●陳亞武

硝酸酯后處理對心臟缺血再灌注損傷心肌保護的研究

●陳亞武

目的:探討硝酸酯后處理對心臟缺血再灌注損傷心肌保護作用。方法:將80只Wistar大鼠平均分為I/R組、IPostC組、PI-PostC組及假手術組,每組20只。分別測定比較每個小組Wistar大鼠的梗死心肌面積和缺血、細胞凋亡指數和cTnI水平。結果:IPostC組、PI-PostC組和I/R組的cTnI水平明顯高于假手術組（P＜0.05）;PI-PostC組和IPostC組明顯低于I/R組（P＜0.05）;IPostC組和PI-PostC組的缺血面積、細胞凋亡指數、梗死心肌面積明顯小于I/R組（P＜0.05）;PI-PostC組缺血心肌面積明顯小于IPostC組（P＜0.05）,但cTnI水平、細胞凋亡指數和梗死心肌面積無明顯變化（p＞0.05）。結論:對心肌缺血再灌注損傷方面,采用缺血后處理與硝酸鹽藥物后處理有相同的保護作用,使心肌缺血面積明顯的減小。

硝酸酯后處理;心臟缺血;再灌注損傷

隨著社會的發(fā)展,人民生活水平的不斷改善,心血管已經成為各種疾病之首嚴重威脅著人的生命,在心血管疾病治療過程當中,避免心肌缺血再灌注的發(fā)生發(fā)展有重要的臨床價值。臨床研究和對動物的實驗都證明了硝酸酯后處理可以減輕和縮小I/R損傷與梗死面積。但硝酸酯后處理操作的臨床應用限制了其有創(chuàng)性[1]。經過大量的數據顯示,硝酸酯后處理可以有效減輕患者NO調節(jié)心肌保護作用與心肌缺血再灌注損傷有關系。因此,本研究就是在探討心肌缺血再灌注損傷對大鼠硝酸酯模擬缺血后處理的心肌保護。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將80只Wistar大鼠平均分為I/R組、IPostC組、PI-PostC組及假手術組,每組20只。各組Wistar大鼠的一般資料等方面的差異無統計學意義（p＞0.05）。

1.2 方法

Sham組∶LAD不結扎,套管、下穿線,放置215分鐘;I/R組∶將LAD進行結扎45分鐘LAD全面開放后再實施170分鐘灌注;IPostC組∶將LAD結扎45分鐘后,再灌注缺血實施之前,做三個I/R后處理31s/31s的連續(xù)循環(huán)的,之后全部開放LAD進行180分鐘的再灌注;PI-PostC組∶將LAD結扎40分鐘,,按每公斤5毫克劑量的硝酸異山梨酯經右頸總動脈注入5分鐘,然后開始LAD170分鐘的再灌注,同時按每公斤5毫克的劑量持續(xù)注入硝酸異山梨酯20分鐘。

1.3 檢測指標

心肌梗死面積測定∶采取Evan′sblue與TTC雙染法測定[2]。藍色表示心肌組織正常、不缺血;磚紅色表示心肌組織缺血;白色表示心肌組織梗死;cTnI的測定∶結束再灌注后,從右頸動脈采血1毫升,15分鐘離心后進行分離留上清,在冰箱-80℃進行保存,然后檢測血漿cT-nI;測定心肌細胞凋亡∶在光鏡下,藍綠色表示心肌細胞核正常,棕黃色或棕褐色判定為凋亡細胞。

1.4 統計學處理

采用統計軟件SPSS13.0進行統計學處理,（x±s ）表示計量資料,采用單因素方差比較多組間分析,兩組間比較采用t檢驗,P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

各組手術的情況均有明顯變化,且P＜0.05有統計學意義。見表1。

表1 手術各組心肌梗死面積、血及心肌細胞凋亡測定結果（x±s ）

3 討論

多年來,人類一直根據相關的實驗來研究關于治療再灌注損傷。經過本次研究發(fā)現,PI-PostC組和IPostC組的缺血面積、cTnI水平和梗死面積都明顯低于I/R組（P＜0.01）,硝酸鹽藥物后處理組和IPostC組都能夠有效改善心肌缺血再灌注損傷的癥狀,使心肌梗死面積減少。PI-PostC組缺血面積明顯小于IPostC組,但是梗死面積無差異,表明硝酸鹽藥物后處理組與IPostC組對缺血再灌注心肌有相同保護作用,有可能減小缺血面積。Nakamura K等[3]研究顯示,后適應在減少心肌酶釋放的同時,使心肌細胞減輕凋亡。大量研究證實了IPostC可加速合成一氧化氮,并且NOS抑制劑對缺血后處理的心肌保護作用可以抵消,一氧化氮作為觸發(fā)因子,可以依據抑制線粒體通透性開放的轉運孔道,促進線粒體膜電位穩(wěn)定,減少心肌細胞的死亡,在IPostC中起到關鍵的保護作用。所以,經過理論推測,硝酸酯作為NO的供體,進入血液后可以轉化為活性的一氧化氮,與血管平滑肌共同保護心肌的作用。Qian J, Chen H等[4]研究顯示,PI-PostC組和IPostC組的細胞凋亡指數明顯低于I/R組（P＜0.01）。硝酸鹽藥物后處理組及IPostC組都可以降低心肌缺血細胞的死亡,再灌注損傷情況得到有效改善,在PI-PostC組和IPostC組的凋亡指數沒有明顯的差異（P＞0.01）,同相關研究結果相符[5]。

綜上所述,通過本次實驗發(fā)現,IPostC和硝酸鹽藥物后處理可以有效降低細胞的死亡,達到降低cTnI的水平和梗死面積,使缺血再灌注損傷得到徹底的改善,保護心肌。

(作者單位:中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學第一附屬醫(yī)院心臟外科)

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