黃新城 南昌市第一醫(yī)院 （江西 南昌 330008）

免疫比濁法PGI/PGII試劑在全自動生化分析儀上檢測性能驗證分析

黃新城 南昌市第一醫(yī)院 （江西 南昌 330008）

目的：在臨床開展血清胃蛋白酶原I和II（PGI/PGII）檢測前，對PGI/PGII 試劑盒在全自動生化分析儀上檢測性能進行評價。方法：以廠家配套的高、低值濃度樣品為樣本，進行批內(nèi)精密度和批間精密度驗證。以廠家配套的質(zhì)控標準品為樣本，進行正確度驗證。將質(zhì)控標準品稀釋，PG I范圍為2.5～160.0 ng/mL，PG II范圍為2.0～70.0 ng/mL，將結(jié)果做回歸與相關(guān)分析。以廠商提供干擾物進行抗干擾能力驗證。結(jié)果：PG I和PGII的低值濃度樣品批內(nèi)精密度的分別為3.23%CV和2.93%CV，批間精密度分別為2.87%CV和2.80CV%。PG I和PGII的高值濃度樣品批內(nèi)精密度的分別為1.75%CV和2.60%CV，批間精密度分別為1.75%CV和2.46%CV。PG I和PGII準確度偏倚均在±5%以內(nèi)。在PG I范圍為2.5～160.0 ng/mL，線性系數(shù)r=0.999；PG II范圍為2.0～70.0 ng/mL，線性系數(shù)r=0.996，均到達要求。結(jié)論：免疫比濁法PGI/PGII 檢測試劑盒在日立7600-010全自動生化分析儀上檢測性能符合臨床要求。

胃蛋白酶原 驗證 全自動生化分析儀

全自動生化分析儀已經(jīng)成為當前醫(yī)院常用的生化檢驗儀器之一。為保證全自動生化分析儀臨床檢驗結(jié)果準確可靠，在一種新的檢測方法應(yīng)用之前，根據(jù)《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力認可準則》[1]和《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力的專用要求》[2]應(yīng)該對該方法進行驗證，通常包括儀器的準確度、精密度、線性范圍等[3]。本院將采用胃蛋白酶原I/II（PGI/ II）測定試劑盒和日立7600全自動生化分析儀組成檢測系統(tǒng)用于臨床檢驗，本研究對其準確度、精密度、線性范圍、樣本針的攜帶污染、抗干擾能力和參考范圍進行驗證。

1.材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器為日立7600-010全自動生化分析儀。實驗所需材料均由北京世紀沃德生物科技有限公司提供：PGI/PGII測定試劑盒（Lot:B054103)；標準血清（Lot:NA-18)；高、低值濃度質(zhì)控品（Lot:LADK-18-1、LADK-18-2)；高、低值血清樣品；干擾物：MP biomedicals公司血紅蛋白（Lot:M4017)、北京欣經(jīng)科公司抗壞血酸（Lot:4770J)、Frontier Scientifc公司膽紅素（Lot:JH16-10999)。

1.2 方法

1.2.1 精密度驗證實驗方案

以廠家提供的高、低值濃度血清樣品為樣本，在最短時間內(nèi)分別對兩個高、低值濃度樣品測量20次，由此計算出批內(nèi)精密度。以廠家提供的高、低值濃度樣品為樣本，連續(xù)檢測20 d，每天測定2批次，每批次測定2次，由此計算出批間精密度。批內(nèi)精密度的要求：批內(nèi)CV≤5%；批間精密度的要求：批間CV≤10%。檢驗方法：終點法（上升），檢驗波長700 nm，比色杯光徑1cm，R1162 μL，R230 μL，樣本量6 μL，反應(yīng)時間10 min，下同。

1.2.2 正確度驗證實驗方案

表1. 精密度實驗結(jié)果

參考美國臨床實驗室標準化協(xié)會（CLSI）EP15-A2文件進行準確度驗證實驗。以廠家配套的質(zhì)控品為樣本，連續(xù)測量20次，由此計算出批內(nèi)平均值。正確度要求：測定結(jié)果均值與質(zhì)控靶值的偏倚≤15%。

1.2.3 線性范圍驗證實驗方案

將質(zhì)控標準品稀釋，PG I范圍為2.5～160.0 ng/mL，PG II范圍為2.0～70.0 ng/mL，將結(jié)果做回歸與相關(guān)分析。線性范圍要求：線性相關(guān)系數(shù)≥0.99。

1.2.4 抗干擾能力驗證實驗方案

將試劑廠商提供的定值干擾物按NCCLS EP-72A文件要求，將廠家提供的高、低值血清樣品與血紅蛋白、抗壞血酸、膽紅素按9:1比例充分混勻，分別測量3次取平均值與預(yù)期值進行對比。

1.3 統(tǒng)計分析

利用Excel 2003進行相關(guān)與回歸分析。

2.結(jié)果

2.1 精密度實驗結(jié)果

精密度實驗結(jié)果見表1，不精密度小于廠商規(guī)定的批內(nèi)CV≤5%、批間CV≤10%，均符合標準。

2.2 正確度實驗結(jié)果

正確度實驗結(jié)果見表2，小于允許偏差范圍15%，均符合標準。

2.3 線性范圍實驗結(jié)果

在PG I范圍為2.5～160.0 ng/mL，線性系數(shù)r=0.999；PG II范圍為2.0～70.0 ng/mL，線性系數(shù)r=0.996，均到達要求。

表2. 正確度實驗結(jié)果

2.4 抗干擾能力實驗結(jié)果

比對結(jié)果顯示加干擾物（膽紅素：50mg/dL；抗壞血酸：50mg/dL；血紅蛋白：500mg/dL）樣本結(jié)果與原樣本結(jié)果偏差小于5%，達到臨床要求。

3.討論

隨著檢驗技術(shù)的不斷發(fā)展和全自動生化分析儀在各醫(yī)院的應(yīng)用普及，大大提高了臨床生化檢驗的速度，從而服務(wù)于疾病診斷，療效評價和預(yù)后判斷中[4,5]。近年來，各種檢測試劑盒產(chǎn)品層出不窮，顯著簡化了檢驗科工作人員的工作強度，提高了工作效率，也使得生化指標的檢驗效率大大提高[6-8]。按照國家醫(yī)學實驗室認可委員會和醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法的要求，新的儀器或方法在臨床應(yīng)用前要進行系統(tǒng)驗證，檢驗是否符合相關(guān)檢驗所要求的規(guī)格[9,10]?；谏鲜鲆螅狙芯繉ξ傅鞍酌冈璉/II的檢驗試劑盒采用本院日立7600-010全自動生化分析儀進行方法學驗證。

本組數(shù)據(jù)顯示，北京世紀沃德生物科技有限公司所生產(chǎn)的PGI/PGII測定試劑盒于日立7600-010全自動生化分析儀檢測PGI/PGII經(jīng)精密度、準確度、線性范圍和抗干擾實驗驗證，均符合其要求標準。該PGI/PGII檢測試劑盒檢測方法是基于免疫濁度法的原理，與日立7600-010全自動生化分析儀組成的檢測系統(tǒng)，上述驗證指標符合臨床使用的要求。

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Verifcation of Detection Performance of PGI/PGII Reagent on Automatic Biochemical Analyzer by Immunoturbidimetry

HUANG Xin-cheng The First Hospital of Nanchang (Jiangxi Nanchang 330008)

1006-6586(2017)11-0027-02

R735.2

A

2017-04-15

黃新城，研究方向：臨床醫(yī)學檢驗。