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褪黑素對局灶性腦缺血大鼠擴(kuò)散加權(quán)成像及腦組織中Fas、FasL、活性Caspase-3蛋白表達(dá)的影響

2017-09-15 09:52王海宇陳嵐芬王曉莉閆少珍牟青杰趙巖松
關(guān)鍵詞:陽性細(xì)胞濰坊腦缺血

王海宇,陳嵐芬,王曉莉,2*,閆少珍,牟青杰,趙巖松

(1.濰坊醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)影像學(xué)系,山東 濰坊 261053;2.濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院影像中心,4.眼科,山東 濰坊 261031;3.濰坊醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院血液科,山東 濰坊 261053)

褪黑素對局灶性腦缺血大鼠擴(kuò)散加權(quán)成像及腦組織中Fas、FasL、活性Caspase-3蛋白表達(dá)的影響

王海宇1,陳嵐芬1,王曉莉1,2*,閆少珍1,牟青杰3,趙巖松4

(1.濰坊醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)影像學(xué)系,山東 濰坊 261053;2.濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院影像中心,4.眼科,山東 濰坊 261031;3.濰坊醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院血液科,山東 濰坊 261053)

目的基于大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)模型,探討褪黑素(MT)對局灶性腦缺血大鼠腦DWI及腦組織中Fas、FasL、活性Caspase-3蛋白表達(dá)的影響。方法將80只SD大鼠隨機(jī)分為Sham組(n=16)、MCAO組(n=32)及MT組 (n=32)。MCAO組及MT組建立大鼠MCAO模型后,于腦缺血再灌注(IR)前后30 min,分別腹腔注射生理鹽水與MT;Sham組進(jìn)行假手術(shù)操作,腹腔注射生理鹽水。對各組大鼠進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分,于MCAO組及MT組中選取評(píng)分為1~3分者納入研究。分別于假手術(shù)或IR后6 h、24 h、72 h、7天,行大鼠腦DWI掃描,計(jì)算相對DWI信號(hào)強(qiáng)度(rDWI-SI);并于每一時(shí)間點(diǎn)各組隨機(jī)選取大鼠進(jìn)行Fas、FasL及活性Caspase-3免疫組化染色觀察,并比較各組Fas、FasL、活性Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)(個(gè)/mm2)。結(jié)果最終Sham組16只、MCAO組29只、MT組30只大鼠納入研究。3組間大鼠行為學(xué)評(píng)分差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=50.125,P<0.01),MT組及MCAO組行為學(xué)評(píng)分均高于Sham組(P均<0.01),MT組行為學(xué)評(píng)分低于MCAO組(P<0.01)。IR后6 h、24 h、72 h、7天,MCAO組及MT組rDWI-SI值均高于Sham組假手術(shù)后相應(yīng)時(shí)間rDWI-SI值(P均<0.01);IR后6 h、24 h、72 h,MCAO組rDWI-SI值均高于MT組(P均<0.05);IR后7天MT組與MCAO組間rDWI-SI值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。IR后6 h、24 h、72 h,MT組及MCAO組Fas、FasL染色及活性Caspase-3染色陽性細(xì)胞數(shù)均較Sham組增多(P均<0.01),MT組較MCAO組減少(P<0.05);IR后7天,3組間陽性細(xì)胞數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論在大鼠局灶性腦缺血損傷模型中,MT可有效減低rDWI-SI值,并可抑制Fas、FasL、活性Caspase-3蛋白表達(dá)。

擴(kuò)散磁共振成像;腦缺血;褪黑素

腦缺血后恢復(fù)血液灌注,對腦組織會(huì)造成更嚴(yán)重的損傷,即缺血再灌注(ischemia reperfusion, IR)損傷。局灶性腦缺血損傷的形成與神經(jīng)細(xì)胞凋亡密切相關(guān)[1]。通過DWI在活體組織內(nèi)檢測水分子彌散運(yùn)動(dòng),可早期、準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)腦缺血性病灶。褪黑素(N-acetyl-5-methoxytryptamine, MT)是一種廣譜抗氧化劑和有效的自由基清除劑,可通過抗氧化、抗凋亡、抗炎等多種途徑起到神經(jīng)保護(hù)作用[2]。本課題組前期研究[3]發(fā)現(xiàn)利用DWI技術(shù)可反映MT對腦缺血后神經(jīng)保護(hù)作用,但其減輕細(xì)胞凋亡、促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)的機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn)于建立大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型前后注射MT,對大鼠做行為學(xué)評(píng)分,并通過DWI技術(shù)觀察腦組織信號(hào),分析DWI信號(hào)變化情況,進(jìn)一步結(jié)合免疫組織化學(xué)染色探討MT對局灶性腦缺血細(xì)胞凋亡的影響。

1 材料與方法

1.1大鼠MCAO模型建立及分組 成年雄性SD大鼠80只購自濟(jì)南實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,并由其授權(quán)使用[批號(hào)SCXK(魯2015-0001)],體質(zhì)量280~320 g,平均(296.37± 9.48)g。采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為3組,于腹腔注射10%水合氯醛(劑量3.5 ml/kg體質(zhì)量)麻醉后分別對各組進(jìn)行不同操作。對MCAO組32只大鼠采用Longa等的方法[4]并結(jié)合本課題組前期實(shí)驗(yàn)[3,5-6]的經(jīng)驗(yàn)建立MCAO模型,于IR前后30 min分別腹腔注射生理鹽水(劑量5 ml/kg體質(zhì)量);對MT組32只大鼠建立MCAO模型,于IR前后30 min分別腹腔注射MT(劑量5 ml/kg體質(zhì)量);對Sham組16只大鼠分離右側(cè)頸總動(dòng)脈后縫合,手術(shù)前后30 min分別腹腔注射生理鹽水(劑量為5 ml/kg體質(zhì)量)。

1.2行為學(xué)評(píng)價(jià) 待大鼠麻醉清醒,采用Longa等[4]的方法對3組大鼠進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分并記錄神經(jīng)功能缺失癥狀:0分,無行為學(xué)異常改變;1分,梗死對側(cè)前肢屈曲呈抱拳樣;2分,梗死對側(cè)肢體肌力及側(cè)推力減弱;3分,行走時(shí)向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈或傾倒;4分,意識(shí)障礙、癱瘓或死亡。將MCAO組及MT組中評(píng)分為1~3分者納入研究。

1.3MR檢查 各組大鼠均于假手術(shù)或IR后6 h、24 h、72 h、7天行腦冠狀位DWI掃描,采用GE Signa Excite HDXT 3.0T MR掃描儀,腹腔注射10%水合氯醛(劑量3.5 ml/kg體質(zhì)量)進(jìn)行麻醉后,將大鼠俯臥位放置于腕關(guān)節(jié)線圈內(nèi)。DWI掃描參數(shù):b=0、1 000 s/mm2,TR 2 400 ms,TE 94.5 ms,NEX 3,矩陣160×160,層厚3 mm,層間距0.2 mm。

利用GE AW 4.2工作站及Functool圖像后處理軟件進(jìn)行圖像分析,選擇腦缺血損傷最大層面,于患側(cè)病灶中心和對側(cè)鏡像區(qū)分別放置3個(gè)面積為2 mm2的ROI,測量病變側(cè)及對側(cè)鏡像區(qū)DWI信號(hào)強(qiáng)度(diffusion weighted imaging signal intensity, DWI-SI)值并計(jì)算其平均值。而后計(jì)算相對DWI信號(hào)強(qiáng)度(relative diffusion weighted imaging signal intensity, rDWI-SI),即病變側(cè)與對側(cè)鏡像區(qū)DWI-SI的比值。

1.4Fas、FasL、活性Caspase-3免疫組化染色觀察 分別于假手術(shù)或IR后6 h、24 h、72 h、7天進(jìn)行組織學(xué)觀察。Sham組各時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取4只大鼠;MCAO組術(shù)后6 h隨機(jī)選取8只大鼠,24 h、72 h、7天各隨機(jī)選取7只大鼠;MT組6 h、24 h隨機(jī)選取8只大鼠, 72 h、7天隨機(jī)選取7只大鼠。腹腔注射10%水合氯醛(劑量3.5 ml/kg體質(zhì)量)麻醉后,采用生理鹽水及4%多聚甲醛進(jìn)行心臟灌注,斷頭取腦后以4%多聚甲醛固定,將大鼠腦組織包埋并制成5 μm切片。進(jìn)行Fas、FasL及Caspase-3免疫組化染色后,觀察染色情況并于高倍鏡(×400)下隨機(jī)選取梗死灶5個(gè)視野,利用CellSens Dimension 1.6軟件測量圖片面積,計(jì)算Fas、FasL、活性Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)(個(gè)/mm2),取平均值。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件,計(jì)量資料以±s表示。大鼠行為學(xué)評(píng)分比較采用Kruskal-WallisH秩和檢驗(yàn);rDWI-SI值及免疫組化陽性細(xì)胞數(shù)的比較采用單因素方差分析,方差齊時(shí)組間兩兩比較采用LSD法,方差不齊時(shí)采用Tamhane's法。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1行為學(xué)評(píng)分 麻醉清醒后,Sham組16只大鼠行為學(xué)評(píng)分均為0分,神經(jīng)功能正常;MCAO組3只、MT組2只大鼠評(píng)分為4分,不納入實(shí)驗(yàn);最終Sham組16只、MCAO組29只、MT組30只大鼠納入研究。3組大鼠行為學(xué)評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=50.125,P<0.01);Sham組大鼠評(píng)分保持穩(wěn)定,無神經(jīng)功能缺失癥狀;MCAO組和MT組大鼠行為學(xué)評(píng)分均明顯高于Sham組(P均<0.01),MT組行為學(xué)評(píng)分低于MCAO組(P<0.01),見圖1。

2.2DWI分析 Sham組DWI未見異常信號(hào)。MCAO組及MT組患側(cè)大腦皮質(zhì)及紋狀體DWI呈明顯高信號(hào)(圖2A);IR后6~72 h,MT組異常信號(hào)范圍較MCAO組減小(圖2B)。IR后6 h、24 h、72 h,MCAO組及MT組rDWI-SI值均隨時(shí)間延長呈升高趨勢,于72 h達(dá)到峰值,而后逐漸減低。MCAO組及MT組IR后6 h、24 h、72 h、7天rDWI-SI值均高于Sham組假手術(shù)后相應(yīng)時(shí)間rDWI-SI值(P均<0.01);IR后6 h、24 h、72 h,MCAO組rDWI-SI值均高于MT組(P均<0.05);IR后7天,MT組與MCAO組間rDWI-SI值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

圖1 各組大鼠行為學(xué)評(píng)分比較 (與Sham組比較,*:P<0.01;#:與MCAO組比較,P<0.01)

2.3免疫組化

2.3.1Fas、FasL染色 Sham組腦皮質(zhì)細(xì)胞排列整齊、走行規(guī)律,F(xiàn)as、FasL標(biāo)記細(xì)胞較少,間隙無水腫。IR后6~72 h,MT組及MCAO組皮質(zhì)細(xì)胞皺縮變形,F(xiàn)as、FasL陽性細(xì)胞增多,排列紊亂,組織間隙水腫較重,陽性細(xì)胞與Sham組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)。MT組皮質(zhì)細(xì)胞排列較規(guī)律,周圍水腫輕,陽性細(xì)胞數(shù)較MCAO組減少(P均<0.05)。IR后7天,3組間陽性細(xì)胞數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2、3,圖3、4。

表1 各組大鼠IR后不同時(shí)間點(diǎn)rDWI-SI值比較(±s)

表1 各組大鼠IR后不同時(shí)間點(diǎn)rDWI-SI值比較(±s)

組別6h24h72h7天MCAO組(n=29)1.67±0.17*2.08±0.19*2.50±0.19*1.45±0.05*MT組(n=30)1.39±0.20*#1.74±0.26*#2.14±0.26*#1.30±0.12*Sham組(n=16)1.09±0.141.08±0.131.10±0.131.10±0.18F值23.55658.951120.4219.882P值<0.05<0.05<0.05<0.05

注:*:與Sham組比較,P<0.01;#:與MCAO組比較,P<0.05

2.3.2活性Caspase-3染色 Sham組海馬CA1區(qū)細(xì)胞排列整齊、緊密,僅見少數(shù)活性Caspase-3細(xì)胞。IR后6 h,MT組及MCAO組CA1區(qū)細(xì)胞皺縮變形,間隙增寬,活性Caspase-3細(xì)胞增多;IR后24、72 h陽性細(xì)胞數(shù)進(jìn)一步增多,細(xì)胞形態(tài)更加不規(guī)則,水腫進(jìn)一步加重,部分細(xì)胞呈空泡樣改變。MCAO組及MT組IR后6、24、72 h陽性細(xì)胞數(shù)均較Sham組假手術(shù)后相應(yīng)時(shí)間增多,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05);但MT組細(xì)胞排列較為規(guī)律,周圍水腫較輕,活性Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)較MCAO組減少(P均<0.05)。IR后7天,3組間陽性細(xì)胞數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4、圖5。

3 討論

目前認(rèn)為局灶性腦缺血損傷涉及細(xì)胞凋亡、自由基損傷、氧化應(yīng)激、Ca+超載、炎癥等多種因素,各因素相互作用,構(gòu)成復(fù)雜的級(jí)聯(lián)損傷反應(yīng),加重神經(jīng)功能損傷[1]。急性應(yīng)激狀態(tài)時(shí)機(jī)體MT濃度降低、功能紊亂,MT對局灶性腦缺血損傷中具有神經(jīng)保護(hù)作用[7]。本實(shí)驗(yàn)采用DWI技術(shù)觀察MT對局灶性腦缺血大鼠的影響,結(jié)合行為學(xué)評(píng)分、Fas、FasL、活性Caspase-3免疫組織化學(xué)染色,探討MT治療局灶性腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制。

行為學(xué)評(píng)分是對MCAO模型重要且極易獲得的參考指標(biāo),可用于評(píng)價(jià)神經(jīng)功能損傷及修復(fù)情況。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,MT組和MCAO組行為學(xué)評(píng)分均不同程度增高,但MT組行為學(xué)評(píng)分低于MCAO組,提示MT組神經(jīng)功能恢復(fù)更快,MT治療可起到神經(jīng)保護(hù)的作用。DWI技術(shù)已在缺血性腦卒中的早期發(fā)現(xiàn)及早期診斷中得到廣泛應(yīng)用,可準(zhǔn)確評(píng)估機(jī)體水分子的彌散運(yùn)動(dòng)。rDWI-SI值可用以判斷急性腦缺血損傷且具有較大潛力[8]。本研究發(fā)現(xiàn),MT組及MCAO組rDWI-SI值明顯升高,于IR后72 h達(dá)到峰值,此后逐漸減低,這可能由于缺血早期,腦血流量降低,細(xì)胞缺血缺氧,細(xì)胞外水分子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞毒性水腫導(dǎo)致DWI-SI升高,而隨著缺血再灌注時(shí)間進(jìn)一步延長,血腦屏障進(jìn)一步破壞,細(xì)胞外間隙水分子彌散強(qiáng)度降低,此時(shí)DWI-SI值有所下降。此外,本研究中MT組rDWI-SI值低于MCAO組,提示MT可減輕局灶性腦缺血異常水分子彌散運(yùn)動(dòng),抑制缺血損傷反應(yīng)。

表2 各組大鼠IR后不同時(shí)間點(diǎn)Fas陽性細(xì)胞數(shù)比較(個(gè)/mm2,±s)

表2 各組大鼠IR后不同時(shí)間點(diǎn)Fas陽性細(xì)胞數(shù)比較(個(gè)/mm2,±s)

組別6h24h72h7天MCAO組(n=29)322.80±35.23*436.99±43.50*498.47±70.99*153.71±28.00MT組(n=30)223.98±40.04*#270.09±46.97*#333.78±38.51*#127.36±21.40Sham組(n=16)116.57±19.26117.98±22.47118.58±31.44120.78±22.78F值49.61582.95272.4852.588P值<0.05<0.05<0.05>0.05

注:*:與Sham組比較,P<0.01;#:與MCAO組比較,P<0.05

表3 各組大鼠IR后不同時(shí)間點(diǎn)FasL陽性細(xì)胞數(shù)比較(個(gè)/mm2,±s)

表3 各組大鼠IR后不同時(shí)間點(diǎn)FasL陽性細(xì)胞數(shù)比較(個(gè)/mm2,±s)

組別6h24h72h7天MCAO組(n=29)289.86±45.67*346.96±50.67*426.01±66.51*109.80±17.36MT組(n=30)191.05±39.28*#283.27±52.31*#351.35±32.01*#96.62±19.64Sham組(n=16)82.26±18.3481.66±15.9374.66±21.1287.86±11.85F值40.79251.76487.1822.210P值<0.05<0.05<0.05>0.05

注:*:與Sham組比較,P<0.01;#:與MCAO組比較,P<0.05

表4 各組大鼠IR后不同時(shí)間點(diǎn)活性Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)比較(個(gè)/mm2,±s)

表4 各組大鼠IR后不同時(shí)間點(diǎn)活性Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)比較(個(gè)/mm2,±s)

組別6h24h72h7天MCAO組(n=29)118.23±18.65**174.33±22.89**227.67±17.65**79.19±14.47MT組(n=30)93.49±15.91*#125.38±20.26**#193.02±22.37**#76.99±13.33Sham組(n=16)72.14±8.3468.94±10.8368.74±15.3165.74±12.06F值11.90239.663100.1201.466P值<0.05<0.05<0.05>0.05

注:*:與Sham組比較,P<0.05,**:P<0.01;#:與MCAO組比較,P<0.05

圖2 大鼠MACO模型建立后72 h DWI圖 A.MCAO組右側(cè)大腦半球可見大片狀高信號(hào); B.MT組右側(cè)大腦半球異常信號(hào)范圍較小 圖3 大鼠MACO模型建立后72 h大腦皮質(zhì)Fas免疫組化染色圖(×400) A.MCAO組陽性細(xì)胞增多,水腫較重; B.MT組細(xì)胞排列較規(guī)律,陽性細(xì)胞較少,水腫減輕 圖4 大鼠MACO模型建立后72 h大腦皮質(zhì)FasL免疫組化染色圖(×400) A.MCAO組陽性細(xì)胞增多,水腫較重; B.MT組細(xì)胞排列較規(guī)律,陽性細(xì)胞較少,水腫減輕 圖5 大鼠MACO模型建立后72 h海馬區(qū)活性Caspase-3免疫組化染色圖(×400) A.MCAO組細(xì)胞皺縮變形,活性Caspase-3陽性細(xì)胞較多; B.MT組活性Caspase-3陽性細(xì)胞較少

Fas、FasL可調(diào)控細(xì)胞凋亡信號(hào)傳導(dǎo),減輕組織神經(jīng)功能損害[9]。本研究結(jié)果顯示,IR后6 h、24 h、72 h MT組和MCAO組陽性細(xì)胞增多,提示凋亡細(xì)胞數(shù)明顯增加,組織水腫嚴(yán)重,但MT組陽性細(xì)胞數(shù)較MCAO組減少,表明MT能阻斷Fas、FasL凋亡通路,減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡,促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù),與王曉天等[10]的研究結(jié)果相符。Fas、FasL相協(xié)同,可改變機(jī)體內(nèi)環(huán)境激活Caspase,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。Caspase-3作為Caspase家族最重要的成員之一,是調(diào)控多條凋亡途徑的關(guān)鍵蛋白,其激活將促進(jìn)細(xì)胞凋亡[11]。有研究[12]表明,Caspase-3激活將發(fā)生一系列損傷反應(yīng),引起梗死灶及缺血半暗帶區(qū)大量遲發(fā)性細(xì)胞凋亡。而在缺血性神經(jīng)損傷過程中,抑制Caspase-3 活化可產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用[13]。本研究發(fā)現(xiàn)MT可減少活性Caspase-3表達(dá),從而抑制損傷級(jí)聯(lián)反應(yīng),發(fā)揮神經(jīng)修復(fù)功能。

綜上所述,神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分結(jié)合DWI對評(píng)估神經(jīng)功能恢復(fù)具有重要意義。DWI顯示MT可使rDWI-SI值減低。MT可通過降低Fas、FasL蛋白的表達(dá),抑制活性Caspase-3的活化,減輕局灶性腦缺血大鼠缺血側(cè)腦組織神經(jīng)細(xì)胞的凋亡,具有神經(jīng)保護(hù)作用。

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Effects of melatonin on diffusion weighted imaging and expression of Fas, FasL, cleaved Caspase-3 proteins in rats of focal cerebral ischemia

WANG Haiyu1, CHEN Lanfen1, WANG Xiaoli1,2*, YAN Shaozhen1, MU Qingjie3, ZHAO Yansong4

(1.Department of Medical Imaging, Weifang Medical University, Weifang 261053, China; 2.Medical Imaging Center, 4.Department of Ophthalmology, the Affiliated Hospital of Weifang Medical University, Weifang 261031, China; 3.Department of Hematology, Clinical Medicine College of Weifang Medical University, Weifang 261053, China)

ObjectiveBased on middle cerebral artery occlusion (MCAO) model, to investigate the effects of melatonin (MT) on DWI and expression of Fas, FasL and cleaved Caspase-3 proteins in rat model with focal cerebral ischemia.MethodsEighty SD rats were randomly divided into Sham group (n=16), MCAO group (n=32) and MT group (n=32). The rats in sham group were treated with sham-operation. And the rats in MCAO and MT groups were peritoneally injected with saline and MT respectively. The behavioral scores were assessed in the three groups. The rats in MCAO and MT group with the behavioral scores of 1—3 points were selected in the study. The DWI relative signal intensity (rDWI-SI), Fas, FasL and cleaved Caspase-3 proteins were respectively examined by MR scaning and immunohistochemical staining in all rats of each group at 6 h, 24 h, 72 h and 7 days after ischemia reperfusion (IR) or sham-operation. And the DWI and immunohistochemical results for each group were compared.ResultsAt last, there were 16 rats in sham group, 29 rats in MCAO group and 30 rats in MT group, respectively. There was significant difference of the behavioral scores among the three groups (χ2=50.125,P<0.01). The behavioral scores of MT and MCAO groups were higher than those of sham group (allP<0.05). And the behavior scores of the MT group were lower compared with MCAO group after IR. Compared with the rDWI-SI values measured at 6 h, 24 h and 72 h, 7 days in sham group, the rDWI-SI values of MT and MCAO groups were significantly higher (allP<0.01). And the rDWI-SI was higher in MCAO group than those in MT group at 6 h, 24 h and 72 h after IR (allP<0.01). And there was no significant difference of rDWI-SI at 7 days after IR between MT and MCAO groups (P>0.05). The immunohistochemical staining results showed that the number of Fas, FasL and cleaved Caspase-3 positive cells in MCAO and MT groups were significantly higher than those in sham group (allP<0.01). And there were less Fas, FasL and cleaved Caspase-3 positive cells in MT groups compared with MCAO group (allP<0.05) at 6 h, 24 h and 72 h after IR. There was no significant difference of Fas, FasL and cleaved Caspase-3 positive cells among the three groups at 7 days after IR (P>0.05).ConclusionMT can effectively alleviate the rDWI-SI value and inhibit the expression of Fas, FasL and cleaved Caspase-3 proteins in rats of focal cerebral ischemia.

Diffusion magnetic resonance imaging; Brain ischemia; Melatonin

山東省自然科學(xué)基金(ZR2014HQ077、ZR2014JL049)、國家自然科學(xué)基金(81000268)。

王海宇(1992—),男,山東日照人,在讀碩士。研究方向:腦損傷疾病的影像學(xué)研究。E-mail: wanghy_wfmc@163.com

王曉莉,濰坊醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)影像學(xué)系,261053; 濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)影像中心,261031。E-mail: wxlpine@163.com

2017-01-12 [

] 2017-06-26

10.13929/j.1003-3289.201701073

R-332; R445.2

A

1003-3289(2017)09-1309-06

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