黃衛(wèi)華，鐘文敏，王德勝，曾雪亮，李 蓓(1.贛州市醫(yī)療急救中心急救科，江西 贛州 341000； .贛南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院藥劑科，江西 贛州 341000)

·論著·

*副主任藥師。研究方向：醫(yī)院藥學。E-mail：pancf 009@163.com

臭牡丹乙醇提取物對小鼠睡眠功能和自發(fā)活動的影響Δ

黃衛(wèi)華1*，鐘文敏2，王德勝2，曾雪亮2，李 蓓2
(1.贛州市醫(yī)療急救中心急救科，江西 贛州 341000； 2.贛南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院藥劑科，江西 贛州 341000)

目的：探討臭牡丹乙醇提取物對小鼠睡眠功能和自發(fā)活動的影響。方法：(1)臭牡丹的提取。采用75%乙醇浸漬臭牡丹48 h，制得質量濃度為1.0 g/ml的臭牡丹乙醇提取物。(2)小鼠自發(fā)活動。取小鼠30只，隨機分為對照組、觀察1組和觀察2組，每組10只，采用抖籠法測定小鼠自發(fā)活動情況。(3)睡眠功能。采用閾上劑量、閾下劑量的戊巴比妥鈉致小鼠睡眠的方法，觀察臭牡丹乙醇提取物對小鼠睡眠時間的影響。結果：給藥后，觀察1、2組小鼠15 s內大波、中波出現個數明顯少于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。給予閾上劑量戊巴比妥鈉時，觀察1、2組小鼠的睡眠持續(xù)時間均明顯長于對照組，入睡時間明顯短于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。給予閾下劑量戊巴比妥鈉時，對照組無小鼠入睡，觀察1、2組小鼠入睡數量分別為4、7只。結論：臭牡丹乙醇提取物可明顯抑制小鼠自發(fā)活動，并具有鎮(zhèn)靜催眠的作用。

臭牡丹； 乙醇提取物； 鎮(zhèn)靜催眠； 自發(fā)活動； 小鼠

臭牡丹是馬鞭草科植物的干燥根，別稱大紅袍、臭八寶及矮桐子等。其有特殊臭氣，性溫，味苦，以根或全株入藥，分布于我國四川、江西、福建和廣東等省。臭牡丹具有活血化瘀、消腫解毒、清熱利濕和止痛之功效，臨床多用于疽、療瘡、乳腺炎、關節(jié)炎和肝炎等疾病的治療[1-2]。研究結果表明，臭牡丹提取物具有抗炎、鎮(zhèn)痛和抗過敏的作用，可抑制真菌[3-5]；臭牡丹根的正丁醇提取物具有鎮(zhèn)痛作用[6-9]；臭牡丹中的黃酮類成分具有抗氧化[10]、抗炎和抗腫瘤作用[11-14]；臭牡丹根提取液具有局部麻醉作用[15-16]。但臭牡丹乙醇提取物的鎮(zhèn)靜催眠和自發(fā)活動作用尚未見報道。本研究探討了臭牡丹乙醇提取物對小鼠睡眠功能和自發(fā)活動的影響，可能填補國內外對臭牡丹乙醇提取物相關研究的空白，為臭牡丹乙醇提取物的開發(fā)提供有價值的研究資料。

1 材料

1.1儀器

LMS-2A型二道生理記錄儀(成都儀器廠);JZ100型肌肉張力換能器(上海益聯醫(yī)學儀器發(fā)展有限公司)；自制吊籠(寬10 cm、高7.5 cm，質量100 g)，小掛鉤。

1.2藥品與試劑

臭牡丹購于贛州市中藥店，經贛南醫(yī)學院二級教授曾靖鑒定為臭牡丹。戊巴比妥鈉購自北京普博思生物公司，批號為2008122。

1.3實驗動物

小鼠購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，動物中心許可證號：SCXK(湘)2011-0003，動物合格證號：43004700003244，級別為清潔級，昆明種，平均體質量(20±2) g，雌雄各半。

2 方法

2.1樣品的制備

將臭牡丹洗凈，用75%乙醇浸漬48 h，過濾，將藥物濃縮至質量濃度為1.0 g/ml，備用。

2.2小鼠自發(fā)活動

取小鼠30只，隨機分為對照組、觀察1組和觀察2組，每組10只。吊籠、JZ100型肌肉張力換能器與LMS-2A型二道生理記錄儀相連，將小鼠自發(fā)活動記錄在LMS-2A型二道生理記錄儀上。小波(波幅<5 mm)為小鼠輕度活動，如舐毛、瘙癢等；中波(波幅在5～10 mm)為小鼠適當活動，如走動、立起等；大波(波幅>10 mm)為小鼠強度活動，如跑動等。小鼠禁食8 h后開始實驗。將小鼠置于吊籠中適應3 min后開始記錄自發(fā)活動情況，記錄波形15 s后給藥。觀察1組小鼠給予臭牡丹乙醇提取物0.1 g/kg，觀察 2組小鼠給予臭牡丹乙醇提取物0.2 g/kg，對照組給予等量0.9%氯化鈉溶液，三組小鼠均灌胃給藥。給藥30 min后記錄小鼠15 s內活動波形。

2.3睡眠功能

2.3.1 閾上劑量戊巴比妥鈉對睡眠時間的影響：取小鼠30只，隨機分為對照組、觀察1組和觀察2組，每組10只。觀察1組小鼠給予臭牡丹乙醇提取物0.1 g/kg，觀察2組小鼠給予臭牡丹乙醇提取物0.2 g/kg，對照組給予等量0.9%氯化鈉溶液，三組小鼠均灌胃給藥。15 min后，三組小鼠均腹腔注射0.25%戊巴比妥鈉0.20 ml/10 g，觀察小鼠的睡眠時間[17]。

2.3.2 閾下劑量戊巴比妥鈉對睡眠時間的影響：按照“2.3.1”項下方法分組及灌胃給藥。15 min后，三組小鼠均腹腔注射0.25%戊巴比妥鈉0.10 ml/10 g，觀察小鼠的睡眠時間。

2.4統(tǒng)計學方法

3 結果

3.1臭牡丹乙醇提取物對小鼠自發(fā)活動的影響

給藥后，觀察1、2組小鼠15 s內大波、中波出現個數明顯少于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。表明臭牡丹乙醇提取物能有效抑制小鼠自發(fā)活動，具有明顯的中樞抑制作用。

表1 臭牡丹乙醇提取物對小鼠自發(fā)活動的影響Tab 1 Effect of ethanol extract of clerodendrum bungei on spontaneous activity in mice (±s)

3.2臭牡丹乙醇提取物對小鼠睡眠時間的影響

(1)給予閾上劑量戊巴比妥鈉時，觀察1、2組小鼠的睡眠持續(xù)時間明顯長于對照組，入睡時間明顯短于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。表明臭牡丹乙醇提取物能加快閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠的入睡時間、延長睡眠時間，具有催眠作用。(2)給予閾下劑量戊巴比妥鈉時，對照組無小鼠入睡，觀察1、2組小鼠入睡數量分別為4、7只，見表2。表明臭牡丹乙醇提取物能增強閾下劑量戊巴比妥鈉的作用，促進小鼠入睡，其與閾下劑量戊巴比妥鈉具有協同作用。

表2 臭牡丹乙醇提取物對小鼠睡眠時間的影響Tab 2 Effect of ethanol extract of clerodendrum bungei on sleep time in mice

4 討論

失眠是一種睡眠障礙性疾病。相關研究資料表明，全球約27%的人存在失眠[18]。長期失眠嚴重影響人們的身心健康、生活質量和工作效率。現有的失眠治療藥物的催眠作用較好，但不良反應較大且易產生依賴性[19]。而中藥對失眠的治療歷史悠久，且療效確切，不良反應少[20]。

本研究結果顯示，0.1、0.2 g/kg的臭牡丹乙醇提取物對小鼠自發(fā)活動具有明顯抑制作用，能明顯減少小鼠自發(fā)活動15 s內大波、中波出現個數，表明臭牡丹乙醇提取物具有鎮(zhèn)靜作用；0.1、0.2 g/kg的臭牡丹乙醇提取物能顯著縮短小鼠閾上劑量和閾下劑量戊巴比妥鈉的入睡時間并顯著延長小鼠的睡眠持續(xù)時間，表明臭牡丹乙醇提取物具有催眠作用，且與戊巴比妥鈉在促進小鼠睡眠方面有協同作用，前者劑量越大，作用越明顯。

綜上所述，臭牡丹乙醇提取物有明顯的鎮(zhèn)靜和催眠作用。

[1]陳思勤，朱克儉，程曉燕，等.臭牡丹化學成分及其藥理作用研究進展[J].湖南中醫(yī)雜志，2012，28(2)：141-142.

[2]劉青，胡海軍，楊穎博，等.臭牡丹根化學成分研究[C]//2013全國中藥與天然藥物高峰論壇暨第十三屆全國中藥和天然藥物學術研討會論文集，2013：81.

[3]周紅林，劉建新，周俐，等.臭牡丹提取物抗炎鎮(zhèn)痛抗過敏作用的實驗研究[J].中國新藥雜志，2006，15(23)：2027-2029.

[4]林娜，魏琴，尹禮國，等.臭牡丹提取物對病原真菌抑菌效果的研究[J].安徽農業(yè)科學，2011，39(17)：10305-10306，10326.

[5]Lin N，Yin LG，Chen CZ，et al.Study on the Antimicrobial Effect of the Extracts of Clerodendron bungei Roots[J].Agricultural Science & Technology，2009,10(5)：130-133.

[6]劉建新，周俐，周青，等.臭牡丹根正丁醇提取物鎮(zhèn)痛作用的研究[J].中國疼痛醫(yī)學雜志，2007，13(6)：349-352.

[7]劉建新，謝水祥，周俐，等.臭牡丹根提取物對小鼠的鎮(zhèn)痛效應[J].中國臨床康復，2005，9(21)：250-251.

[8]鄒曉琴，歐陽娟，黃誠.臭牡丹根提取物對神經病理性痛的鎮(zhèn)痛作用[J].時珍國醫(yī)國藥，2013，24(1)：12-14.

[9]鄒曉琴，劉立，黃誠.臭牡丹對神經病理性痛機械痛敏和脊髓背角谷氨酸的作用[J].贛南醫(yī)學院學報，2014，34(6)：825-828.

[10] 馮紀南，黃海英，余瑞金，等.臭牡丹黃酮類化合物提取及其抗氧化作用[J].光譜實驗室，2013，30(6)：3215-3220.

[11] 陳思勤，朱克儉，李勇敏，等.臭牡丹總黃酮抑制小鼠Lewis肺癌實體瘤及其與p53、bcl-2、bax表達相關性研究[J].世界中醫(yī)藥，2016，11(6)：946-949.

[12] 余娜，馬思靜，朱克儉.臭牡丹總黃酮對A549細胞上皮間質轉化相關蛋白的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學學報，2016，36(5)：10-13.

[13] 胡琦，譚小寧，余娜，等.臭牡丹總黃酮介導Wnt/β-catenin信號轉導誘導人肝癌細胞HepG2的凋亡[J].世界中醫(yī)藥，2016，11(6)：954-957.

[14] 劉天舒，戎寬，譚小寧，等.臭牡丹復方對肺癌大鼠血清中TGF-β1、IL-4、IL-10水平的影響[J].湖南中醫(yī)雜志，2017，33(2)：129-131.

[15] 劉建新，周青，連其深，等.臭牡丹根提取液的局部麻醉作用[J].贛南醫(yī)學院學報，2001，21(4)：366-368.

[16] 劉建新，葉和楊，連其深，等.臭牡丹根提取液的鎮(zhèn)靜和催眠作用[J].贛南醫(yī)學院學報，2001，21(3)：241-243.

[17] 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1991:635-640.

[18] 劉永存，張波.失眠調節(jié)機制中西醫(yī)研究進展[J].按摩與康復醫(yī)學，2012，3(3)：55-56.

[19] 周曉喜.治療失眠的藥物及其研究進展[J].海峽藥學，2011，23(3)：88-90.

[20] 許繼宗，楊建宇，李彥知，等.失眠的中醫(yī)藥治療概況[J].中國中醫(yī)藥現代遠程教育，2011，9(11)：166-167.

EffectofEthanolExtractofClerodendrumBungeiontheSleepFunctionandSpontaneousActivityinMiceΔ

HUANG Weihua1, ZHONG Wenmin2, WANG Desheng2, ZENG Xueliang2, LI Bei2
(1.Dept.of Emergency, Ganzhou Medical Emergency Center, Jiangxi Ganzhou 341000, China; 2.Dept.of Pharmacy, the First Affiliated Hospital of Gannan Medical College, Jiangxi Ganzhou 341000, China)

OBJECTIVE: To probe into the effect of ethanol extract of clerodendrum bungei on the sleep function and spontaneous activity in mice. METHODS: (1) Extraction of clerodendrum bungei. 75% of ethanol was adopted on the dipping of clerodendrum bungei for 48 h, so that the mass concentration of 1.0 g/ml of ethanol extract of clerodendrum bungei was obtained. (2) Spontaneous activity of mice. 30 mice were selected and divided into control group, observation group 1 and observation group 2, with 10 mice in each group. Jiggle-cage test was adopted to detect the spontaneous activity of mice. (3) Sleep function. Above-threshold dose and below-threshold dose of pentobarbital sodium were used to sleep the mice, the effect of ethanol extract of clerodendrum bungei on the sleep time of mice was observed. RESULTS: After medication, the number of high waves and medium waves with 15 s of observation group 1 and observation group 2 were significantly less than those of control group, with statistically significant difference (P<0.05). At the above-threshold dose of pentobarbital sodium, the sleeping duration times of observation group 1 and observation group 2 were significantly longer than those of the control group, and the sleep latencies of the two groups were significantly shorter than that of the control group, with statistically significant differences (P<0.05). At the below-threshold dose of pentobarbital sodium, no mouse in the control group fell asleep, while the number of sleeping mice of observation group 1 and observation group 2 respectively were 4 and 7. CONCLUSIONS: The ethanol extract of clerodendrum bungei can significantly inhibit the spontaneous activity of mice, with sedative and hypnotic effects.

Clerodendrum bungei; Ethanol extract; Sedation and hypnosis; Spontaneous activity; Mice

江西省衛(wèi)生和計劃生育委員會科技計劃項目(No.20167229)

R932

A

1672-2124(2017)10-1313-03

DOI 10.14009/j.issn.1672-2124.2017.10.006

2017-04-27)