李霞，孫景芝，李祥廷，金鑫

冠心病患者尿miR-126表達變化

李霞1，孫景芝1，李祥廷1，金鑫1

目的分析冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。ü谛牟。┗颊吣蛭⑿NA-126（miR-126）表達情況及意義。方法選取2015年8月～2016年8月于濟寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院治療的冠心病患者109例，其中男性70例，女性39例，平均年齡（58.12±10.03）歲。其中急性心肌梗死（AMI）35例，不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）40例和穩(wěn)定型心絞痛（SAP）34例。同時選取健康志愿者50例作為對照組。檢測各組總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、C反應(yīng)蛋白（CRP）以及尿miR-126水平等。結(jié)果AMI組、UAP組和SAP組尿miR-126表達明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）；AMI組、UAP組和SAP組Gensini評分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。冠心病患者尿miR-126表達水平與Gensini評分呈負相關(guān)（r=-0.301，P＜0.05），與HDL-C、CRP、TG、TC等無相關(guān)性（P均＞0.05）。結(jié)論冠心病患者尿miR-126表達降低，與冠狀動脈血管病變情況呈負相關(guān)，值得深入研究。

冠心?。晃⑿NA-126；尿液

冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。ü谛牟。┦桥R床上較為常見的心血管疾病，相關(guān)研究顯示急性心肌梗死（AMI）、不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）及穩(wěn)定型心絞痛（SAP）等心血管疾病的發(fā)病率均呈現(xiàn)逐年上升的趨勢[1]。臨床上主要采用冠狀動脈造影評估血管病變程度，但屬有創(chuàng)檢查、重復(fù)性測量難度大。微小RNA-126（miR-126）可通過損傷冠狀動脈內(nèi)皮，促進單核細胞或者巨噬細胞等浸潤，進而加速病情的進展[2-4]。本研究探討了冠心病患者尿液中miR-126的表達情況，分析其與Gensini評分的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對象和分組選取2015年8月～2016年8月于濟寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院治療的冠心病患者109例，其中男性70例，女性39例；年齡42～78歲，平均年齡（58.12±10.03）歲；其中AMI 35例，VAP 40例和SAP 34例。同時選取健康志愿者50例作為對照組。納入標準：①均在我院行冠狀動脈造影術(shù)；②冠心病診斷參照中華醫(yī)學(xué)會制定的標準[5]；③患者及家屬知情同意并簽署同意書。排除標準：合并嚴重肝腎功能衰竭、血液系統(tǒng)疾病、瓣膜性心臟病、惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)疾病等；近1個月內(nèi)有手術(shù)史者。

1.2 方法

1.2.1 生化指標檢測清晨采集空腹靜脈血，-20℃保存待測，檢測高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、C反應(yīng)蛋白（CRP），采用電化學(xué)發(fā)光全自動免疫分析儀（美國雅培i2000）和配套試劑盒（新大陸生物技術(shù)有限公司）檢測，流程參照試劑盒說明書。

1.2.2 miR-126表達檢測采集患者尿液2 ml，以10000 r/min離心，取上清液體，TRIZOL提取總RNA。逆轉(zhuǎn)錄過程：加入逆轉(zhuǎn)錄酶5 μl，上游引物0.5 μM、下游引物0.5 μM。RT-PCR反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性60 s，94℃變性30 s，56℃ 15 s、74℃15 s，連續(xù)反應(yīng)40個循環(huán)，產(chǎn)物擴增長度為134 bp。miR-126正向引物序列：5’-TCGTACC GTGAGTAATAATGCG- 3’，反向引物：5-CGC ATTATTACTCACGGTACGA- 3’。

1.2.3 Gensini評分評價冠狀動脈的狹窄程度使用Gensini評分系統(tǒng)[6]：狹窄＜25%記1分；狹窄25%～50%記為2分；狹窄51%～75%記為4分；狹窄76%～90%記為8分；狹窄91%～99%記為16分；狹窄100%記為32分。1.3 統(tǒng)計學(xué)處理統(tǒng)計分析采用SPSS 19.0軟件，計量資料采用均數(shù)±標準差（±s），多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗；非正態(tài)分布采用M（Q1～Q3）表示，組間比較采用秩和檢驗；計數(shù)資料采用例數(shù)（構(gòu)成比）表示，組間比較采用χ2檢驗。相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組一般資料比較各組性別比例、年齡、TC、LDL-C和CRP比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）；AMI組、UAP組和SAP組TG明顯高于對照組，而HDL-C明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05），表1。

2.2 各組入選者尿miR-126表達及Gensini評分比較AMI組、UAP組和SAP組尿miR-126表達明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）；AMI組、UAP組和SAP組Gensini評分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05），表2。

2.3 相關(guān)性分析結(jié)果冠心病患者尿miR-126表達水平與Gensini評分呈負相關(guān)（r=-0.301，P＜0.05），與HDL-C、CRP、TG、TC等無相關(guān)性（P均＞0.05）。

3 討論

高血壓、高脂血癥及遺傳因素等，均可促進AMI、SAP等發(fā)生發(fā)展，特別在年齡大于45歲的老齡吸煙男性人群中，心肌梗死的發(fā)病率較普通人群升高2～3倍[6]。冠狀動脈造影檢查評估冠狀動脈狹窄的靈敏度或特異度雖然可達85%以上[7,8]，但仍存在漏診或誤診的可能。分析尿液中相關(guān)指標，可為臨床上患者冠狀動脈病變的評估提供輔助參考。micro RNA除了參與腫瘤細胞增殖，還可以誘導(dǎo)冠狀動脈內(nèi)皮細胞凋亡。相關(guān)研究在探討心肌細胞活力與非編碼RNA的關(guān)系時發(fā)現(xiàn)，micro RNA的下降程度與冠狀動脈的舒張功能或順應(yīng)性相關(guān)，提示micro RNA可能參與冠狀動脈病變[9,10]。miR-126可通過增加冠狀動脈內(nèi)皮細胞內(nèi)的鈣離子濃度，促進氧化應(yīng)激損傷，加劇內(nèi)皮下脂質(zhì)的沉積或者粥樣硬化[11,12]。

表1 各組基本資料比較

表2 各組尿miR-126表達及Gensini評分比較

本研究發(fā)現(xiàn)，Gensini評分在各組患者間并無統(tǒng)計學(xué)差異，而miR-126在冠心病患者中表達明顯下降，低于對照組，提示miR-126可能參與了冠心病的發(fā)生發(fā)展過程，考慮可能與下列因素有關(guān)[13,14]： miR-126的高表達，可以通過影響內(nèi)皮細胞內(nèi)的第二信使如三磷酸腺苷或者鈣離子的異常，進而促進相關(guān)炎癥信號通路激活導(dǎo)致冠狀動脈及心肌細胞的凋亡。相關(guān)分析也發(fā)現(xiàn)，miR-126的表達與冠狀動脈狹窄評分具有密切的關(guān)系，miR-126表達越低，患者的冠狀動脈狹窄越為嚴重，提示miR-126可以作為尿液中評估冠心病患者血管病變的重要輔助參考指標。綜上所述，冠心病患者尿miR-126檢測有一定的應(yīng)用價值，與冠狀動脈血管病變情況相關(guān)。

[1] Meade T,Clayton T,Chamberlain D. Distinguishing between those dying suddenly or not suddenly from coronary heart disease: longterm prospective results from the Northwick Park Heart Study[J]. Open Heart,2016,3(2):440-2.

[2] Goglin SE,Farzaneh-Far R,Epel ES,et al. Correction: Change in Leukocyte Telomere Length Predicts Mortality in Patients with Stable Coronary Heart Disease from the Heart and Soul Study[J]. PLOS ONE,2016,11(12):68-70.

[3] 鄭志偉,勞海燕,余細勇,等. 冠心病患者血漿循環(huán)mir-126的表達及其對血管內(nèi)皮細胞的影響[J]. 中國病理生理雜志,2011,27(12):2313-7.

[4] 鄭煒華,吳學(xué)周,張愛鵬. miR-126在冠脈病變中的表達及與血脂相關(guān)性的臨床研究[J]. 中國現(xiàn)代醫(yī)生,2014,24(12):88-9.

[5] 倪飛華,白元,那劍,等. 超高齡冠心病患者危險因素與冠狀動脈病變特點的相關(guān)性[J]. 中華老年多器官疾病雜志,2013,12(6):405-8.

[6] Jeemon P,Harikrishnan S,Sanjay G,et al. A PROgramme of Lifestyle Intervention in Families for Cardiovascular risk reduction (PROLIFIC Study): design and rationale of a family based randomized controlled trial in individuals with family history of premature coronary heart disease[J]. BMC Public Health,2017,17(1):90-3.

[7] 王瑞,張兆琪,郭淼,等. 雙能量CT冠狀動脈成像結(jié)合CT心肌灌注診斷冠心病準確性的初步研究[J]. 中華放射學(xué)雜志,2011,45(2):111-5.

[8] 孫宇姣,俞鑫,耿松,等. 應(yīng)用多排螺旋CT評估冠心病危險因素與冠狀動脈病變程度的關(guān)系[J]. 中華醫(yī)學(xué)雜志,2016,96(39):3133-6.

[9] Hamann L,Glaeser C,Schulz S,et al. A micro RNA-146a polymorphism is associated with coronary restenosis[J]. International Journal of Immu nogenetics,2014,41(5):393-6.

[10] Alexander DD,Miller PE,Van Elswyk ME,et al. A Meta-Analysis of Randomized Controlled Trials and Prospective Cohort Studies of Eicosapentaenoic and Docosahexaenoic Long-Chain Omega-3 Fatty Acids and Coronary Heart Disease Risk[J]. Mayo Clinic Proceedings,2017,92(1):15-29.

[11] 徐卿璐,欒天竹,周立君,等. miR-126在冠心病中的研究進展[J]. 中華臨床醫(yī)師雜志(電子版),2013,25(14):6611-3.

[12] 岑錦明,熊卿圓,陳宇寧,等. miR-126 rs4636297 G＞A基因多態(tài)性與冠心病的相關(guān)性[J]. 中國老年學(xué)雜志,2015,24(13):3554-6.

[13] 吳雪純,賈永平. miR-126在心血管疾病中的研究進展[J]. 中華臨床醫(yī)師雜志(電子版),2016,32(12):1800-3.

[14] 范雪松,王恩世,賀建勛,等. 冠心病患者尿miR-126的表達及其與阿司匹林抵抗的關(guān)系[J]. 臨床檢驗雜志,2016,25(01):35-7.

本文編輯：姚雪莉

年齡≥80歲的老年高血壓患者的臨床結(jié)局

盡管既往有很多老年高血壓患者的隨機臨床試驗，但老年高血壓患者最佳血壓控制目標值仍存爭議。近期一項最新觀察性隊列研究評估了年齡≥80歲的老年高血壓患者治療后血壓水平與臨床結(jié)局的相關(guān)性。

研究入選英國初級保健實踐數(shù)據(jù)庫中79 376例至少處方應(yīng)用1種降壓藥物、3年間至少3次測量血壓、年齡≥80歲的、基線無癡呆癥、癌癥、冠心病、卒中、心力衰竭（HF）及終末期腎功能衰竭的老年高血壓患者，根據(jù)治療后血壓水平對受試者進行分組分析（最低組為＜125 mm Hg，最高組為＞185 mmHg，中間以10 mmHg為增量進行分組）。受試患者平均年齡為82.1歲，女性占69.5%。中位隨訪4.4年發(fā)現(xiàn)，治療后血壓水平與全因死亡率之間呈U型曲線關(guān)系，以處于135～154 mmHg患者的全因死亡率最低。與之相比，治療后血壓水平＜135 mmHg的患者全因死亡率顯著增加（HR=1.25，95%CI：1.19～1.31）；每將13例患者的血壓降至＜135 mmHg可額外發(fā)生1例死亡事件；進一步校正舒張壓及脈壓對上述結(jié)果無明顯影響。

此外，研究發(fā)現(xiàn)，治療后血壓水平＞155 mmHg的患者死亡率終點與治療后血壓水平＜135 mmHg者相似。進一步分析顯示，心肌梗死（MI）風(fēng)險隨治療后血壓水平增加而進行性增加；卒中風(fēng)險在治療后血壓水平＞155 mmHg時增加；HF風(fēng)險在治療后血壓水平＞155 mmHg時逐漸增加，治療后血壓水平＜125 mmHg的患者的HF風(fēng)險也會增加。但是，治療后血壓水平與脆性骨折并無相關(guān)性，無證據(jù)表明血壓增高可增加骨折風(fēng)險。

綜上可見，在年齡≥80歲的老年高血壓患者中，治療后血壓水平＜135 mmHg可增加死亡率，＞155 mmHg可增加死亡、MI、卒中及HF風(fēng)險。這提示，老年高血壓患者的血壓并非降得越低越好。未來，有必要進一步研究確定老年患者的理想降壓目標，并探尋如何根據(jù)治療目標選擇個體化治療方案。

（轉(zhuǎn)自《國際循環(huán)》）

Analysis of the relationship between the expression of miR-126 in urine with the changes of HDL-Cand CRP in coronary heart disease

Li Xia*, Sun Jingzhi, Li Xiangting, Jin Xin.
*Department of Cardiology,Affiliated Hospital of Jining Medical College.

ObjectiveTo investigate the expression and significance of urine miR-126 in patients with coronary heart disease.MethodsFrom August 2015 to August 2016, 109 patients with coronary heart disease were selected, including 35 acute myocardial infarction (AMI) patients, 40 unstable angina pectoris (UAP) patients and 34 stable angina pectoris (SAP) patients. And 50 healthy volunteers were selected as control. The levels of total cholesterol (TC), triacylglycerol (TG), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), C reactive protein (CRP) and urinary miR-126 were measured.ResultsThere was no significant difference in gender, age, TC, LDL- C and CRP (P＞0.05). TG in AMI group, UAP group and SAP group were 1.40 (0.41,2.42) mmol/L, 1.38 (0.39,2.33) mmol/L and 1.42 (0.44,2.50) mmol/L, which was significantly lower than that in the control group (P＜0.05). And HDL-C were (1.56±0.32)mmol/L, (1.52±0.35) mmol/L and (1.50± 0.38) mmol/L in AMI group, UAP group and SAP group, which was significantly higher than that in the control group (P＜0.05). The expression of urine miR-126 in AMI group, UAP group and SAP group were (0.18±0.02),(0.19±0.03) and (0.18±0.04), which was significantly lower than that in the control group (P＜0.05). There was no significant difference in Gensini score between AMI group, UAP group and SAP group (P＞0.05). The expression level of urine miR-126 was negatively correlated with Gensini score (r=-0.301, P＜0.05), and was not related with HDL-C, CRP, TG, TC (P＞0.05).ConclusionUrine miR-126 detected in patients with coronary heart disease has a certain application value, and has no correlation with HDL-C and CRP, which is worth for further study.

Coronary heart disease; miR-126; Urine

Li Xia, E-mail: lxxqd_74@163.com

R541.4 【文獻標志碼】 A 【文獻標志碼】1674-4055(2017)09-1099-03

1272300 濟寧,濟寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心內(nèi)科

李霞,E-mail:lxxqd_74@163.com

10.3969/j.issn.1674-4055.2017.09.22