郭玲　李蓮娣　周淑芬

[摘要] 目的 探討腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在卵巢癌中表達(dá)的臨床意義。 方法 研究收集我院病理科存檔的原發(fā)性卵巢癌標(biāo)本68例為卵巢癌組，另選取同期術(shù)后切除病理確診良性的卵巢組織30例為對(duì)照組，采用EnVision法檢測(cè)MTA1以及VEGF蛋白在卵巢癌和正常卵巢組織中的表達(dá)情況以及兩者的相關(guān)性。結(jié)果 MTA1蛋白在卵巢癌組中表達(dá)的例數(shù)顯著高于對(duì)照組（χ2=16.596，P=0.000），VEGF蛋白在卵巢癌組中表達(dá)的例數(shù)顯著高于對(duì)照組（χ2=11.049，P=0.000）；MTA1的蛋白表達(dá)與患者年齡、腫瘤分級(jí)等因素?zé)o關(guān)（P>0.05），與臨床分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定相關(guān)性（P<0.05）；VEGF的蛋白表達(dá)與患者年齡無(wú)關(guān)（P>0.05），與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分級(jí)等具有一定相關(guān)性（P<0.05）；68例卵巢癌患者中的MTA1和VEGF蛋白共同表達(dá)陽(yáng)性者30例，二者呈正相關(guān)（r=0.406，P<0.05）。 結(jié)論 MTA1和VEGF蛋白表達(dá)在卵巢癌的發(fā)展中均有一定的作用，二者呈協(xié)同作用，若二者水平提高則是患者預(yù)后較差的標(biāo)志。

[關(guān)鍵詞] 腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；卵巢癌；蛋白；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

[中圖分類號(hào)] R737.31 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2017）24-0008-03

[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of the expression of tumor metastasis-associated gene 1 and vascular endothelial growth factor in ovarian cancer. Methods 68 cases of primary ovarian cancer specimens which were archived in the department of pathology in our hospital were collected as ovarian cancer group. 30 cases benign ovarian tissues with pathological diagnosis after resection during the same period were selected as the control group. The expression of MTA1 and VEGF protein in ovarian cancer and normal ovarian tissues were detected by EnVision method and the correlation between them was detected. Results The case number of MTA1 protein expressed in ovarian cancer group was significantly higher than that in the control group（χ2=16.596，P=0.000）. The case number of VEGF protein expressed in ovarian cancer group was significantly higher than that in the control group（χ2=11.049，P=0.000）； the expression of MTA1 protein was not correlated with age， tumor grade and other factors（P>0.05）， and had a certain relationship with clinical grade and lymph node metastasis（P<0.05）； the expression of VEGF protein was not correlated with the age of the patients（P>0.05）， and it was correlated with clinical stage， lymph node metastasis and tumor grade（P<0.05）； among 68 cases of ovarian cancer patients， there were 30 patients with co-expressed MTA1 and VEGF protein， and the two were positively correlated（r=0.406，P<0.05）. Conclusion The expression of MTA1 and VEGF protein plays an important role in the development of ovarian cancer. The two have synergistic effect. If the levels of the two protein are increased， it indicates that the patients have poor prognosis.

[Key words] Tumor metastasis-associated gene 1；Vascular endothelial growth factor；Ovarian cancer；Protein；Lymphatic metastasis

相關(guān)資料顯示[1，2]：卵巢癌是女性生殖器官常見(jiàn)的惡性疾病，發(fā)病率位于第三位，僅低于宮頸癌和子宮體癌。腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1（MTA1）在胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌等惡性腫瘤疾病中一般均呈現(xiàn)高表達(dá)[3]，并且與惡性疾病的發(fā)展進(jìn)程呈相關(guān)性[4]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）在腫瘤進(jìn)展中具有重要作用[5]。本研究收集我院病理科存檔的原發(fā)性卵巢癌標(biāo)本68例，與良性卵巢組織比較，探討MTA1以及VEGF蛋白在卵巢癌和正常卵巢組織中的表達(dá)情況?，F(xiàn)報(bào)道如下。endprint

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究收集2013年1月～2016年1月間我院病理科68例原發(fā)卵巢癌標(biāo)本作為卵巢癌組，對(duì)入組標(biāo)本重新切片，漿液性乳頭狀囊腺癌41例，黏液性囊腺癌12例，子宮內(nèi)膜樣癌15例。病理分級(jí)為G1 22例，G2共27例，G3共19例，研究另選取同期在我院手術(shù)切除病理確診為正常卵巢組織患者標(biāo)本共30例作為對(duì)照組。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫委會(huì)審批通過(guò)，同意進(jìn)行本研究。

1.2 方法

應(yīng)用Santa Cruz公司生產(chǎn)的MTA1多克隆抗體以及VEGF單克隆抗體，顯色試劑應(yīng)用北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的二氨基聯(lián)苯胺，MTA1為濃縮液，需要按1∶150的比例進(jìn)行稀釋。應(yīng)用免疫自制化學(xué)EnVision兩步染色法，操作規(guī)程要求嚴(yán)格按照試劑使用說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行，選取陽(yáng)性切片（已知）作為對(duì)照組進(jìn)行分析，研究中選擇磷酸鹽緩沖液代替一抗，作為陰性研究結(jié)果的對(duì)照分析標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 觀察指標(biāo)和結(jié)果判定

觀察標(biāo)準(zhǔn)[6-7]：①觀察MTA1和VEGF蛋白的表達(dá)情況；②觀察二者表達(dá)與臨床因素的關(guān)系；③觀察卵巢癌組織中MTA1和VEGF蛋白的關(guān)系。

結(jié)果判定[8]：MTA1蛋白陽(yáng)性，棕黃色顆粒顯色；VEGF陽(yáng)性，棕黃色顆粒顯色。高倍鏡400×，隨機(jī)選取5個(gè)有效觀察視野，觀察標(biāo)準(zhǔn)：100細(xì)胞/視野，陽(yáng)性細(xì)胞的百分比以觀察到的細(xì)胞數(shù)平均值表示，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)若小于10%，則判定為0分；若在10%～50%之間，判定為1分；若在51%～75%之間，判定為2分；若大于75%，則判定為3分。染色強(qiáng)度包括0、弱、中、強(qiáng)4分等級(jí)，分別對(duì)應(yīng)0、1、2、3分。兩者乘積結(jié)果≥4分則為陽(yáng)性，若<4分，結(jié)果判定為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié)果錄入 SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，MTA1、CXCR4的蛋白在卵巢癌和卵巢正常組織中的表達(dá)情況及表達(dá)情況和臨床因素等計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，MTA1、CXCR4 蛋白在卵巢癌中的表達(dá)關(guān)系，采用Pearson進(jìn)行相關(guān)性分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MTA1和VEGF蛋白在兩組中的陽(yáng)性表達(dá)情況

MTA1蛋白在卵巢癌組中表達(dá)的例數(shù)顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=16.596，P=0.000）；VEGF蛋白在卵巢癌組中表達(dá)的例數(shù)顯著高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=11.049，P=0.000）。見(jiàn)表1。

2.2 MTA1和VEGF蛋白的表達(dá)與臨床因素的關(guān)系

MTA1的蛋白表達(dá)與患者年齡、腫瘤分級(jí)等因素?zé)o關(guān)（P>0.05），與臨床分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定的相關(guān)性（P<0.05）；VEGF蛋白表達(dá)與患者年齡無(wú)關(guān)（P>0.05），與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分級(jí)等具有一定相關(guān)性（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3卵巢癌組織中MTA1和VEGF蛋白的關(guān)系

68例卵巢癌患者中，MTA1和VEGF蛋白同時(shí)為陽(yáng)性表達(dá)者共30例，相關(guān)性分析結(jié)果顯示，二者呈正相關(guān)（r=0.406，P<0.05）。見(jiàn)表3。

3 討論

相關(guān)研究表示[9]：腫瘤在生長(zhǎng)過(guò)程中，會(huì)有很多新生血管生成，進(jìn)而出現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移，引起患者病情惡化。MAT1則是腫瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)基因，屬于MTA中的一種，MTA1在多種腫瘤均存在異常表達(dá)[10]。在非小細(xì)胞癌中[11]，有研究提示MTA1與非小細(xì)胞癌病情發(fā)展不具有相關(guān)性。在子宮內(nèi)膜癌中[12]，MTA1升高提示患者預(yù)后不良。在宮頸癌中，MTA1一般會(huì)呈現(xiàn)高表達(dá)，使MTA1基因沉默可以顯示出一只宮頸癌細(xì)胞的惡性發(fā)展，表明了在婦科腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，MTA1發(fā)揮著極為重要的作用。在口腔鱗癌中，MTA1呈現(xiàn)高表達(dá)，但表明其是癌細(xì)胞出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移的重要方式與轉(zhuǎn)移途徑，可以作為標(biāo)記因子來(lái)預(yù)測(cè)淋巴轉(zhuǎn)移[13]。VEGF蛋白通過(guò)與血管內(nèi)皮細(xì)胞上受體相互結(jié)合，誘導(dǎo)新生血管形成[14]。史惠蓉等[15]發(fā)現(xiàn)，VEGF蛋白表達(dá)可以評(píng)價(jià)腫瘤的預(yù)后，還可以結(jié)合CA125等預(yù)測(cè)早期卵巢癌。相關(guān)學(xué)者認(rèn)為[16]，應(yīng)用卵巢癌細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞侵襲遷移能力研究結(jié)果表明，VEGF蛋白能夠促進(jìn)卵巢癌的供血血管生成，并且具有促進(jìn)卵巢癌遷延轉(zhuǎn)移能力。

本研究結(jié)果可以看出MTA1蛋白表達(dá)和患者年齡、腫瘤分級(jí)等因素?zé)o關(guān)（P>0.05），與臨床分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定的關(guān)系（P<0.05），表明了MTA1蛋白表達(dá)參與了腫瘤組織的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，其與腫瘤的預(yù)后相關(guān)，同時(shí)也是預(yù)測(cè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的重要臨床標(biāo)記物。結(jié)果中顯示了VEGF蛋白表達(dá)與患者年齡無(wú)關(guān)（P>0.05），與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分級(jí)等具有一定相關(guān)性（P<0.05），提示了卵巢癌的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程，VEGF蛋白與正常組織相比，顯著增高，所以在腫瘤組織中的表達(dá)情況，與腫瘤附近淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分級(jí)等情況密切相關(guān)，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者VEGF蛋白呈陽(yáng)性表達(dá)，同時(shí)也表明了由于腫瘤內(nèi)部的新生血管的出現(xiàn)，VEGF蛋白水平呈升高趨勢(shì)，進(jìn)而VEGF蛋白水平可以作為預(yù)測(cè)腫瘤的重要因子。表3顯示了MTA1和VEGF蛋白共同表達(dá)陽(yáng)共30例，二者呈正相關(guān)（r=0.406，P<0.05），提示了兩者的表達(dá)存在著一定的協(xié)同作用，和卵巢癌的發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移等存在著一定的關(guān)聯(lián)，可以有效的預(yù)測(cè)評(píng)估卵巢癌患者預(yù)后。本研究中，由于入組患者中沒(méi)有考慮發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者，因此，本研究尚不能得出MTA1蛋白表達(dá)與卵巢癌發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。

綜上所述，MTA1和VEGF蛋白表達(dá)在卵巢癌的發(fā)展中均有一定的作用，二者呈協(xié)同作用，若二者水平提高則是患者預(yù)后較差的標(biāo)志。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 左志英.腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義[J].山西醫(yī)藥雜志， 2014，（22）：2631-2633.endprint

[2] 符婕，陳慧娟，欒瑩，等. 血漿miR相關(guān)指標(biāo)及Th1Th2類細(xì)胞因子與卵巢癌的關(guān)系研究[J]. 實(shí)用癌癥雜志，2017，32（5）：742-744.

[3] 李慧，湯小晗，盧美松. 肝素結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子與卵巢癌順鉑化療耐藥性關(guān)系的研究[J]. 中國(guó)計(jì)劃生育和婦產(chǎn)科，2016，8（12）：15-20.

[4] 張國(guó)建，秦曉寧，閻慶輝，等.腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因-1和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C在胃癌中的相關(guān)性[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2014，31（3）：203-205.

[5] 俞銘潔，吳雯婷，倪婷婷，等. 聚乙二醇化重組人粒細(xì)胞集落刺激因子用于卵巢癌及宮頸癌化療的價(jià)值[J]. 浙江醫(yī)學(xué)，2017，39（4）：307-309.

[6] 柏秀玉，丁朝霞，姚玉霜，等. 結(jié)締組織生長(zhǎng)因子在卵巢癌中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 中國(guó)腫瘤生物治療雜志，2016，23（1）：102-105.

[7] 韓宇寧，劉佳，蘆維圓，等. 細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1基因甲基化在卵巢癌中的研究進(jìn)展[J]. 醫(yī)學(xué)綜述，2017，23（8）：1538-1542.

[8] 陳蘭，袁超燕，李素萍，等. 上皮性卵巢癌組織中核受體共激活因子蛋白表達(dá)水平及其與孕激素受體表達(dá)的相關(guān)性研究[J]. 中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2016，32（18）：1673-1676.

[9] 姚月榮. 神經(jīng)生長(zhǎng)因子及其受體在卵巢癌中表達(dá)[J]. 泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2016，37（2）：152-154.

[10] 郭蓮娣，王丹，楊帆，等. DNA損傷修復(fù)因子WDR70的生物學(xué)功能及其在人卵巢癌中的突變研究[J]. 四川大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2016，47（4）：501-506.

[11] 李紅梅，張美羨，張寧春，等. NK、CIK、γδT細(xì)胞免疫治療對(duì)卵巢癌復(fù)發(fā)患者腫瘤相關(guān)因子及免疫功能的影響[J]. 中國(guó)實(shí)用醫(yī)刊，2016，43（12）：114-115.

[12] 郭宏艷，何利珍，張?jiān)砌?，? 結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1及其在腫瘤中的作用[J]. 國(guó)際腫瘤學(xué)雜志，2016，43（1）：32-35.

[13] 游顏杰，劉佳佳，苑藝，等. 卵巢癌組織中肺癌抑癌基因1基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)及其臨床意義[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志，2016，36（13）：3200-3201.

[14] 張文竹， 魏振彤. 癌超甲基化基因1蛋白和卵巢癌基因1蛋白在卵巢癌組織中的表達(dá)及意義研究[J]. 重慶醫(yī)學(xué)，2017，46（11）：1466-1468.

[15] 史惠蓉，宋文杰，陳志敏，等.內(nèi)皮抑素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在卵巢癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J].癌癥，2015，24（9）：1127-1131.

[16] 王得旭，于景翠. 卵巢癌基因1在人類惡性腫瘤中的研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2017，25（5）：823-827.

（收稿日期：2017-05-25）endprint