關(guān)文怡 于鳳芝 岳子易 楊子毅

（北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，北京102442）

微酸性電解水在奶牛場(chǎng)的消毒效果試驗(yàn)

關(guān)文怡 于鳳芝 岳子易 楊子毅

（北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，北京102442）

微酸性電解水是由特制的電解水儀將一定比例的低濃度氯化鈉和稀鹽酸電解而成，其以Cl2和HClO-形態(tài)存在的有效氯具有較強(qiáng)的殺菌力。本試驗(yàn)是用電解水在奶牛場(chǎng)進(jìn)行奶牛乳頭藥浴，擠奶工雙手消毒和擠奶車間空間消毒，探究其殺菌效果。結(jié)果表明，隨有效氯濃度增加，電解水對(duì)奶牛乳頭藥浴的殺菌效果增強(qiáng)，當(dāng)效氯濃度達(dá)60mg/L時(shí)，殺菌率為96.74%，與牛場(chǎng)日常使用的0.5%聚維酮碘消毒液的殺菌率（95.38%）相當(dāng)；用30mg/L有效氯濃度的電解水與0.5%聚維酮碘消毒液消毒擠奶員雙手殺菌率相近似，均能達(dá)到95%以上；電解水對(duì)擠奶車間進(jìn)行噴霧消毒，隨濃度增加，殺菌效果增強(qiáng)，當(dāng)效氯濃度達(dá)120mg/L時(shí)，殺菌率達(dá)78.32%。本試驗(yàn)結(jié)果為今后推廣電解水在牛場(chǎng)環(huán)境消毒提供了參考。

微酸性電解水 奶牛場(chǎng) 殺菌效果

微酸性電解水是由特制的電解水儀將一定比例的低濃度氯化鈉和稀鹽酸電解而成，其以Cl2和Hclo－形態(tài)存在的有效氯具有較強(qiáng)的殺菌力[1]。由于電解水對(duì)環(huán)境無(wú)污染、對(duì)畜禽產(chǎn)品不存在殘留的特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)中[2]。奶牛場(chǎng)中奶牛常見病，尤其奶牛乳腺炎的發(fā)生與環(huán)境、工作人員及奶牛本身的衛(wèi)生狀況密切相關(guān)，用高效、環(huán)保、無(wú)殘留的電解水消毒在奶牛生產(chǎn)中意義重大。本試驗(yàn)研究旨在探討微酸性電解水在奶牛場(chǎng)對(duì)乳頭藥浴、擠奶員雙手及擠奶車間的消毒效果，為微酸性電解水在畜牧養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與設(shè)備

1.1.1 試驗(yàn)設(shè)備：微酸性電解水儀（型號(hào)：AnyWhere-320W生產(chǎn)單位：北京睿安德環(huán)保設(shè)備有限公司）；雙量程氯量計(jì)（型號(hào)：Chlorometer Duo；生產(chǎn)單位：英國(guó)百靈達(dá)有限公司）；pH計(jì)（型號(hào)：ST3100 生產(chǎn)單位：常州奧豪斯儀器有限公司）。

1.1.2 奶牛場(chǎng)選擇：本試驗(yàn)在北京南部某奶牛場(chǎng)進(jìn)行，該場(chǎng)存欄奶牛330頭，產(chǎn)奶期奶牛159頭；首先利用BLT乳腺炎檢測(cè)方法對(duì)產(chǎn)奶期奶牛進(jìn)行乳腺炎普查，選出無(wú)乳腺炎的健康奶牛并按編號(hào)記錄。

1.1.3 試劑材料：普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂（北京索萊寶科技有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20160907）；聚維酮碘消毒液（北京中農(nóng)奧美生物制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20160704）；電解水自制。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 電解水藥浴乳頭消毒試驗(yàn)

（1）試驗(yàn)分組：選取20頭無(wú)乳腺炎的健康泌乳奶牛，分為4組，第1～3組分別用有效氯濃度為30mg/L、60mg/L、90mg/L的電解水500ml進(jìn)行乳頭藥浴，每組5頭牛。對(duì)照組以0.5%聚維酮碘消毒液500ml進(jìn)行乳頭藥浴。

（2）采樣步驟：擠奶前用常溫水清洗乳頭后，藥浴，乳頭浸泡時(shí)間為15 s，采樣一次，擠完奶后，再采樣一次，重復(fù)操作三次。

（3）采樣方法和樣品處理：用無(wú)菌中和劑浸潤(rùn)過(guò)的棉簽在乳頭及周圍皮膚4cm2表面涂擦采樣，剪去手持端，將棉簽迅速投入裝有2ml無(wú)菌中和劑的E P管，送無(wú)菌室。漩渦振蕩，把棉簽上的細(xì)菌充分洗脫后，取100μl涂布普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)24h計(jì)數(shù)。

（4）殺菌率=（消毒前菌落總數(shù)－消毒后菌落總數(shù)）/消毒前菌落總數(shù)×100%

1.2.2 電解水對(duì)擠奶員手消毒試驗(yàn)

（1）試驗(yàn)分組：隨機(jī)選6名擠奶員，分為2組，試驗(yàn)組用有效氯濃度為30mg/L 的電解水2000ml浸泡消毒雙手。對(duì)照組以5%聚維酮碘消毒液2000ml浸泡消毒雙手。每組3人。

（2）采樣步驟：擠奶前用常溫水清洗雙手，采樣。將雙手浸于消毒液內(nèi)，并反復(fù)搓擦消毒1min，采樣。重復(fù)操作三次。

（3）采樣方法和樣品處理：用無(wú)菌中和劑浸潤(rùn)過(guò)的棉簽對(duì)消毒前、后手指曲面進(jìn)行涂擦采樣，剪去手持端，將棉簽迅速投入裝有2ml無(wú)菌中和劑的E P管，送無(wú)菌室。漩渦振蕩，把棉簽上的細(xì)菌充分洗脫后，取100μl涂布普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)24h計(jì)數(shù)。

（4）殺菌率=（消毒前菌落總數(shù)－消毒后菌落總數(shù)）/消毒前菌落總數(shù)×100%

1.2.3 電解水對(duì)擠奶車間空間消毒試驗(yàn)

（1）試驗(yàn)場(chǎng)地選擇：奶牛場(chǎng)擠奶車間，消毒空間為30×12×4m3

（2）采樣步驟：在消毒前用平板沉降法采樣5min，取得消毒前菌落數(shù)。用分別用60mg/L、90mg/L、120mg/L的電解水用高壓水槍（噴嘴直徑50 um）以500ml/m2的量進(jìn)行噴霧消毒，在消毒后30min，再一次采樣5min。

（3）空氣采樣方法 采用平板沉降法進(jìn)行采樣，設(shè)4角及中央5個(gè)采樣點(diǎn)，4角布點(diǎn)部位距墻壁0.5m處，每點(diǎn)3個(gè)9cm營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)皿，采樣5min，采樣高度0.5m，加蓋后放入37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h，計(jì)算擠奶車間內(nèi)空氣自然菌菌落數(shù)量，取平均值統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。

（4）空氣中細(xì)菌總數(shù)計(jì)算方法 每1m3細(xì)菌總數(shù)：（cfu/m3）=50000 N/（A×T）。式中：A為平皿面積（單位cm2）；T為平板暴露時(shí)間（min）；N為平均菌落數(shù)（cfu）；50000為校正值。

（5）殺菌率=（消毒前菌落總數(shù)－消毒后菌落總數(shù)）/消毒前菌落總數(shù)×100%

2 結(jié)果與討論

2.1 電解水藥浴乳頭消毒試驗(yàn)結(jié)果

由圖1可見，有效氯濃度為30mg/L、60mg/L、90mg/L的電解水（pH值為），對(duì)奶牛乳頭進(jìn)行15 s藥浴，隨濃度增加，殺菌效果增強(qiáng)，當(dāng)效氯濃度達(dá)60mg/L時(shí)，殺菌率已達(dá)96.74%，與牛場(chǎng)日常使用的0.5%聚維酮碘消毒液的殺菌率（95.38%）相當(dāng)。

圖1 電解水藥浴乳頭消毒試驗(yàn)結(jié)果

2.2 電解水對(duì)擠奶員手消毒試驗(yàn)結(jié)果

用30mg/L有效氯濃度的電解水與0.5%聚維酮碘消毒液消毒擠奶員雙手殺菌率相近似，均能達(dá)到95%以上，由于雙手浸泡消毒的時(shí)間為1min，相比15 s藥浴同樣是30mg/L有效氯濃度的電解水殺菌率要高，由此可見，殺菌率與消毒作用時(shí)間相關(guān)。

圖2 電解水對(duì)擠奶員手消毒試驗(yàn)結(jié)果

2.3 電解水對(duì)擠奶車間空間消毒試驗(yàn)結(jié)果

由圖3可見，有效氯濃度為60mg/L、90mg/L、120mg/L的電解水（pH值為），對(duì)擠奶車間進(jìn)行噴霧消毒，隨濃度增加，殺菌效果增強(qiáng)，當(dāng)效氯濃度達(dá)120mg/L時(shí)，殺菌率為78.32%，達(dá)到畜禽場(chǎng)環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[3]中對(duì)牛舍細(xì)菌總數(shù)小于2×104cfu/m3的質(zhì)量要求。

圖3 電解水對(duì)擠奶車間空間消毒殺菌率

圖4 電解水對(duì)擠奶車間空間消毒前后菌落數(shù)

3 小結(jié)

（1）對(duì)奶牛乳頭藥浴和擠奶員雙手消毒時(shí)，使用30mg/L有效氯的電解水與0.5%聚維酮碘的殺菌效果相當(dāng)。但在經(jīng)濟(jì)成本上計(jì)算，使用電解水相對(duì)價(jià)廉，可減少奶牛場(chǎng)成本支出，增加效益。

（2）當(dāng)有效氯濃度達(dá)到60mg/L時(shí)，電解水中有較濃的氯氣氣味，是否可吸附到乳汁中，尚有待研究。因此，高有效氯濃度的電解水不建議用于奶牛場(chǎng)器具消毒。

（3）本試驗(yàn)為電解水在奶牛場(chǎng)擠奶車間環(huán)境空氣消毒方面進(jìn)行了有意義的探究，牛舍經(jīng)電解水消毒后環(huán)境空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)大幅度減少，為之后推廣電解水在牛場(chǎng)環(huán)境消毒提供了參考。

[1]南松劍，王朝元，曹薇，等.微酸性電生功能水在奶牛場(chǎng)的消毒效果研究[J].中國(guó)奶牛，2009，（10）：34-37.

[2]陳海燕，周凌云，李發(fā)弟，等.電解水在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2012，（2）：75-78.

北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院技術(shù)研發(fā)與示范推廣基金項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：XY-YF-16-10）

關(guān)文怡（1973-），女，副教授，主要從事獸醫(yī)臨床。