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山東省部分地區(qū)奶牛場(chǎng)布魯氏菌病血清學(xué)調(diào)查

2017-10-12 05:05程子龍王方昆劉思當(dāng)
中國動(dòng)物檢疫 2017年10期
關(guān)鍵詞:奶牛場(chǎng)布病布魯氏菌

劉 朋,陳 萌,程子龍,王方昆,劉思當(dāng)

(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,山東泰安 271000)

山東省部分地區(qū)奶牛場(chǎng)布魯氏菌病血清學(xué)調(diào)查

劉 朋,陳 萌,程子龍,王方昆,劉思當(dāng)

(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,山東泰安 271000)

2016年5—12月,從山東省泰安市、棗莊市、菏澤市和青島市等地區(qū)6個(gè)奶牛場(chǎng)的成母牛群中,隨機(jī)采集血清1 736份,分別用虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBPT)、試管凝集試驗(yàn)(SAT)和間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)平行檢測(cè)布魯氏菌病血清抗體。結(jié)果顯示:該6個(gè)奶牛群的布魯氏菌病抗體總陽性率為11.12%;3種方法的陽性檢出率各不相同,其中RBPT的陽性檢出率為12.73%,SAT為11.12%,ELISA為11.75%;5個(gè)免疫牛場(chǎng)的布魯氏菌病血清抗體檢測(cè)均呈陽性,并且不同地區(qū)奶牛場(chǎng)之間的抗體陽性率差異較大,最高的為40.00%,最低的為8.93%;1個(gè)非免疫牛場(chǎng)的布魯氏菌病血清抗體檢測(cè)結(jié)果為陰性。檢測(cè)結(jié)果提示:鑒于當(dāng)前嚴(yán)重的布魯氏菌病疫情形勢(shì),山東省的布魯氏菌病防控壓力加大;任何一種檢測(cè)方法都有局限性,3種方法聯(lián)合應(yīng)用可有效降低出現(xiàn)假陽性和假陰性的概率;上述檢測(cè)方法均無法區(qū)分免疫和感染,因此免疫給布魯氏菌病的檢測(cè)凈化帶來了極大困難。

布魯氏菌?。换⒓t平板凝集試驗(yàn);試管凝集試驗(yàn);間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn);血清學(xué)調(diào)查

Abstract:1 736 serum samples were collected from six dairy farms in Tai′an City,Zaozhuang City,Heze City and Qingdao City from May to December,2016. The Brucellosis antibodies were detected by RBPT,SAT and ELISA. The results showed that the total positive rate of 6 dairy herds in Shandong Province was 11.12%,and the positive detection rates of the three methods were not identical. The positive rates of RBPT,SAT and ELISA were 12.73%,11.12% and 11.75%,respectively. The detection of Brucella serum antibody in 5 immunized cattle farms were positive,and the antibody positive rates in different dairy farms were significantly different. The highest prevalence of one farm was 40.00%,while the lowest was 8.93%. Results of brucellosis detection from a non-immunized cattle farm was negative. The results showed that in view of the current serious epidemic situation,prevention and control of Brucellosis in Shandong Province was austere.There were some limitations in any detection method,and the joint application of the 3 methods could effectively reduce the probability of false positive and false negative. The detection methods were unable to distinguish between immunity and infection,therefore the immunity of Brucellosis has brought great difficult to purification.

Key words:Brucellosis;RBPT;SAT;ELISA;epidemiological investigations

布魯氏菌?。ㄒ韵潞?jiǎn)稱布病)是由布魯氏菌引起的一種人獸共患傳染病。在2003年公布的《一、二、三類動(dòng)物疫病病種名錄》中,我國將其列為二類動(dòng)物疫病[1]。牛、羊、豬、鹿等多種動(dòng)物對(duì)其易感。人感染后嚴(yán)重影響生殖健康和生活質(zhì)量,甚至喪失勞動(dòng)能力[2],因此該病的防控具有重要的公共衛(wèi)生意義。近年來,畜間及人間布病有回升趨勢(shì)。為了解當(dāng)前山東省奶牛場(chǎng)的布病流行情況,從4個(gè)地區(qū)的6個(gè)規(guī)?;膛?chǎng),采集1 736份成母牛血清,采用虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBPT)、試管凝集試驗(yàn)(SAT)、間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行檢測(cè),為布病防控提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 檢測(cè)材料

1.1 血清來源及背景

待檢血清從山東省4個(gè)地區(qū)6個(gè)規(guī)?;膛?chǎng)的成母牛群中采集,其中5個(gè)牛場(chǎng)的成母牛均免疫過布魯氏菌A19疫苗(表1)。

表1 6個(gè)規(guī)模化奶牛場(chǎng)的成母牛群血清樣品信息

1.2 檢測(cè)試劑

布病虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原、試管凝集試驗(yàn)抗原、試管凝集試驗(yàn)陰陽性血清均購自中國疾病預(yù)防控制中心;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),使用IDEXX牛布魯氏菌抗體檢測(cè)試劑盒。

2 檢測(cè)方法

布病抗體檢測(cè)(虎紅平板凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)),按照國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T18646—2002)操作[3];酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),按照ELISA試劑盒說明書操作。

3 檢測(cè)結(jié)果

對(duì)1 736份血清進(jìn)行布病抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示:奶牛群的布病抗體總陽性率為11.12%;各奶牛場(chǎng)的檢出陽性率差異較大,其中青島奶牛場(chǎng)檢出的陽性率最高。3種檢測(cè)方法中,RBPT檢出的陽性最多,陽性檢出率為12.73%;ELISA次之,陽性檢出率為11.75%;SAT最少,陽性檢出率為11.12%(表2、表3)。

表2 6個(gè)規(guī)模化奶牛場(chǎng)的布病抗體檢測(cè)結(jié)果

表3 3種布病抗體檢測(cè)方法的結(jié)果匯總

4 分析與討論

本次調(diào)查結(jié)果顯示,山東省6個(gè)奶牛場(chǎng)的布病抗體總陽性率為11.12%。這與2014年岳瑞超等[1]從山東省濟(jì)南市、青島市兩處奶牛場(chǎng)的抽樣檢測(cè)結(jié)果(10.05%)相比偏高。原因可能是山東省屬于我國布病管理的一類地區(qū),對(duì)奶畜原則上不免疫,而調(diào)查的這6家奶牛場(chǎng)中有5家進(jìn)行過免疫,導(dǎo)致抗體陽性率偏高。

近年來,我國奶牛交易量逐漸增加,布病陽性率呈上升趨勢(shì)。2009—2011年周繼章等[4]調(diào)查全國部分?。▍^(qū))動(dòng)物布病流行情況,發(fā)現(xiàn)奶牛布病陽性率為7.5%;2011—2013年王基隆等[5]調(diào)查布病的總陽性率為18.58%;2014年韋明等[6]調(diào)查布病的總陽性率為22.51%。以上數(shù)據(jù)說明,全國部分?。▍^(qū))的布病發(fā)病率在逐年上升,流行情況比較嚴(yán)重。若在奶牛交易過程中未進(jìn)行嚴(yán)格檢疫,再加上消毒不嚴(yán),感染牛很容易將細(xì)菌帶入牛場(chǎng),由此加大了布病感染與傳播的風(fēng)險(xiǎn)。雖然未實(shí)施免疫奶牛場(chǎng)的布病抗體為陰性,但鑒于國內(nèi)布病的疫情形勢(shì)以及奶牛流通的加快,山東省的布病防控壓力在逐步加大。

本次檢測(cè)結(jié)果顯示,山東省不同地區(qū)奶牛場(chǎng)之間的布病抗體陽性率差異較大。這可能與疫苗免疫時(shí)間的長(zhǎng)短有關(guān)。理論上講,A19疫苗免疫6個(gè)月后,大部分奶牛血清中的布病抗體效價(jià)應(yīng)由陽性變?yōu)殛幮裕瑐€(gè)別奶牛由于個(gè)體差異可能不產(chǎn)生抗體或者抗體陽性持續(xù)數(shù)間長(zhǎng),甚至長(zhǎng)達(dá)2年。青島奶牛場(chǎng)僅免疫2個(gè)月,因此抗體陽性率高;泰安1場(chǎng)和3場(chǎng)分別已免疫6個(gè)月或7個(gè)月,抗體水平下降,但陽性率仍受疫苗產(chǎn)生的抗體干擾;雖然菏澤奶牛場(chǎng)和棗莊奶牛場(chǎng)已分別免疫1年和2年,理論上疫苗產(chǎn)生的抗體效價(jià)應(yīng)該轉(zhuǎn)陰,但由于個(gè)體差異,個(gè)別奶??贵w效價(jià)仍是陽性。

目前,我國官方規(guī)定的布病檢測(cè)方法為,先通過RBPT篩查,再以SAT對(duì)陽性樣品進(jìn)行確認(rèn)。RBPT操作簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉、敏感性高,但特異性低,適合用于樣品初篩。雖然目前的血清學(xué)檢測(cè)方法較多,但沒有任何一種血清學(xué)方法適合于所有個(gè)體或群體的流行病學(xué)調(diào)查。特別是在對(duì)個(gè)體進(jìn)行篩查時(shí),所有的方法都有局限性。血清學(xué)檢測(cè)方法的敏感性和特異性會(huì)因檢測(cè)樣本量的不同而有所不同[7],因此3種方法聯(lián)合應(yīng)用,能有效降低出現(xiàn)假陽性和假陰性的概率。上述檢測(cè)方法均無法區(qū)分免疫和感染,因此免疫給布病的檢測(cè)凈化帶來了極大困難。

[1] 岳瑞超,程子龍,李寧,等. 山東牛場(chǎng)常見傳染病血清流行病學(xué)調(diào)查[J]. 中國動(dòng)物檢疫,2014,31(6):58-61.

[2] 范偉興,狄棟棟,黃保續(xù). 發(fā)達(dá)國家根除家畜布病的主要措施[J]. 中國動(dòng)物檢疫,2013,30(4):68-70.

[3] 姚火春. 獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2003:46-49.

[4] 周繼章,宮曉煒,曹小安,等. 2009-2010 年我國部分?。▍^(qū))動(dòng)物布魯氏菌病流行情況調(diào)查[C]// 中國科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì). 中國科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)第3屆全國人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集. 北京:中國科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì),2011:3.

[5] 王基隆,張亮,韓猛,等. 規(guī)?;膛pB(yǎng)殖場(chǎng)布魯氏菌病血清學(xué)調(diào)查[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào),2014(17):35-38.

[6] 韋明. 規(guī)?;翀?chǎng)布魯氏菌病血清學(xué)調(diào)查與iELISA檢測(cè)方法的建立[D]. 西寧:寧夏大學(xué),2016.

[7] GODFROID J,SAEGERMAN C,WELLEMANS V,et al.How to substantiate eradication of bovine rucellosis when aspecific serological reactions occur in the course of brucellosis testing[J]. Vet. Microbiol,2002,90:461-477.

(責(zé)任編輯:朱迪國)

Serological Investigation on Brucellosis in Some Dairy Farms of Shandong Province

Liu Peng,Chen Meng,Cheng Zilong,Wang Fangkun,Liu Sidang
(College of Animal Science and Technology,Shandong Agriculture University,Tai′an,Shandong 271000)

S854.43

A

1005-944X(2017)10-0001-03

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.10.001

山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系資助(SDAIT-09-04)

劉思當(dāng)

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