●唐媛媛

臨床血液檢驗(yàn)中的兩種不同細(xì)菌鑒定法的應(yīng)用

●唐媛媛

目的：探索在臨床血液檢驗(yàn)中兩種不同細(xì)菌鑒定方法的應(yīng)用。方法：隨機(jī)選取我院在2015年2月至2017年2月間就診的480例發(fā)燒合并全身感染的患者血液標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌陽性鑒定，對標(biāo)本同時(shí)使用直接藥敏試驗(yàn)和常規(guī)藥敏試驗(yàn)方法進(jìn)行細(xì)菌檢測，對兩種鑒定方法的藥敏試驗(yàn)結(jié)果與敏感度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：480份血液標(biāo)本中，有412份經(jīng)檢測為陽性，兩種鑒定方法對藥物耐藥性、敏感度及中度敏感的符合率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)符合率較高，是臨床常用的檢測手段，但鑒于直接藥敏試驗(yàn)報(bào)告時(shí)間短，操作簡便，耗材少，結(jié)果準(zhǔn)確，在臨床上更為常用。

血液檢驗(yàn)；細(xì)菌鑒定；直接藥敏試驗(yàn)；常規(guī)試驗(yàn)

自上世紀(jì)初抗生素發(fā)明以來，細(xì)菌感染和致病微生物感染類疾病的發(fā)病率逐年下降。但進(jìn)入二十世紀(jì)后，在我國患者中抗生素使用率高達(dá)70%，隨之而來的抗生素濫用使病菌耐藥性及對抗生素敏感性發(fā)生了變化，因此，細(xì)菌鑒定法的正確選擇有利于疾病的診斷，提高檢驗(yàn)工作者的效率[1]。本文就兩種不同鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

480例發(fā)燒合并全身感染的患者血液樣本進(jìn)行細(xì)菌陽性鑒定，在無菌操作方式下對患者發(fā)熱初期或發(fā)熱高峰期采集血液，每人采集30ml，只采集一次，樣本需冷藏保存，并及時(shí)送到檢驗(yàn)科鑒定。以上患者注意排除其他血液系統(tǒng)疾病；入院前未服用藥物或進(jìn)行過相關(guān)治療；患者凝血功能正常。

1.2 研究方法

把采集到的樣本進(jìn)行直接藥敏試驗(yàn)和常規(guī)藥敏試驗(yàn)，對兩種檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.2.1 常規(guī)藥敏試驗(yàn)

把采集的陽性血液樣本分別接種到巧克力平板、麥康凱平板和血平板上，要求溫度達(dá)到35℃、濃度達(dá)到5%的CO2下孵育20h至24h，然后取出菌落涂片并對其進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，根據(jù)檢測結(jié)果選擇相應(yīng)的酶。用Walk-away4.0系統(tǒng)進(jìn)行藥敏試驗(yàn)與鑒定。

1.2.2 直接藥敏試驗(yàn)

將血液樣本置于Bactec9240系統(tǒng)中自動培養(yǎng)與鑒定，當(dāng)出現(xiàn)陽性結(jié)果后，用無菌注射器抽取10ml樣品，置入無菌試管中，對細(xì)菌進(jìn)行密度梯度離心分離，要求速度為1700r/min，時(shí)間為5min收集上清液，再次以3000r/min，離心15min后去除上清液，用PBS洗滌兩次沉淀，再重懸。取20μl懸液涂片，然后進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，在顯微鏡下倒著放置觀察。若出現(xiàn)鏈狀的革蘭陽性菌選擇MH+6%的羊血的血平板進(jìn)行初次藥敏試驗(yàn)。根據(jù)檢測結(jié)果選擇相應(yīng)的酶，菌落濃度要求控制到6.2×108cfu/L后將其在NC21藥敏綜合板上接種，并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)與鑒定。除真菌外的一般菌種取1至3滴懸液接種到MH平板上，用無菌試紙將其涂抹均勻，將合適的藥敏紙片貼到板上,用2005NCCLSI標(biāo)準(zhǔn)對其耐藥性和敏感性進(jìn)行檢測。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析，定性資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，p＜0.05作為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 兩種檢測方法藥敏試驗(yàn)結(jié)果與敏感度比較

480份血液標(biāo)本中共檢測出412份陽性樣本，G-球菌和G+桿菌的耐藥、敏感、中度敏感符合率分別是97.47%、95.65%、90.48%和94.69%、97.55%、91.19%，組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

3 討論

在臨床上抗生素的使用是十分普遍的，在細(xì)菌感染類疾病得以控制的同時(shí)，抗生素濫用也變得廣泛起來，隨之而來的是細(xì)菌耐藥性和敏感性的變化，給臨床檢驗(yàn)工作帶來新的挑戰(zhàn)，增加了患者疾病確診的等待時(shí)間，甚至錯(cuò)過最佳治療時(shí)間，因此菌種的及時(shí)確定及藥敏試驗(yàn)的快速合理選擇可以說是疾病治愈的關(guān)鍵[2]。

細(xì)菌耐藥性的增加，引起敗血癥、菌血癥等疾病發(fā)生率也不斷增加，血液系統(tǒng)疾病患者病死率逐年上升，快速、有效、合理的檢測細(xì)菌種類成為臨床治愈疾病的關(guān)鍵，近些年來，臨床上應(yīng)用比較廣泛的細(xì)菌鑒定方法主要有鏡檢、常規(guī)檢驗(yàn)、直接藥敏試驗(yàn)、血清學(xué)凝集試驗(yàn)等，藥敏試驗(yàn)原理是不同細(xì)菌對抗菌藥物敏感性不同來確定的[3]。

本研究采用的是直接藥敏試驗(yàn)和常規(guī)藥敏試驗(yàn)對480份血液樣品進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示兩種方法檢測陽性樣本藥敏試驗(yàn)總符合率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），結(jié)果表明直接法能夠替代常規(guī)藥敏試驗(yàn)，而且直接法易操作，時(shí)間短，耗材少，更適合應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)中。

（作者單位：濰坊市第二人民醫(yī)院）

[1]孫捷民.臨床血液檢驗(yàn)中的兩種不同細(xì)菌鑒定法的應(yīng)用[J].山東醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校學(xué)報(bào),2013,35(6):456-458.

[2]李祖新.臨床血液檢驗(yàn)中的兩種不同細(xì)菌鑒定法應(yīng)用分析[J].中外醫(yī)療,2013,32(6):185-186.

[3]楊化芹.臨床血液檢驗(yàn)中的兩種不同細(xì)菌鑒定法應(yīng)用分析[J].中國醫(yī)藥指南,2014(24):108-109.