張健，李赫，宋文華，蔣湘輝，胡宗云，富麗靜，張濤，楊國成

（1.遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院，遼寧省水生動物病害防治重點實驗室，遼寧 遼陽 111000；2.遼陽縣水產(chǎn)技術(shù)推廣站，遼寧 遼陽 111000）

三種常用水產(chǎn)藥物對卡拉白魚的急性毒性

張健1，李赫1，宋文華1，蔣湘輝1，胡宗云1，富麗靜1，張濤1，楊國成2

（1.遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院，遼寧省水生動物病害防治重點實驗室，遼寧 遼陽 111000；2.遼陽縣水產(chǎn)技術(shù)推廣站，遼寧 遼陽 111000）

在水溫（23±1）℃和pH6.9～7.3下，采用半靜態(tài)法研究敵百蟲、二氧化氯和聚維酮碘三種常用藥物對平均體質(zhì)量（6.1±0.23）g的卡拉白魚Chalcalburnus chalcoides的急性毒性。結(jié)果表明：敵百蟲對卡拉白魚的24h、48h、72h、96h半致死質(zhì)量濃度分別為0.40mg/L、0.34mg/L、0.31mg/L和0.29mg/L，安全質(zhì)量濃度為0.07mg/L；二氧化氯對卡拉白魚 24h、48h、72h、96h的半致死質(zhì)量濃度分別為 28.18mg/L、27.16mg/L和 24.93mg/L、23.00mg/L，安全質(zhì)量濃度為7.57mg/L；聚維酮碘對卡拉白魚24h、48h、72h、96h的半致死質(zhì)量濃度分別為119.91mg/L、83.87mg/L、72.78mg/L和64.61mg/L，安全質(zhì)量濃度為14.13mg/L。三種藥物對卡拉白魚的毒性由高至低依次為：敵百蟲＞二氧化氯＞聚維酮碘。敵百蟲對卡拉白魚毒性較強，在生產(chǎn)中需謹(jǐn)慎使用；二氧化氯和聚維酮碘的安全質(zhì)量濃度高于生產(chǎn)中常用的潑灑濃度，可安全使用。

卡拉白魚；敵百蟲；二氧化氯；聚維酮碘；急性毒性

卡拉白魚Chalcalburnus chalcoides aralensis隸屬鯉科、雅羅魚亞科、卡拉白屬[1]，主要分布在黑海、里海和咸海等水域，是一種優(yōu)質(zhì)的小型經(jīng)濟魚類。卡拉白魚肉質(zhì)細嫩、味道鮮美、無肌間刺，營養(yǎng)豐富，食性雜，適應(yīng)性強，成魚個體達100～150 g，深受消費者的喜愛[2,3]，市場供不應(yīng)求，經(jīng)濟效益可觀。

表1 試驗藥物的規(guī)格和廠家Tab.1 The specifications and manufacturers of the drugs used in the test

2001年，黑龍江水產(chǎn)研究所引入了卡拉白魚，研究了其生物學(xué)、生理學(xué)、養(yǎng)殖學(xué)、胚胎學(xué)和組織學(xué)等[4-7]。2012年，遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院引進該魚，在人工繁養(yǎng)殖和人工飼料方面取得了較好的成績[8,9]。近幾年，卡拉白魚規(guī)?；B(yǎng)殖在我國天津等地快速發(fā)展，但目前關(guān)于卡拉白魚的病害防治還未見系統(tǒng)的研究和報道。本文通過研究3種常用水產(chǎn)藥物對卡拉白魚的急性毒性試驗，探討其對卡拉白魚的半致死質(zhì)量濃度和安全質(zhì)量濃度，為卡拉白魚病害防治中的科學(xué)用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

本試驗所用的卡拉白魚平均體質(zhì)量（6.1±0.23）g，體長（6.5±0.42）cm，來自遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院沈陽試驗基地。試驗前在120cm×100cm×60cm的水箱中暫養(yǎng)1周后，隨機挑選健康的卡拉白魚在48cm×37cm×28cm塑料箱中進行試驗。

試驗用水為曝氣2d的自來水，水溫在（23±1）℃，增氧泵持續(xù)供氧，使水體溶解氧保持在7 mg/L以上，pH值在6.9～7.3之間。

敵百蟲、二氧化氯和聚維酮碘三種常用藥物的規(guī)格和產(chǎn)地見表1。

1.2 方法

按照水產(chǎn)疾病防治中常規(guī)用藥劑量適當(dāng)擴大和縮小幾個濃度進行預(yù)試驗，依據(jù)結(jié)果確定正式試驗的濃度范圍，即96h無死亡的濃度為最高濃度，24h全部死亡的濃度為最低濃度范圍。按照等對數(shù)間距設(shè)置7個試驗濃度梯度，每種藥物濃度設(shè)2個平行，另設(shè)一個空白對照。塑料箱中各注入40L曝氣水，隨機放入20尾卡拉白魚。先將試驗藥物配成母液，試驗開始后根據(jù)試驗濃度要求，現(xiàn)用現(xiàn)配，每24h換藥液一次。試驗開始時連續(xù)觀察8h，然后分別記錄24h、48h和96h各質(zhì)量濃度組中卡拉白魚的死亡數(shù)和存活數(shù)。將死亡個體及時挑出后，5min內(nèi)不出現(xiàn)反應(yīng)可判定為死亡。試驗期間不投喂。

1.3 數(shù)據(jù)處理

半致死質(zhì)量濃度LC50按寇氏法（Karder）[10]求出：

式中Xm為死亡組最大劑量的對數(shù)，d為相鄰組濃度對數(shù)差，p為各組的死亡率，∑p為各組死亡率的總和。

安全濃度SC=48hLC50×0.3/（24hLC50/48hLC50）2

式中SC為安全質(zhì)量濃度；24hLC50和48hLC50分別為24h和48h半致死質(zhì)量濃度。

2 結(jié)果與分析

2.1 敵百蟲對卡拉白魚的急性毒性試驗

放入不同質(zhì)量濃度的敵百蟲藥液后，卡拉白魚即出現(xiàn)了不同程度的應(yīng)激反應(yīng)。低質(zhì)量濃度中卡拉白稍有躁動，游速加快；隨著質(zhì)量濃度的增加，卡拉白魚開始亂躥，撞擊箱壁，經(jīng)過一段時間后，出現(xiàn)側(cè)游或翻肚倒掛以及觸碰反應(yīng)遲緩等現(xiàn)象。試驗魚死前身體抽搐、喪失平衡和身體彎曲。敵百蟲對卡拉白的毒性試驗結(jié)果見表2。

表2 卡拉白魚在不同質(zhì)量濃度敵百蟲溶液中的死亡率Tab.2 Mortality of shemaia Chalcalburnus chalcoides exposed to various doses of trichlorphon

2.2 二氧化氯對卡拉白魚的急性毒性試驗

隨著濃度和時間的增加和延長，卡拉白魚死亡率逐漸增加。低質(zhì)量濃度時，試驗魚中毒現(xiàn)象不明顯，活動能力同對照組相似。質(zhì)量濃度為20mg/L時，試驗魚在72h時出現(xiàn)死亡。隨著藥物質(zhì)量濃度增加，各試驗組魚體先后出現(xiàn)焦躁不安、上下躥動、側(cè)游、仰游等中毒癥狀，最后呆滯于水底死亡。死亡魚體的中毒癥狀基本一致，僅在死亡時間上有差別（表 3）。

表3 卡拉白魚在不同質(zhì)量濃度二氧化氯溶液中的死亡率Tab.3 Mortality of shemaia Chalcalburnus chalcoides exposed to various doses of chlorine dioxide

2.3 聚維酮碘對卡拉白魚的急性毒性試驗

隨質(zhì)量濃度的增加和脅迫時間的延長，聚維酮碘對卡拉白魚的急性毒性效應(yīng)明顯增強，死亡率明顯升高（表4）。低質(zhì)量濃度50mg/L試驗組在72h出現(xiàn)死亡；高質(zhì)量濃度150mg/L試驗組24h死亡率達87.5%，72h全部死亡。死魚有的漂浮在水面，有的靜臥水底，口、鰓蓋微張，水中漂浮大量鱗片。

表4 卡拉白魚在不同質(zhì)量濃度聚維酮碘溶液中的死亡率Tab.4 Mortality of shemaia Chalcalburnus chalcoides exposed tovariousconcentrations of povidoneiodine

2.4 三種藥物的半致死質(zhì)量濃度和安全質(zhì)量濃度比較

由表5可知，敵百蟲對卡拉白魚的24h、48h、72h、96h LC50分 別 為 0.40mg/L、0.34mg/L、0.31mg/L 和0.29mg/L，安全質(zhì)量濃度為0.07mg/L；二氧化氯對卡拉白魚的 24h、48h、72h、96h LC50分別為 28.18mg/L、27.16mg/L、24.93mg/L和23.00mg/L，安全質(zhì)量濃度為7.57mg/L；聚維酮碘對卡拉白魚的24h、48h、72h、96h LC50分別為 119.91mg/L、83.87mg/L、72.78mg/L和64.61mg/L，安全質(zhì)量濃度為14.13mg/L。

依據(jù)有毒物質(zhì)對魚類毒性的等級評價標(biāo)準(zhǔn)，將96hLC50分為 4級：96hLC50＞10.0mg/L為低毒；1.0mg/L＜96hLC50≤10.0mg/L為中毒；0.1mg/L＜96hLC50≤1.0mg/L為高毒；96hLC50＜0.1mg/L為劇毒。根據(jù)這一標(biāo)準(zhǔn)，敵百蟲96hLC50為0.29mg/L,，為高毒性藥物；二氧化氯96hLC50為23mg/L，為低毒性藥物；聚維酮碘96hLC50為64.61mg/L，為低毒性藥物。三種藥物對卡拉白魚的毒性大小依次為：敵百蟲＞二氧化氯＞聚維酮碘。

表5 敵百蟲、二氧化氯和聚維酮碘的半致死質(zhì)量濃度和安全質(zhì)量濃度Tab.5 Median-lethal concentrations and safe concentrations of trichlorphon,chlorine dioxide and povidone iodine for shemaia Chalcalburnus chalcoides

3 討論

3.1 敵百蟲對卡拉白魚的毒性

敵百蟲是一種高效、低毒和低殘留的有機磷酯類藥物，經(jīng)機體吸收后，產(chǎn)生膽堿酯酶抑制劑，抑制了膽堿酯酶的活性，使體內(nèi)的乙酰膽堿不能被分解，使昆蟲、甲殼類等神經(jīng)中毒死亡[11,12]。敵百蟲廣泛用于防治魚類體外的寄生蟲病，常用劑量為0.2～0.5mg/L。不同魚類對敵百蟲的敏感性差異很大。敵百蟲對草魚Ctenopharyngodon idellus、南方大口鯰 S.meridionalis Chen、唇Hemibarbus labeo和黃顙魚Pelteobagrus fulvidraeo的安全質(zhì)量濃度分別為 8.48mg/L、4.10mg/L、4.23mg/L和 0.65mg/L[13-16]。本試驗結(jié)果表明，卡拉白魚對敵百蟲非常敏感，其安全質(zhì)量濃度為0.07mg/L，這與敵百蟲對斑點叉尾鮰Ictalurus punctatus的毒性相當(dāng)[17]。敵百蟲的安全質(zhì)量濃度比常用潑灑量低很多，因此不宜作為卡拉白魚病害防治藥物。

3.2 二氧化氯對卡拉白魚的毒性

二氧化氯是一種高效、低毒的廣譜水產(chǎn)養(yǎng)殖殺菌消毒劑[18]，對魚類的爛鰓病、腸炎病、赤皮病、水霉病、出血性敗血病以及對蝦的弧菌病等有較好的療效，對水體中的病原微生物、病毒、細菌芽孢及真菌等也有極強的殺滅作用[19]。

二氧化氯在氫離子的作用下可以產(chǎn)生具有強氧化作用的新生態(tài)氧，其滲入病原體的細胞膜，與氨基酸產(chǎn)生氧化分解反應(yīng)，使蛋白質(zhì)失活而達到殺滅病原體的目的。使用二氧化氯不會產(chǎn)生致癌物質(zhì)，病原體也不會產(chǎn)生耐藥性[20]，還能改善養(yǎng)殖水體的水質(zhì)。

資料顯示，二氧化氯對湘云鯽Carassius auratus Triploid、鱖 Siniperca chuatsi、草魚和泥鰍 Misgurnus anguillicaudatus的安全濃度分別為 3.24mg/L、0.37mg/L、6.34mg/L 和 2.32mg/L[13,21-23]。不同魚類對二氧化氯的安全質(zhì)量濃度也有一定差別。

本試驗中，二氧化氯對卡拉白的安全質(zhì)量濃度為7.57mg/L，與對草魚的安全質(zhì)量濃度相近。而二氧化氯的常用潑灑濃度為0.2～0.3mg/L，遠遠低于其安全質(zhì)量濃度，在卡拉白魚養(yǎng)殖中可廣泛使用，是比較理想的藥物。

3.3 聚維酮碘對卡拉白魚的毒性

聚維酮碘為碘和聚乙烯吡咯烷酮的絡(luò)合物，可氧化病原體的蛋白質(zhì)，與蛋白質(zhì)的氨基結(jié)合使其變性，使病原體代謝機能障礙而死亡，是一種高效、低毒、廣譜、無毒副作用及無殘留的殺菌劑[24,25]。碘在溶劑中緩慢釋放，聚維酮碘的殺菌作用持久，可有效抑制或殺滅大部分真菌、細菌、病毒及原蟲等病原體[26]，尤其是病毒和弧菌。

本試驗結(jié)果表明，聚維酮碘對卡拉白魚的安全質(zhì)量濃度為14.13mg/L，低于其對瓦氏黃顙魚[27]（60.65mg/L）和泥鰍[23]的安全質(zhì)量濃度（232mg/L）；高于對籃點笛鯛Lutjanus rivulatus幼魚[28]（2.84mg/L和梭魚Liza haematocheila[29]的安全質(zhì)量濃度（4.7 mg/L），與對斜帶石斑魚的安全質(zhì)量濃度14.27 mg/L[30]相當(dāng)。在生產(chǎn)中，聚維酮碘的常用潑灑質(zhì)量濃度為0.2～0.5mg/L（以有效碘計），遠低于本試驗的安全質(zhì)量濃度，可按照常規(guī)質(zhì)量濃度用于卡拉白魚養(yǎng)殖中病害防治。

綜上所述，二氧化氯和聚維酮碘可安全用于卡拉白魚的疾病防治，而敵百蟲不宜使用。但是，藥物的毒性及魚的耐受性受水溫、溶解氧和有機物等水質(zhì)因子，以及養(yǎng)殖動物生理狀態(tài)和規(guī)格等因子的影響，在用藥過程中還需結(jié)合實際，密切觀察魚類的活動情況，以確保用藥安全和有效。

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Acute Toxicity of Three Pesticides to Shemaia Chalcalburnus chalcoides

ZHANG Jian1,LI He1,SONG Wen-hua1,JIANG Xiang-hui1,HU Zong-yun1,FU Li-jing1,ZHANG Tao1,YANG Guo-cheng2
（1.Key Laboratory for Prevention and Control of Aquatic Animal Diseases of Liaoning Province,Freshwater Fisheries Science Institute of Liaoning Province,Liaoyang 111000,China;2.Fisheries Technology Extension of Liaoyang County,Liaoyang 111000,China）

The acute toxicity of trichlorphon,chlorine dioxide and povidone iodine to shemaia Chalcalburnus chalcoides with body weight of（6.1 ±0.23）g was studied at water temperature of（23 ±1）℃ and pH 6.9～7.3 using a semi-static test method.The results showed that the median-lethal concentration（LC50）of trichlorphon was 0.40 mg/L in 24 h,0.34 mg/L in 48 h,0.31 mg/L in 72 h and 0.29 mg/L in 96 h,with safe concentration of 0.07 mg/L,the LC50of chlorine dioxide was 28.18 mg/L in 24 h,27.16 mg/L in 48 h,24.93 mg/L in 72 h and 23.00 mg/L in 96 h,with safe concentration of 7.57 mg/L，the LC50of povidone iodine was 119.91 mg/L in 24 h,83.87 mg/L in 48 h,72.78 mg/L in 72 h and 64.61 mg/L in 96 h,with safe concentration of 14.13 mg/L.The order of toxicity of the three drugs was arranged in descending order as trichlorphon＞chlorine dioxide＞povidone iodine.The findings indicate that trichlorphon has higher toxicity with caution utilization in aquaculture,and that chlorine dioxide and povidone iodine has lower toxicity and safe use in aquaculture.

Chalcalburnus chalcoides;trichlorphon;chlorine dioxide;povidone iodine;acute toxicity

S948

A

1005-3832（2017）04-0040-04

2017-03-02

遼寧省海洋與漁業(yè)廳項目（201302）；遼寧省水生動物病害防治重點實驗室項目（2011006）；遼陽市科學(xué)計劃類項目（2012007）.

張?。?980-），男，工程師，碩士研究生，從事水生生物疾病學(xué).E-mail：zhanglnly@126.com李赫（1982-），女，副高級工程師，碩士研究生，從事水生生物疾病學(xué).Email：lihelyln@126.com張健和李赫同為第一作者.

宋文華（1974-），男，研究員，從事水生生物疾病學(xué)研究.E-mail：songlnly@126.com