南文金，黃健強，吳靜波，胡鴻惠，彭國良

（韶關(guān)學院動物疫病實驗室，廣東韶關(guān)512005）

2014-2016年粵北地區(qū)規(guī)?；i場偽狂犬病血清學調(diào)查與分析

南文金，黃健強，吳靜波，胡鴻惠，彭國良

（韶關(guān)學院動物疫病實驗室，廣東韶關(guān)512005）

為了解粵北地區(qū)豬偽狂犬?。≒seudorabies,PR）毒野毒感染及疫苗免疫情況，用ELISA方法對2014-2016年粵北地區(qū)25個規(guī)模豬場送檢的3 895份（49批次）血清進行了偽狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）gE抗體和gB抗體檢測.檢測結(jié)果顯示，粵北地區(qū)2014-2016年豬場PR野毒陽性率分別為78.57%、77.78%和64.71%，樣品陽性率分別為7.02%、9.72%和10.44%.2014-2016年公豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、后備母豬、保育豬和生長育肥豬gE抗體總陽性率分別為11.72%、10.3%、9.49%、4.89%和14.61%，不同豬群間PR野毒感染率差異顯著.2014-2016年不同豬群PRV gB抗體調(diào)查結(jié)果顯示，公豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、后備母豬、保育豬和生長育肥豬總陽性率分別為96.55%、98.97%、92.4%、65.23%和35.79%.結(jié)果表明，粵北地區(qū)規(guī)模豬場PR野毒感染普遍存在，整體陽性率相對不高；種豬群PR疫苗免疫抗體水平較高，但保育豬群和生長育肥豬群疫苗抗體水平較低，成為野毒感染高風險群體.

豬；偽狂犬病毒；gE抗體；gB抗體；調(diào)查分析

偽狂犬?。≒seudorabies,PR）是由偽狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的多種家畜和野生動物發(fā)病的一種傳染病［1］.在畜牧業(yè)生產(chǎn)中，PRV對養(yǎng)豬業(yè)的危害最為嚴重，臨床上可引起母豬繁殖障礙，仔豬神經(jīng)癥狀、腹瀉和中大豬呼吸道疫病.豬場一旦爆發(fā)該病，往往造成較大經(jīng)濟損失.在養(yǎng)豬生產(chǎn)中，該病可以通過免疫豬偽狂犬疫苗進行預(yù)防，特別是PRV基因工程疫苗的廣泛應(yīng)用，不但有效控制了該病在我國的流行，一些豬場還成功凈化了該病.但近幾年來，PR在我國部分地區(qū)豬場爆發(fā)并廣泛流行，部分PRV野毒陰性豬場迅速轉(zhuǎn)陽，成為近年對我國養(yǎng)豬業(yè)影響較大的疫病之一［2-3］.

免疫PRV基因工程疫苗的豬群，可以通過檢測血清中g(shù)E抗體來評估野毒感染情況，通過檢測血清中g(shù)B抗體對疫苗免疫效果進行評估，為豬場開展PRV凈化及防控提供科學依據(jù).為了解粵北地區(qū)近三年來豬PR流行動態(tài)和免疫情況，對2014-2106年粵北地區(qū)部分規(guī)模豬場送檢的血清樣品進行了PRV gE抗體和gB抗體檢測，并對檢測數(shù)據(jù)進行了統(tǒng)計分析.

1 材料和方法

1.1 樣品信息

201 4-2016年粵北地區(qū)25個規(guī)?；i場49批次送檢的3 895份血液樣品，實驗室常規(guī)方法分離血清，4℃冷藏保存待檢.所檢豬場均已免疫接種豬偽狂犬病毒基因工程疫苗.

1.2 檢測方法

豬偽狂犬病毒gB抗體檢測試劑盒和gE抗體檢測試劑盒均使用美國IDEXX公司生產(chǎn)的ELISA檢測試劑盒，嚴格按試劑盒使用說明書進行操作.

1.3 結(jié)果判定

根據(jù)S/N值來判定抗體陰陽性，當S/N≤0.6，樣品判定為gE(gB)抗體陽性；當0.6＜S/N≤0.7，樣品判定為gE(gB)抗體陰性，判為可疑；當S/N＞0.7，樣品判定為gE(gB)抗體陰性.

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

分年度統(tǒng)計檢測豬場gE抗體陽性率、樣品gE抗體陽性率、不同豬群gE抗體陽性率和gB抗體陽性率.

2 結(jié)果

2.1 豬場偽狂犬野毒感染情況調(diào)查結(jié)果

201 4-2016年粵北地區(qū)規(guī)?；i場PR野毒感染情況調(diào)查結(jié)果見表1.結(jié)果顯示，豬場PR野毒陽性率分別為78.57%、77.78%和64.71%.樣品陽性率分別7.02% 、9.72%和10.44%.結(jié)果表明，近三年來粵北地區(qū)規(guī)?；i場野毒感染情況普遍存在，豬場陽性率呈逐年下降趨勢，但樣品陽性率呈逐年上升趨勢.

2.2 不同豬群偽狂犬野毒感染情況調(diào)查結(jié)果

201 4-2016年對不同階段豬群PR野毒感染情況統(tǒng)計見表2.結(jié)果顯示，不同年份不同階段豬群PR野毒陽性率不同，三年間公豬、母豬和后備豬群樣品總陽性率差異不大，分別為11.72%、10.3%和9.49%，保育豬群PR野毒陽性率最低為4.89%，生長育肥豬群PR野毒陽性率最高，為14.61%.從分年統(tǒng)計結(jié)果來看，公豬群2016年P(guān)R野毒陽性率最高，達到18.18%，母豬群2015年陽性率最高，達到14.98%，后備豬群2016年陽性率最高，達到12.98%，保育豬群2016年陽性率最高，達到7.57%，生長育肥豬群陽性率呈逐下降趨勢，從2014年陽性率12.91%下降到2016年的9.27%.

表1 偽狂犬野毒感染情況調(diào)查結(jié)果

表2 不同豬群偽狂犬野毒感染情況調(diào)查結(jié)果

2.3 豬偽狂犬疫苗抗體陽性率調(diào)查結(jié)果

201 4-2016年粵北地區(qū)規(guī)模豬場不同階段豬群豬偽狂犬病毒gB抗體調(diào)查結(jié)果見表3.結(jié)果顯示，公豬和母豬gB抗體陽性率較高，平均陽性率分別為96.55%和98.97%.2014-2016年后備母豬gB抗體陽性差別較大，分別為81.55%、93.29%和92.22%.保育豬和生長育肥豬gB抗體陽性率較低，其中生長育肥豬陽性率最低，在35%～40.24%.

3 討論

gE基因是PRV一個主要毒力基因，當前養(yǎng)豬業(yè)廣泛使用的PRV基因工程疫苗都缺失了gE基因，免疫gE基因缺失的PRV基因工程疫苗后不會產(chǎn)生針對gE蛋白的抗體，而感染PRV野毒株的豬會產(chǎn)生gE抗體，因此，免疫過PRV基因缺失疫苗的豬群，可以通過檢測gE抗體對豬群感染豬PRV野毒情況做評估［4］。

表3 不同豬群偽狂犬疫苗抗體水平調(diào)查結(jié)果

表1結(jié)果表明，2014-2016年粵北地區(qū)規(guī)?；i場豬PRV野毒陽性率都在70%以上，三年來豬場陽性率差別不大，但樣品陽性率卻呈現(xiàn)逐年上升趨勢，三年間檢測的樣品gE抗體陽性率分別為7.02%、9.72%和10.44%.

表2對不同階段豬群PRV野毒感染情況統(tǒng)計表明，不同豬群間gE抗體陽性率差異顯著.2014-2015年P(guān)RV野毒感染率最高的豬群為生長育肥豬，gE陽性率為分別為23.91%和14.15%，但生長育肥豬gE抗體陽性率三年間呈現(xiàn)逐年降低趨勢，至2016年下降到9.27%.公豬、母豬和后備豬gE陽性率各年間差異較大.保育豬陽性率最低，2014-2016年陽性率分別為3.81%、3.67%和7.57%.2016年公豬和后備豬PRV野毒感染率明顯高于2014年和2015年，這是由于2016年在檢測的一個豬場引進公豬和后備母豬時沒有進行引種前檢測，引進了部分PRV gE抗體陽性種豬導致該年公豬和后備母豬PRV野毒感染率升高.粵北地區(qū)規(guī)?；i場 2014-2016 年豬場陽性率高于湖南［5］、福建［6］、廣西［7］、安徽［8］等地區(qū)，但樣品陽性率則比大多數(shù)地區(qū)報道的陽性率要低，這表明PRV野毒在粵北地區(qū)規(guī)模化豬場普遍存在，但豬群感染程度相對較低，這一調(diào)查結(jié)果和李段等對廣東省豬偽狂犬病流行病學調(diào)查結(jié)果相一致［9］.

gB蛋白是PRV重要糖蛋白，gB蛋白能誘導機體產(chǎn)生中和抗體，因此，通過檢測PRV gB抗體可以對PRV疫苗免疫效果進行評估.表3對2014-2016年粵北地區(qū)規(guī)?；i場PRV gB抗體檢測結(jié)果顯示，公豬和母豬gB抗體總陽性率都在90%以上，最低的2014年公豬陽性率為94.28%，疫苗免疫效果較好；后備豬群疫苗免疫效果各年差異較大，保育豬和育肥豬疫苗抗體合格率較低，特別是生長育肥豬，2014-2016年gB抗體陽性率雖然逐年上升，但最高的2016年也僅為44.96%.對比生長育肥豬gE抗體和gB抗體陽性率變化趨勢可以發(fā)現(xiàn)，在gB抗體合格率逐年升高的同時，粵北地區(qū)規(guī)模化豬場育肥豬群中g(shù)E抗體陽性率呈逐年下降.這一結(jié)果也充分說明近幾年導致偽狂犬病爆發(fā)和流行的一個重要原因就是忽視了中大豬的疫苗免疫.長期以來，由于偽狂犬疫苗良好的免疫效果使得豬偽狂犬病在規(guī)?；i場很少發(fā)生，因此，許多豬場僅對種豬群進行免疫，對商品豬群不進行疫苗免疫或僅采用的是1日齡滴鼻免疫，隨著母源抗體下降，保育后期PRV抗體合格率開始迅速下降，造成中大豬疫苗抗體水平較低或無抗體，成為易感群體，一旦有野毒侵入，病毒迅速繁殖，快速傳播.因此，要重視保育豬和生長育肥豬PRV疫苗免疫，制定科學的免疫程序，避免生長育肥豬成為PRV免疫空白群體對豬場PRV防控至關(guān)重要.

201 1年以來PR發(fā)病率在全國明顯上升，許多PRV野毒陰性豬場迅速轉(zhuǎn)陽.本調(diào)查中的豬場大部分為大型豬場，經(jīng)產(chǎn)母豬存欄在500～3 000頭，每年進行1～3次定期監(jiān)測，三年間僅有2個豬場一直保持PRV野毒抗體陰性，這和近年來PRV在全國流行趨勢相符.通過以上三年檢測數(shù)據(jù)，結(jié)合粵北地區(qū)近年來豬偽狂犬病發(fā)病情況分析，粵北地區(qū)規(guī)?；i場當前PRV野毒陽性已經(jīng)很普遍，但除個別豬場gE陽性率較高，超過20%，甚至達到50%以上外，多數(shù)規(guī)模化豬場感染壓力相對較低，特別是種豬群，gE陽性率大多低于10%，具備凈化條件.

研究證明近幾年流行的PRV毒株發(fā)生了較大變異，毒力也明顯增強，現(xiàn)有疫苗對當前流行毒株保護力下降［10-12］，但生產(chǎn)實踐中證明，在尚未有更新型的PRV疫苗面世前，利用現(xiàn)有疫苗和檢測技術(shù)，通過制定科學合理的免疫程序，提高豬群疫苗抗體水平，增強整個豬群對PRV野毒感染抵抗力，也可以有效防控PR，做到感染不發(fā)病，降低因PR流行帶來的經(jīng)濟損失.

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Serological Investigation and Analysis of Porcine Pseudorabies in Scale Pig Farms of Northern Guangdong from 2014 to 2016

NAN Wen-jin,HUANG Jian-qiang,WU Jing-bo,HU Hong-hui,PENG Guo-liang
（Laboratory of Animal Disease，Shaoguan University,Shaoguan 512005,Guangdong,China）

To understand the porcine Pseudorabies(PRV)wild strain infection and vaccine immune effect in northern Guangdong region,a total of 3 895 serum samples obtained from 25 large-scale pig farms,serum samples were tested for PRV-gE or PRV-gB antibody by ELISA method.The monitoring data showed that PRV wild strain infection rate of pig farms was 78.57%,77.78%,64.71%in the year of 2014,2015 and 2016 respectively,and samples wild strain positive rates were 7.02%,9.72%and 10.44%.From 2014 to 2016,PRV wild strain infection was a significant difference between boars,multiparity sows,gilt,nursery pig and growing-finishing pigs,gE antibody total positive rate were 11.72%,10.3%,9.49%,4.89%and 14.61%,PRV gB antibody positive rate were 96.55%,98.97%,92.4%,65.23%and 35.79%in these swine herds.The results indicated that scale pig farms with PRV wild strain infection were widespread in northern Guangdong region,the overall positive rate was relatively low,and PRV vaccine immune antibody level were higher in breeding herds,but in nursery pig and growing-finishing pigs vaccine antibody level were lower,and these pigs would become high-risk groups with wild strains infection.

swine；PRV；gE antibody；gB antibody,investigation and analysis

S852.5+3

A

1007-5348（2017）09-0071-04

2017-06-22

廣東省科技計劃項目（2016A040402038）；廣東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新聯(lián)盟建設(shè)項目（2016LM1141）；韶關(guān)市科技計劃項目（2013CX/N09）.

南文金（1981-），男，河南靈寶人，韶關(guān)學院動物疫病實驗室助理研究員，碩士；研究方向：動物傳染病防控技術(shù).

（責任編輯：閆文龍）