豬血清MDA濃度的影響不顯著（p＞0.05）（表3）。

（3）靈芝多糖對接種PRRSV弱毒苗內江豬肝臟抗氧化能力的影響 在第二次接種疫苗之后的14d，接種疫苗組肝臟中MDA濃度升高顯著（p＜0.05），肝臟中T-AOC能力降低，但其T-AOC能力的差異不顯著（p＞0.05）。就日糧而言，GLP日糧降低了豬肝臟中MDA的濃度，且有降低趨勢，豬肝臟中T-AOC能力顯著提高（p＜0.05）。結果顯示，日糧和免疫對肝臟中MDA濃度和T-AOC能力的影響不顯著（p＞0.05）（表4）。

（4）靈芝多糖對接種PRRSV弱毒苗內江豬肌肉抗氧化能力的影響 接種疫苗組豬肌肉中MDA水平增加顯著（p＜0.05），加快肝臟脂質過氧化，同時顯著降低了肌肉T-AOC能力（p＜0.05）。就日糧而言，GLP日糧降低了豬肌肉中MDA濃度，提高了豬肌肉中T-AOC能力，但T-AOC能力的差異不顯著（p＞0.05）。結果顯示，日糧和免疫對肌肉中MDA濃度和T-AOC能力的影響不顯著（p＞0.05）（表5）。

3 討論

靈芝多糖日糧對接種PRRSV弱毒苗內江豬抗氧化能力的影響：

通常，正常機體它的抗氧化防御體系是非常完整的。這套完整的防御體系包括了超氧化物歧化酶、CAT以及GSH-Px等。這套完整的防御體系使體內的自由基保持動態(tài)平衡。然而，當這套完整的防御抗氧化系統損壞，就會引起細胞損傷。細胞損傷是由于機體內產生過量的MDA等脂質過氧化物而導致的。靈芝多糖能誘導T淋巴細胞和B淋巴細胞的增殖，促進細胞因子分泌，進而使得酶的活力得到提高，清掃自由基，發(fā)揮免疫調節(jié)作用，增強機體的抗氧化能力。研究顯示，機體感染病毒后，發(fā)生病變和損壞的細胞產生的自由基較多，使機體抗氧化能力的變弱[4]，造成機體氧化應激、細胞膜脂質過氧化、DNA片段分裂等。本研究的結果與上述結果一致。在接種疫苗之后的第7d和第14d，接種疫苗組血清中T-AOC顯著降低，并且在接種疫苗的第21d直到第28d血清中的T-AOC慢慢的趨于正常的水平。由此可見，在感染PRRSV之后機體的抗氧化力下降。

研究顯示，病毒對宿主細胞能夠通過發(fā)生一定的應激反應而產生并且釋放大量的自由基。同時，這些被釋放出來的自由基可以使得病毒的復制不斷增強。與此同時，這些被釋放出來的自由基可以引起生物膜的損傷，進而會導致機體的抗氧化力變弱，從而引發(fā)疾病。在本研究中，接種疫苗組在接種疫苗之后其內江豬的血清中MDA水平有所提高。然而，在接種疫苗的第14d種疫苗組血清MDA濃度才慢慢開始升高，而除此之外的天數差異不顯著。

在本研究中，接種疫苗組肝臟中MDA水平極顯著增加（p＜0.01），肝臟脂質過氧化的速度加快，同時降低了肝臟T-AOC能力，引起肝臟的氧化損傷。

多項研究表明，靈芝多糖對抗氧化、減緩氧化應激有一定的作用。王君巧等[5]報道灌服黑靈芝多糖可使脾臟組織中的SOD、CAT、T-AOC的含量較模型對照組顯著提高而MDA含量較模型對照組顯著下降。在本研究中，實驗結果顯示在接種疫苗之后14d肝臟MDA水平增加，靈芝多糖日糧可以降低肝臟脂質過氧化。靈芝多糖能提高小鼠的抗氧化能力。通過給免疫抑制小鼠服用靈芝多糖，發(fā)現小鼠血清中IL-2、INF-α的含量都能明顯上升，并使谷胱甘肽過氧化物酶、SOD、T-AOC、CAT水平提高，使MDA含量降低[6]。

表3 靈芝多糖對內江豬血清MDA的影響

表4 靈芝多糖對內江豬肝臟抗氧化能力的影響

表5 靈芝多糖對內江豬肌肉T-AOC和MDA的影響

在本研究中，內江黑豬在接種疫苗之后的免疫應激期間，其機體的抗氧化能力下降，而靈芝多糖日糧組在接種疫苗后第14d和第35d內江黑豬血清中T-AOC濃度顯著升高了；接種疫苗后的14d內江黑豬血清中和肝臟MDA濃度降低了。結果表明，在接種疫苗之后的兩周內，靈芝多糖能夠減輕疫苗引起的氧化應激反應，并且能夠提高內江豬機體的抗氧化力，進而提高生產性能。

4 結論

在接種PRRSV弱毒苗的情況下，飼糧中添加靈芝多糖能夠提高機體抗氧化能力，從而提高機體免疫力。

[1]趙巖，張瑩，初樂，等.靈芝多糖的研究進展[J].中國果蔬，2014，（32）：27-30.

[2]毛健，馬海樂.靈芝多糖的研究進展[J].食品科學，2010，（31）：295-298.

[3]王俊文.飼糧添加白藜蘆醇對接種藍耳病弱毒苗育肥豬生產性能和免疫功能及肉品質的影響[D].四川農業(yè)大學，2012.

[4]Krishnan V，Zeichner SL. Host cell gene expression during human immunodeficiency virus type 1 latency and reactivation and effects of targetinggenes that are differentially expressed in viral latency. Journal of Virology，2004，78（17）：9458-9473.

[5]王君巧，聶少平，余強，等.黑靈芝多糖對免疫抑制小鼠的免疫調節(jié)和抗氧化作用[J].食品科學，2012，33（23）：274-277.

[6]鄒佳妤，石廣亮，姜曉文.赤靈芝多糖對機體抗氧化作用及免疫功能的影響研究[J].中國獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2012，（2）：56-60.

查琳（1989—），女，四川內江人，碩士研究生，主要從事內江豬及家禽遺傳育種研究工作。