種 焱，張兆平，馬樹寶，孫 博，金 錚，李 享，宋洪揚

（1.北京出入境檢驗檢疫局，北京 100026；2.北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，北京 100107；3.中關(guān)村聯(lián)合創(chuàng)新（北京）生物科技有限公司，北京 102206）

進口SPF鼠調(diào)整隔離期檢疫風險分析

種 焱1，張兆平1，馬樹寶1，孫 博1，金 錚1，李 享2，宋洪揚3

（1.北京出入境檢驗檢疫局，北京 100026；2.北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，北京 100107；3.中關(guān)村聯(lián)合創(chuàng)新（北京）生物科技有限公司，北京 102206）

目的探討縮短隔離期的可行性，以促進SPF鼠盡早用于科研。方法重點分析了境外環(huán)節(jié)SPF小鼠/大鼠的飼養(yǎng)設(shè)施、飼養(yǎng)管理、衛(wèi)生控制、病原檢測、官方監(jiān)管及運輸條件，研究了SPF鼠進境后的運輸車輛、隔離設(shè)施、地方監(jiān)管要求及歷年進口發(fā)生問題的幾率，比較了11個國家進口SPF鼠的隔離檢疫政策。結(jié)果進口SPF鼠傳入相關(guān)疫病的風險低、進境后暴露發(fā)生疫病的風險低，相關(guān)國家官方不進行強制隔離檢疫。結(jié)論考慮到我國目前對活動物的隔離檢疫政策和生命科學(xué)領(lǐng)域特殊需求，綜合《進境動物檢疫疫病名錄》相關(guān)鼠病和國標《實驗動物微生物學(xué)等級及監(jiān)測》相關(guān)檢測要求，建議在符合相應(yīng)要求的條件下，調(diào)整進境SPF鼠隔離期為14天。

檢疫監(jiān)管；風險評估；SPF鼠；隔離期

Abstract：[Objective] In order to explore the possibility of shortening the quarantine period of imported SPF mice/rats，so as to apply them to scientific research as soon as possible. [Methods] Firstly，feeding facility and other factors including feeding and management，health control，pathogens monitoring，supervision and administration by officials and transportation conditions for SPF mice/rats before entry were analyzed emphatically，and the transport vehicle，quarantine facility，local regulatory requirement，and the probability of risk occurrence in the past years after entry of the mice/rats were studied. Meanwhile，the quarantine policies for importing SPF mice/rats were compared among 11 countries. [Results] There is a low risk for pathogen introduction by the importation of SPF mice/rats and for the occurrence of disease outbreak after their entry，and relevant national authorities do not carry out compulsory isolation. [Conclusion] Given the current quarantine policy on live animals in China，the special needs in the field of life sciences，the related rat diseases in the List of Quarantine Diseases for the Animals Imported to the People′s Republic of China and the relevant testing requirements in National Standards（GB）“Laboratory Animals-Microbiology Grades and Monitoring”，the quarantine period of imported SPF mice/rats was proposed to be adjusted to 14 days under the condition of meeting corresponding requirements.

Key words：quarantine and supervision；risk assessment；SPF mice/rats；quarantine period

SPF鼠是生命科學(xué)研究、醫(yī)療技術(shù)發(fā)展的重要支撐條件，具有不可替代性。為促進SPF鼠資源的引進，支持生命科學(xué)、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)和食品安全領(lǐng)域創(chuàng)新，加快生物產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，呼應(yīng)科研單位提出縮短隔離期的實際需求，北京出入境檢驗檢疫局征求業(yè)界意見建議，聯(lián)合相關(guān)SPF鼠進出口企業(yè)，查閱相關(guān)資料，以需求量最大的小鼠和大鼠作為研究對象，完成了進口SPF鼠調(diào)整隔離期風險分析報告。

1 基本情況

1.1 SPF鼠定義及應(yīng)用范圍

SPF級實驗鼠是指經(jīng)人工培育，遺傳背景明確，不攜帶規(guī)定的人獸共患病病原/寄生蟲、動物烈性傳染病病原/寄生蟲、對動物危害大和對科學(xué)研究干擾大的病原/寄生蟲，主要潛在感染或條件致病和對科學(xué)實驗潛在干擾的特定病原體和寄生蟲，用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定及其他科學(xué)實驗的實驗鼠。其主要包括小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和沙鼠等，特點是來源可追溯、應(yīng)用范圍廣、監(jiān)控要求嚴。

目前，世界上實驗鼠品系已超過1 000個，通過基因工程獲得的特定基因的實驗鼠品系已超過10 000個。隨著生物產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，科研院所和大專院校對SPF實驗鼠的需求日益增長。由于我國對SPF實驗鼠研究起步較晚，要培養(yǎng)一種可以穩(wěn)定遺傳的特定實驗?zāi)Ｐ褪笮杌ㄙM較長時間，越來越多的科研工作者選擇從海外進口相關(guān)實驗?zāi)Ｐ褪蟆?/p>

1.2 北京口岸進境SPF鼠概況

近年來，隨著生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的蓬勃發(fā)展，北京口岸進境SPF鼠數(shù)量增幅顯著，2011年進口150批（4 258只）SPF鼠，2016年已增至397批（1 8647只），批次和數(shù)量分別增長了165%、338%。從進口種類看，2014—2016年北京進境SPF小鼠占98%，SPF大鼠占2%（表1）。

表1 2014—2016年北京口岸進口SPF鼠數(shù)據(jù)表

SPF鼠來自美國、日本、德國等21個國家和地區(qū)。美國為主要來源國，占比79.45%；其次為日本，占比7.61%。美國、日本、德國、澳大利亞、丹麥和英國占進口總批次的94.7%（圖1）。

1.3 調(diào)整SPF鼠隔離期的背景和原因

自2014年以來，北京出入境檢驗檢疫局在中關(guān)村實施了7項進境動植物生物材料先行先試改革政策。其措施之一是SPF鼠入境后，須在指定隔離設(shè)施隔離檢疫30天。在隔離檢疫期間，如確因科研工作急需，在確保安全的前提下，經(jīng)批準，可邊隔離邊開展科學(xué)實驗。該改革舉措極大地加快了科研產(chǎn)出速度，也提高了檢驗檢疫把關(guān)效率。

圖1 北京口岸進口SPF鼠來源國家/地區(qū)占比

為支持國家生物產(chǎn)業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略，服務(wù)北京全國科技創(chuàng)新中心建設(shè)，北京出入境檢驗檢疫局征求了多家科研院所、大專院校的意見建議，其中反映SPF鼠需求量的超過1/3，研究者認為在生命科學(xué)領(lǐng)域要參與國際競爭，時間是科研的核心競爭力之一，因此建議將進境SPF鼠30天隔離期進一步縮短。

1.3.1客觀條件不足限制了邊隔離邊實驗的實施

一是因為科研單位自有隔離場的數(shù)量有限、操作空間不足或隔離室內(nèi)無法安裝必需設(shè)備，不能滿足隔離期間開展實驗需求；二是第三方隔離場不允許其他單位人員進入隔離設(shè)施。

1.3.2隔離期特殊實驗需求

一是某些鼠模型的性狀在固定周齡表達。引進的小鼠多是基因缺陷鼠或疾病模型鼠，一些品系小鼠在隔離檢疫期就發(fā)生了嚴重病變，而研究者并不能在第一時間觀察或記錄小鼠的各項指標變化；二是實驗周齡與隔離期重疊。一般進口SPF小鼠周齡在4周齡，有些實驗只能在特定的鼠齡（如6～8周齡）開展，而這段時間恰好處在隔離期而導(dǎo)致錯過了實驗的最佳時期，影響到實驗的完整性、準確性。

2 風險評估

本文通過定性分析主要出口國SPF鼠的飼養(yǎng)設(shè)施、飼養(yǎng)管理、疫病監(jiān)測、運輸控制，國內(nèi)階段的運輸車輛要求、隔離設(shè)施、主管部門監(jiān)管要求、歷年不合格情況分析，以及11個進口國對SPF鼠進口隔離政策比較，評估縮短隔離期的可能性。

2.1 傳入評估

2.1.1國外SPF鼠飼養(yǎng)設(shè)施及管理要求。美國、加拿大和歐盟對實驗鼠設(shè)施采取認可管理模式，不需官方許可。境外SPF鼠從出生到出口前一直飼養(yǎng)在屏障環(huán)境的獨立送風系統(tǒng)（IVC）或隔離包中，所有進入SPF鼠設(shè)施的人員、實驗鼠、籠具、飼料、墊料、飲水都有嚴格的控制和要求，實現(xiàn)了與外界的物理隔絕。人流、物流、氣流單向流動，進入的全部飼料和墊料都要經(jīng)過輻照消毒和高溫消毒，飲水過濾后再進行高溫消毒，環(huán)境設(shè)施及時進行消毒處理。所有員工的個人防護設(shè)備均為一次性使用，所有設(shè)施會被定期檢查有效性，嚴格的隔離設(shè)施切斷了疫病傳播途徑。

2.1.2主要出口國對SPF鼠疫病監(jiān)測要求。SPF級實驗鼠主要生產(chǎn)國，官方不對SPF鼠病原監(jiān)測提出強制規(guī)定，不同國家企業(yè)對病原的監(jiān)測要求不盡一致。歐盟推薦監(jiān)測病原53種，美國推薦監(jiān)測病原41種，日本推薦監(jiān)測病原30種。雖然監(jiān)測項目存在差異，但在實驗用鼠健康監(jiān)測項目、頻率、方法等方面均遵循歐洲實驗動物科學(xué)協(xié)會聯(lián)合會（FELASA）的指南，均包括了致病性病原體，只是根據(jù)研究目的不同而采取差異化的監(jiān)測項目，避免相關(guān)病原對特異性實驗的干擾。科學(xué)的健康監(jiān)測方案包括：人獸共患病病原、引起本動物的烈性傳染病病原、可能干擾實驗的其它病原、實驗設(shè)施或本地區(qū)的病原（表2、表3）。

以進口批次高達98%的SPF小鼠病毒監(jiān)測項目為例，美國、日本、歐盟的病毒監(jiān)測方案均高于我國標準。進口SPF大鼠監(jiān)測方案也是同樣結(jié)論。其中，列入我國進口動物檢疫疫病名錄的4種嚙齒動物病毒病（LCMV、ECT、MHV、SV）均納入了監(jiān)控范圍。

2.1.3《中國進境動物檢疫疫病名錄》中相關(guān)嚙齒動物疫病未納入監(jiān)測范圍的原因?！吨袊M境動物檢疫疫病名錄》中相關(guān)嚙齒動物疫病包括：鼠痘、鼠仙臺病毒感染癥、淋巴細胞性脈絡(luò)叢腦膜炎、小鼠肝炎、弓形蟲病、鉤端螺旋體病、土拉桿菌病、克里米亞剛果出血熱。除后3種病外，其余均列入了鼠設(shè)施健康監(jiān)測方案。由于土拉桿菌病、克里米亞剛果出血熱只感染野生嚙齒動物，而鉤端螺旋體病通過接觸、尿液或污染水感染。SPF鼠飼養(yǎng)在屏障環(huán)境而非開放環(huán)境，實施嚴格的生物安全管理措施，這種飼養(yǎng)環(huán)境切斷了這3種病的感染途徑，杜絕了感染的可能性，因此未納入監(jiān)測范圍。

2.1.4出口國獸醫(yī)部門對SPF鼠的官方監(jiān)管措施。根據(jù)USDA網(wǎng)站信息，實驗鼠未納入美國農(nóng)業(yè)部監(jiān)管范圍。只是當進口國需要1份健康證明時，APHIS會出具本國認可的動物衛(wèi)生證書。多數(shù)實驗鼠出口國官方獸醫(yī)部門不對實驗鼠進行管理，而通過動物倫理委員會、動物使用委員會等行業(yè)組織進行管理。

表2 國內(nèi)外SPF實驗小鼠病毒監(jiān)測項目表[1]

表3 國內(nèi)外SPF實驗大鼠病毒監(jiān)測項目表[1]

2.1.5運輸籠具。進口SPF鼠用特制的運輸箱/轉(zhuǎn)運盒運輸，材質(zhì)為厚紙板箱或者半透明塑料箱，符合《GB 14925—2010 實驗動物環(huán)境及設(shè)施》對運輸籠具堅固、安全、舒適、防漏的要求，籠蓋和四周均有通風透氣的紗窗。運輸過程中排除了病原體感染的可能性。

通過分析SPF鼠的飼養(yǎng)設(shè)施、飼養(yǎng)管理、衛(wèi)生控制、病原監(jiān)測、運輸條件，證明進口SPF鼠傳入相關(guān)疫病的風險低。多數(shù)官方獸醫(yī)機構(gòu)不對SPF鼠進行管理，這也充分說明了SPF鼠的安全性。

2.2 暴露評估

2.2.1運輸車輛。SPF運輸車為封閉空調(diào)車，溫度保持在22～25℃，運輸前后車輛均經(jīng)消毒處理。

2.2.2北京地區(qū)SPF鼠隔離設(shè)施。目前，北京地區(qū)SPF鼠隔離設(shè)施有8家，均滿足《進境動物隔離檢疫場使用監(jiān)督管理辦法》中規(guī)定的《GB 14925—2010 實驗動物環(huán)境及設(shè)施》中的相關(guān)要求。

2.2.3主管部門監(jiān)管要求。我國對實驗動物管理的法規(guī)和標準比較完善。與動物檢疫相關(guān)的規(guī)定及部分標準包括：①國家科學(xué)技術(shù)委員會令第2號令《實驗動物管理條例》；②《實驗動物環(huán)境及設(shè)施》（GB14925—2010）；③《實驗動物機構(gòu)質(zhì)量和能力的通用要求》（GB/T27416—2014）；④《實驗動物 微生物等級及監(jiān)測》（GB14922.2—2011）；⑤《實驗動物 寄生蟲學(xué)等級及監(jiān)測》（GB14922.1—2001）；⑥《實驗動物 哺乳類實驗動物的遺傳質(zhì)量控制》（GB14923—2010）；⑦《實驗動物 配合飼料營養(yǎng)成分》（GB14923.3—2010）。

北京市設(shè)有實驗動物管理辦公室，對實驗動物生產(chǎn)、使用及人員資質(zhì)均有明確要求，從事實驗動物相關(guān)活動要獲得《實驗動物生產(chǎn)許可證》《實驗動物從業(yè)人員上崗證》。供貨時應(yīng)提供實驗動物質(zhì)量合格證書及最新健康檢測報告。

2.2.4進口SPF鼠極少發(fā)生不合格情況。過去的6年，北京口岸進口SPF鼠1 640批次，合計57 345只。在口岸現(xiàn)場檢查發(fā)現(xiàn)因運輸籠破損造成鼠逃逸1次，發(fā)現(xiàn)運輸籠空氣濾膜破損2次，發(fā)現(xiàn)糖尿病模型鼠等體弱動物因環(huán)境溫度過高死亡10余次，隔離期間存在因運輸應(yīng)激、特殊疾病模型動物自然發(fā)病或雄性鼠打斗導(dǎo)致的個別死亡現(xiàn)象，未見其它異常報告。即使發(fā)生疫病風險，在固定場所也易于控制和撲殺。根據(jù)美國Charles River公司的統(tǒng)計數(shù)據(jù)，全球范圍內(nèi)實驗小鼠主要存在諾如病毒、細小病毒、冠狀病毒、A型輪狀病毒、微小RNA病毒等，上述病毒均非我國進口關(guān)注的對象，其它病毒在實驗小鼠中非常罕見。通過分析SPF鼠進境后的運輸車輛、隔離設(shè)施、地方監(jiān)管要求、歷年進口發(fā)生問題的幾率、固定場所飼養(yǎng)發(fā)生風險的管控有效性，證明進境后發(fā)生接觸感染的風險為低。

2.3 部分進口國家對SPF鼠進口檢疫管理措施

比較11個國家進口SPF鼠的隔離檢疫政策，其中10個國家不對進境SPF鼠進行隔離檢疫，只有澳大利亞在特定條件下才進行隔離檢疫。特別是既是SPF鼠出口大國也是進口國的美國、日本、歐洲相關(guān)國家對進境SPF鼠的不隔離政策，說明SPF鼠行業(yè)本身的管控措施不會對健康、環(huán)境造成危害（表4）。

表4 部分進口國家對SPF鼠進口檢疫的管理措施

3 結(jié)論

通過重點分析境外環(huán)節(jié)SPF小鼠和SPF大鼠的飼養(yǎng)設(shè)施、飼養(yǎng)管理、衛(wèi)生控制、病原監(jiān)測、官方監(jiān)管、運輸條件，研究SPF鼠進境后的運輸車輛、隔離設(shè)施、地方監(jiān)管要求、歷年進口發(fā)生問題的幾率，同時比較11個國家進口SPF鼠的隔離檢疫政策，得出如下結(jié)論：一是進口SPF小鼠和大鼠傳入相關(guān)疫病的風險低；二是進境后接觸發(fā)生的風險低；三是美國、日本、歐洲相關(guān)國家對進境SPF鼠不實施官方強制隔離措施。

考慮到我國目前對活動物的隔離檢疫政策和生命科學(xué)領(lǐng)域需求，綜合《進境動物檢疫疫病名錄》相關(guān)鼠病和國標《實驗動物 微生物學(xué)等級及監(jiān)測》相關(guān)檢測要求，特提出如下檢疫措施：

一是進口時，境外供貨方提供出口前3個月內(nèi)的動物健康監(jiān)測報告，證明SPF級小鼠的淋巴細胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、鼠痘病毒、仙臺病毒、小鼠肝炎病毒和漢坦病毒檢測均為陰性，SPF級大鼠的仙臺病毒和漢坦病毒檢測為陰性，可允許對進口的SPF級小鼠或大鼠隔離檢疫14天。凡無出口前3個月內(nèi)健康監(jiān)測報告的、監(jiān)測項目不滿足上述要求的、進口除小鼠、大鼠之外其它種SPF鼠的，則維持30天隔離期規(guī)定。

二是進口SPF級小鼠或大鼠隔離監(jiān)管期間，凡違反《進境動物隔離檢疫場使用監(jiān)督管理辦法》中禁止性條款規(guī)定的，自發(fā)現(xiàn)之日起3個月內(nèi)進口小鼠或大鼠按照30天實施隔離檢疫，期間無不合格情形的，恢復(fù)至14天隔離期規(guī)定。

三是進口時口岸發(fā)現(xiàn)運輸箱破損、過濾膜破損或鼠逃逸等現(xiàn)象時，整箱SPF鼠做撲殺、銷毀處理。

[1]佟巍.關(guān)于實驗動物國家標準病毒檢測項目思考[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2016，26（2）：42-47.

（責任編輯：孫榮釗）

Risk Analysis on Adjustment of Quarantine Period for Imported SPF Mice/Rats

Chong Yan1，Zhang Zhaoping1，Ma Shubao1，Sun Bo1，Jin Zheng1，Li Xiang2，Song Hongyang3
（1.Beijing Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Beijing 100026；2. Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co.，Ltd. Beijing 100107；3. iBio Center（Beijing ZGC Integrated Biotech Limited），Beijing 102206）

S851.3

A

1005-944X（2017）10-0010-05

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.10.004

馬樹寶