吳雪芬，岳增輝，鄭雪娜，郭鑫，謝志強(qiáng)，謝莉娜

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按經(jīng)選穴針刺對(duì)失眠大鼠下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸相關(guān)激素的影響

吳雪芬，岳增輝，鄭雪娜，郭鑫，謝志強(qiáng)，謝莉娜

湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南長(zhǎng)沙 410007

觀察按經(jīng)選穴針刺對(duì)失眠大鼠下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)（HPA）軸相關(guān)激素含量及腧穴配伍效應(yīng)的影響，探討針刺治療失眠癥的作用機(jī)制。腹腔注射對(duì)氯苯丙氨酸混懸液建立失眠模型大鼠。將60只SD大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、百會(huì)＋神門組、百會(huì)＋三陰交組、百會(huì)＋非經(jīng)非穴組，每組12只。各治療組針刺相應(yīng)腧穴，每次30 min，連續(xù)7 d。ELISA檢測(cè)下丘腦促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（CRH）及血清促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）、皮質(zhì)酮（CORT）的含量。與模型組比較，各針刺組大鼠下丘腦CRH及血清ACTH、CORT的含量均有一定程度降低；各針刺組間比較，百會(huì)＋神門組的療效優(yōu)于百會(huì)＋三陰交組及百會(huì)＋非經(jīng)非穴組。針刺可能通過調(diào)節(jié)HPA軸相關(guān)激素水平起到鎮(zhèn)靜安神的作用，按經(jīng)選穴針刺可能是影響腧穴配伍效應(yīng)的影響因素之一。

針刺；失眠；下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸；按經(jīng)選穴；腧穴配伍；大鼠

失眠可導(dǎo)致人或動(dòng)物思維紊亂，常伴有疲勞及不良的情緒變化等癥狀。自1969年國(guó)外學(xué)者提出5-羥色胺（5-HT）致眠學(xué)說后，有研究發(fā)現(xiàn)，下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)（HPA）軸的興奮-抑制狀態(tài)是反應(yīng)睡眠質(zhì)量的重要指標(biāo)，正常情況下，睡眠早期非快眼動(dòng)睡眠（NREM）占優(yōu)勢(shì)，此時(shí)HPA軸分泌活動(dòng)受抑制，而睡眠后期快動(dòng)眼睡眠（REM）占優(yōu)勢(shì)，HPA軸分泌活動(dòng)則活躍[1]。氯苯基丙氨酸（PCPA）失眠模型大鼠在下丘腦5-HT含量降低的同時(shí)伴有HPA軸的功能紊亂，分布于下丘腦的室旁核和藍(lán)斑核的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF），以及血漿促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）是直接反映HPA軸興奮-抑制狀態(tài)的相關(guān)激素[2]，CRF既可以調(diào)控藍(lán)斑核NE系統(tǒng)與背縫核5-HT系統(tǒng)活性，又作用于下丘腦的CRF受體，調(diào)控HPA軸的功能。因此，HPA軸功能紊亂與失眠癥關(guān)系密切[3-4]。有研究表明，針刺治療改善失眠患者睡眠癥狀的療效顯著[5]。臨床上針刺治療失眠癥的選穴方法多樣，正確的腧穴配伍是提高針刺療效的關(guān)鍵因素之一。不同的腧穴配伍方式對(duì)針刺治療失眠的療效有顯著的影響[6]。本研究通過觀察按經(jīng)選穴對(duì)失眠大鼠HPA軸相關(guān)激素含量及腧穴配伍效應(yīng)的影響，探討針刺治療失眠癥的療效機(jī)制，為臨床針灸治療該病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物與分組

SPF級(jí)SD雄性大鼠60只，8～9周齡，體質(zhì)量220～250 g，湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物許可證號(hào)SCXK（湘）2013-0004。正式實(shí)驗(yàn)開始前，大鼠適應(yīng)性分籠飼養(yǎng)1周，每籠5只。飼養(yǎng)于湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心實(shí)驗(yàn)室，溫度23～26 ℃，濕度45%～65%。飼養(yǎng)1周后將大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、百會(huì)＋神門組、百會(huì)＋三陰交組、百會(huì)＋非經(jīng)非穴組，每組12只。

1.2 主要試劑和儀器

PCPA，美國(guó)Sigma公司；戊巴比妥鈉，Ｍerck公司；碳酸氫鈉片，成都市科龍化工試劑廠；氫氧化鈉片，成都市科龍化工試劑廠生產(chǎn)；阿拉伯膠，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所。動(dòng)物型超純水機(jī)，摩爾公司；PHSJ-3F型pH筆，上海精密科學(xué)儀器有限公司；pH精密試紙（pH值5.5～9.0），墊中墊公司；電熱水恒溫杯，Promega公司；臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，湘儀離心機(jī)儀器有限公司；自動(dòng)平衡離心機(jī)，湘儀離心機(jī)儀器有限公司；全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)，匯松科技發(fā)展有限公司；多功能酶標(biāo)分析儀，匯松科技發(fā)展有限公司；恒溫培養(yǎng)箱，Promega公司；0.25 mm×25 mm華佗牌一次性使用無菌針灸針，蘇州醫(yī)療用品廠。

1.3 造模

實(shí)驗(yàn)開始前，先將大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d，自由攝食飲水，保持墊料干燥，7 d后稱重。參照文獻(xiàn)[7]方法造模，除空白組外，其余各組于第8日腹腔注射PCPA混懸液，每日1次，連續(xù)2 d，制造失眠模型大鼠?？瞻捉M腹腔注射等體積弱堿性生理鹽水。成模標(biāo)準(zhǔn)：失眠大鼠出現(xiàn)晝夜節(jié)律缺失、日間與夜晚皆活動(dòng)不斷、對(duì)外界刺激異常敏感、煩躁不安等相關(guān)癥狀。首次注射PCPA 36 h后，觀察模型組大鼠生理狀態(tài)，結(jié)合采用經(jīng)典的戊巴比妥鈉翻正實(shí)驗(yàn)，預(yù)實(shí)驗(yàn)測(cè)得戊巴比妥鈉按體質(zhì)量35 mg/kg為引起100%大鼠睡眠的最小閾劑量，以50 mg/mL濃度溶于生理鹽水后進(jìn)行腹腔注射，提起大鼠尾巴，腹部朝上放在平臺(tái)上，記錄大鼠睡眠潛伏期和睡眠時(shí)間。以大鼠翻正反射消失為睡眠，以大鼠翻正反射恢復(fù)為覺醒，注射戊巴比妥鈉到翻正反射消失之間為潛伏期，翻正反射消失到覺醒為睡眠持續(xù)時(shí)間。觀察空白組和與模型組大鼠睡眠潛伏期及睡眠時(shí)間的差異，進(jìn)行失眠模型評(píng)價(jià)。

1.4 干預(yù)

造模完成后，于第2次注射PCPA的第1日后，開始對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行干預(yù)?？瞻捉M大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，不做任何處理。模型組大鼠予仰臥位束縛于鼠板上，只捆綁，不進(jìn)行針刺，每日1次，每次30 min，連續(xù)7 d，每日捆綁結(jié)束后正常進(jìn)食。各針刺組大鼠選穴參考《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》[8]穴位定位。百會(huì)＋神門組選取“百會(huì)”、雙側(cè)“神門”，百會(huì)＋三陰交組選取“百會(huì)”、雙側(cè)“三陰交”，百會(huì)＋非經(jīng)非穴組選取“百會(huì)”“非經(jīng)非穴點(diǎn)”，非經(jīng)非穴點(diǎn)參照成都中醫(yī)藥大學(xué)制定的選穴方法，此點(diǎn)在非經(jīng)脈循行路線上及非穴位所在部位（位于肘內(nèi)側(cè)，肘尖與腋窩連線中點(diǎn)）。將大鼠仰臥位束縛于鼠板上，定穴后局部剪毛，絡(luò)合碘消毒，采用0.25 mm×25 mm針灸針進(jìn)行針刺。針刺方法：百會(huì)從后向前平刺20 mm，神門直刺1 mm，三陰交直刺5 mm，非經(jīng)非穴點(diǎn)直刺5 mm。留針30 min，每10 min行針1次，行針時(shí)間1 min，行平補(bǔ)平瀉手法，捻轉(zhuǎn)幅度和頻率均采用均等手法，30 min后行針結(jié)束后出針，每日1次。治療后正常進(jìn)食，連續(xù)7 d。

1.5 行為學(xué)觀察

每日觀察大鼠精神狀態(tài)、動(dòng)作靈敏性、反應(yīng)敏捷性、晝夜節(jié)律、毛發(fā)光澤度、體質(zhì)量變化以及活動(dòng)度、飲食量、飲水量等與失眠癥相關(guān)的伴隨癥狀。

1.6 生化指標(biāo)檢測(cè)

末次行為學(xué)檢測(cè)后禁食不禁水12 h，斷頭處死大鼠，取材。取3 mL血液，室溫自然凝固10～20 min，2000～3000 r/min離心20 min，收集上清液，置于-20 ℃冰箱備用；取下丘腦，稱重，加一定量的pH 7.4 PBS，置于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍保持2～8 ℃的溫度，再加一定量的PBS，將標(biāo)本勻漿充分，2000～3000 r/min離心20 min，收集上清液，分裝后1份待檢測(cè)，其余冷凍備用。ELISA分別檢測(cè)血清ACTH、皮質(zhì)酮（CORT）及下丘腦CRH含量，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行檢測(cè)。通過試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行梯度稀釋，獲得不同介質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。在微量滴定板上加樣，空白孔不加，標(biāo)準(zhǔn)品孔加標(biāo)準(zhǔn)品50 μL，加酶50 μL，待測(cè)樣品孔加樣品40 μL，然后各加二抗和酶標(biāo)試劑，蓋上封板膜，輕輕震蕩混勻，37 ℃溫育60 min。將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。小心接掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 s后棄去，重復(fù)5次，拍干。每孔加顯色劑A 50 μL，再加顯色劑B 50 μL，輕輕振蕩混勻，37 ℃避光顯色10 min。每孔加終止液50 μL終止反應(yīng)。以空白調(diào)零，450 nm波長(zhǎng)處依序測(cè)量各孔吸光度（OD）。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值通過回歸方程計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 大鼠死亡情況

實(shí)驗(yàn)過程中共有7只大鼠死亡，其中模型組4只，百會(huì)＋三陰交組1只，百會(huì)＋非經(jīng)非穴組2只。

2.2 戊巴比妥鈉睡眠實(shí)驗(yàn)結(jié)果

空白組造模前后睡眠潛伏期和睡眠時(shí)間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05）；與造模前比較，造模后睡眠潛伏期顯著延長(zhǎng)（＜0.05），睡眠時(shí)間顯著減少（＜0.05），提示造模成功。見圖1、圖2。

注；與空白組比較，#P＜0.05

注：與空白組比較，#P＜0.05

2.3 一般狀況

與空白組比較，模型組大鼠出現(xiàn)晝夜節(jié)律消失，日間活動(dòng)不停，對(duì)外界的聲，光等刺激異常敏感，煩躁不安，興奮性增高，攻擊性增強(qiáng)，毛硬粗糙，毛豎起無光澤，大便色澤灰白，持續(xù)觀察1周，期間體質(zhì)量增加緩慢、飲食量明顯減少、飲水量明顯增多，以上失眠癥伴隨癥狀提示造模成功。

2.4 按經(jīng)選穴針刺對(duì)失眠大鼠下丘腦促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素含量的影響

與空白組比較，模型組大鼠下丘腦CRH含量顯著增加（＜0.01）；與模型組比較，百會(huì)＋神門組、百會(huì)＋三陰交組大鼠下丘腦CRH含量明顯降低（＜0.01），百會(huì)＋非經(jīng)非穴組大鼠下丘腦CRH含量變化不明顯；與百會(huì)＋神門組比較，百會(huì)＋三陰交組大鼠下丘腦CRH含量變化不明顯；與百會(huì)＋三陰交組比較，百會(huì)＋非經(jīng)非穴組大鼠下丘腦CRH含量升高（＜0.05）。見圖3。

注：與空白組比較，▲▲P＜0.01；與模型組比較，▽▽P＜0.01；與百會(huì)＋三陰交組比較，■P＜0.05

2.5 按經(jīng)選穴針刺對(duì)失眠大鼠血清促腎上腺皮質(zhì)激素含量的影響

與空白組比較，模型組大鼠血清ACTH含量明顯升高（＜0.01）；與模型組比較，各針刺組大鼠血清ACTH含量顯著降低（＜0.05，＜0.01）；與百會(huì)＋神門組比較，百會(huì)＋三陰交組、百會(huì)＋非經(jīng)非穴組大鼠血清ACTH含量明顯升高（＜0.01）；與百會(huì)＋三陰交組比較，百會(huì)＋非經(jīng)非穴組大鼠血清ACTH含量變化不明顯。結(jié)果見圖4。

2.6 按經(jīng)選穴針刺對(duì)失眠大鼠血清皮質(zhì)酮含量的影響

與空白組比較，模型組大鼠血清CORT含量顯著升高（＜0.01）；與模型組比較，各針刺組大鼠血清CORT含量顯著降低（＜0.01）；與百會(huì)＋神門組比較，百會(huì)＋三陰交組、百會(huì)＋非經(jīng)非穴組大鼠血清CORT含量明顯升高（＜0.05）；與百會(huì)＋三陰交組比較，百會(huì)＋非經(jīng)非穴組大鼠血清CORT含量明顯升高（＜0.01）。結(jié)果見圖5。

注：與空白組比較，▲▲P＜0.01；與模型組比較，▽P＜0.05，▽▽P＜0.01；與百會(huì)＋神門組比較，◇◇P＜0.01

注：與空白組比較，▲▲P＜0.01；與模型組比較，▽▽P＜0.01；與百會(huì)＋神門組比較，◇P＜0.05；與百會(huì)＋三陰交組比較，■■P＜0.01

3 討論

迄今為止，睡眠發(fā)生的確切機(jī)制尚未完全闡明。目前針灸治療失眠癥療效顯著，在臨床上運(yùn)用越來越廣泛，備受研究者關(guān)注。百會(huì)，系督脈與手足三陽(yáng)經(jīng)之會(huì)穴，具有溫養(yǎng)諸臟、安神健腦、鎮(zhèn)驚熄風(fēng)等作用。早在明代醫(yī)著《針灸大成》就有“思慮勞傷心脾，灸百會(huì)”記載，可見百會(huì)對(duì)失眠癥作用之大。某一臟腑或經(jīng)脈發(fā)生病變時(shí)，遵循“不盛不虛，以經(jīng)取之”的取穴原則，稱為本經(jīng)取穴。心主血脈，又主神明，為君主之官，是五臟六腑之大主，精神之所舍。心藏神，神在人體的生命活動(dòng)中占有重要地位，睡眠作為人體重要的生理功能，也是由心神所主。神門為手少陰經(jīng)之原穴，具有鎮(zhèn)心安神之效，心神得安，則能入眠。三陰交為足太陰脾經(jīng)腧穴，也是足三陰經(jīng)交會(huì)穴，可通過調(diào)三陰經(jīng)經(jīng)氣，使肝、脾、腎功能正常，從而使陰可斂陽(yáng)，陰陽(yáng)調(diào)和，則人可安然入睡。通過對(duì)歷代古籍的研究發(fā)現(xiàn)，古代治療失眠的針灸處方有156個(gè)，其中神門和三陰交是針灸治療失眠最常用的主穴及配穴，且臨床療效顯著[9]。故本實(shí)驗(yàn)將百會(huì)作為固定按部選穴，治療各組再配以不同經(jīng)脈選穴，分別為心經(jīng)之神門和脾經(jīng)之三陰交。神門為失眠癥之本經(jīng)穴，除本經(jīng)外的其他正經(jīng)統(tǒng)稱為他經(jīng)，本實(shí)驗(yàn)之三陰交則為他經(jīng)穴。為說明經(jīng)穴是否具有特異性，故另設(shè)一組“百會(huì)＋非經(jīng)非穴”作為對(duì)照組，使實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)更為合理。

HPA軸功能紊亂是導(dǎo)致應(yīng)激障礙發(fā)生的主要因素之一，是反映機(jī)體應(yīng)激狀態(tài)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)。下丘腦室旁核神經(jīng)元分泌出CRH，CRH刺激神經(jīng)垂體分泌ACTH，ACTH通過體循環(huán)到達(dá)腎上腺，促進(jìn)腎上腺皮質(zhì)釋放CORT。以上3種激素在HPA軸上相互關(guān)聯(lián)、相互影響，在HPA軸上CRH為上游調(diào)控激素，其合成和分泌能明顯影響下游激素的合成和分泌。早在1967年，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)失眠癥患者較正常者CRH的分泌增多[10]。繼而又有研究者發(fā)現(xiàn)，CRH水平與覺醒程度密切相關(guān)，外源性CRH可增加淺睡眠及覺醒，加快腦電波頻率并減少慢波睡眠[11]。故CRH已成為增加睡眠腦電圖頻率從而促進(jìn)覺醒公認(rèn)的因素。單胺類神經(jīng)遞質(zhì)ACTH具有提高大腦皮質(zhì)應(yīng)激性的作用，是睡眠覺醒調(diào)控機(jī)制中的重要環(huán)節(jié)[12]。CORT被稱為“壓力性激素”“應(yīng)激性激素”，是目前公認(rèn)的應(yīng)激反應(yīng)的經(jīng)典指標(biāo)，CORT水平升高影響機(jī)體物質(zhì)吸收及新陳代謝，進(jìn)而出現(xiàn)多夢(mèng)易醒、心悸健忘、神疲食少、肢體倦怠、面色少華等失眠癥狀[13]。

PCPA造成的失眠模型是目前公認(rèn)并廣泛用于研究失眠與相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)、激素及5-HT之間關(guān)系的經(jīng)典動(dòng)物模型。本實(shí)驗(yàn)采用PCPA混懸液造模方法并結(jié)合戊巴比妥鈉睡眠實(shí)驗(yàn)對(duì)模型大鼠進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果提示造模成功。各針刺組大鼠經(jīng)針刺后，下丘腦CRH含量及血清ACTH、CORT含量均有一定程度的降低，顯示出一定改善睡眠的療效，起到安神鎮(zhèn)靜的功能，表明針刺不同腧穴治療失眠癥的療效確切，這與相關(guān)研究結(jié)果一致[14-15]，針刺改善睡眠的機(jī)制可通是過降低HPA軸相關(guān)激素水平實(shí)現(xiàn)的[16-17]。各針刺組間比較，針刺“神門”“三陰交”降低失眠大鼠下丘腦CRH水平的療效相當(dāng)，且二者作用均優(yōu)于“非經(jīng)非穴”，而針刺“神門”降低血清ACTH、CORT含量的作用優(yōu)于三陰交及非經(jīng)非穴，表明針刺“神門”治療失眠癥效果最優(yōu)，針刺“三陰交”療效次之。

綜上所述，不同腧穴配伍方式，療效也不相同，本實(shí)驗(yàn)通過固定取穴“百會(huì)”，再分別配以不同經(jīng)脈腧穴（心經(jīng)、脾經(jīng)）及非經(jīng)非穴，設(shè)計(jì)3個(gè)治療組，對(duì)比本經(jīng)穴、他經(jīng)穴、非經(jīng)非穴的療效差異，按經(jīng)選穴分組明顯。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，神門可作為臨床治療失眠的必要穴位，三陰交可作為符合辨證的首選穴位。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，HPA軸相關(guān)激素水平可能是影響睡眠的機(jī)制之一，按經(jīng)選穴針刺是腧穴配伍效應(yīng)的影響因素之一。

[1] 肖成榮,馬增春,李海靜.PCPA失眠大鼠模型的制作及其機(jī)制[J].毒理學(xué)雜志,2007,21(4)：326.

[2] 全世建,林杏娥,劉妮.PCPA大鼠失眠模型的證候?qū)傩匝芯縖J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2006,24(3)：450-451.

[3] 肖愛嬌,王河寶,劉海云.熱敏灸對(duì)失眠大鼠模型血清內(nèi)分泌激素水平的影響[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2013,25(4)：32-35.

[4] 顧思臻,竇丹波.中醫(yī)中藥對(duì)PCPA失眠大鼠模型HPA軸相關(guān)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及激素影響的研究進(jìn)展[J].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2015,29(1)：83-86.

[5] 劉義,馮慧,劉文娟.針刺對(duì)原發(fā)性失眠癥患者覺醒狀態(tài)調(diào)節(jié)作用及其相關(guān)神經(jīng)電生理學(xué)效應(yīng)研究[J].中國(guó)針灸,2017,37(1)：19-23.

[6] 李萍,岳增輝,謝濤.針灸治療失眠的腧穴配伍研究概述[J].山東中醫(yī)雜志,2015,34(11)：887-889.

[7] 馮浩.熟眠方對(duì)失眠模型大鼠下丘腦內(nèi)5-HT(1a)、DRD2受體mRNA表達(dá)及5-HT、DA含量的影響[D].長(zhǎng)春：長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué),2014.

[8]郭義.實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)[M].4版.北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2016：409-418.

[9] 于心同,何天峰,邴興紅,等.針灸治療失眠臨床用穴頻次分析[J].針灸臨床雜志,2012,28(6)：72.

[10] 王步青,王衛(wèi)東.心率變異性分析方法的研究進(jìn)展[J].北京生物醫(yī)學(xué)工程,2007,26(5)：551-554.

[11] LATTOVA Z, KECKEIS M, MAUROVICH-HORVAT E, et al. The stress hormone system in various sleep disorders[J]. Psychiatric Research, 2011,45(9)：1223-1228.

[12] GERRA G, ZAIMOVIC A, ZAMBELLI U, et al. Neuroendocrine responses to psychological stress in adolescents with anxiety disorder[J]. Neuropsychobilogy,2000,42：82-89.

[13] 張書寧.自擬安神顆粒對(duì)心脾兩虛型失眠癥的臨床研究[D].合肥：安徽中醫(yī)藥大學(xué),2015.

[14] 周艷麗,高希言,王培育.針刺不同腧穴對(duì)失眠大鼠下丘腦γ-氨基丁酸和γ-氨基丁酸A受體的影響[J].針刺研究,2012,37(4)：302-307.

[15] 嚴(yán)興科,張燕,于璐,等.“鎮(zhèn)靜安神”針法對(duì)心脾兩虛型失眠患者匹茲堡睡眠指數(shù)的影響[J].針刺研究,2010,35(3)：222-225.

[16] 吳綺雯.電針神門、三陰交對(duì)心理應(yīng)激失眠大鼠HPA軸功能的影響研究[D].成都：成都中醫(yī)藥大學(xué),2014.

[17] 賈寶輝,李志剛,時(shí)宇靜,等.電針對(duì)慢性應(yīng)激模型大鼠行為學(xué)及HPA軸相關(guān)激素的影響[J].針刺研究,2004,29(4)：252-256.

Effects of Acupuncture Treatment on HPA Axis Related Hormones in Insomnia Rats

WU Xue-fen, YUE Zeng-hui, ZHENG Xue-na, GUO Xin, XIE Zhi-qiang, XIE Li-na

To observe the effects of acupuncture treatment on the levels of HPA axis related hormones and acupoint compatibility in insomnia rats; To discuss the mechanism of action for acupuncture treatment.Chlorophenylalanine suspension was under intraperitoneal injection to establish insomnia model rats. Sixty SD rats were randomly divided into blank group, model group, Baihui+Shenmen group, Baihui+Sanyinjiao group, Baihui+non-acupoint group, with 12 rats in each group. Each treatment group received acupuncture in relevant acupoints, 30 min each time, for 7 d. ELISA was used to measure the levels of CRH, ACTH and CORT.Compared with the model group, the levels of CRH, ACTH and CORT of the acupuncture groups decreased to some extent. In the three acupuncture groups, the efficacy of Baihui+Shenmen group was better than that of Baihui+Sanyinjiao group and Baihui+non-non-acupoint group.Acupuncture treatment may calm and soothe the nerves to release the insomnia through regulating HPA axis related hormones. Acupuncture acupoints at different meridians may be one of the factors that cause the difference of acupoints compatibility effect.

acupuncture; insomnia; HPA axis; acupoints at different meridians; acupoints compatibility; rats

10.3969/j.issn.1005-5304.2017.11.013

R245

A

1005-5304(2017)11-0053-05

（2017-02-20）

（2017-03-08；編輯：華強(qiáng)）

國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃（2014CB543102）；國(guó)家自然科學(xué)基金（81673886）

岳增輝，E-mail：624755064@qq.com