李明顯，趙杰，何青蓮，鄭廣娟

(廣東省中醫(yī)院病理科，廣州，510120)

四格小孔徑包埋盒在常規(guī)病理技術(shù)中的應(yīng)用改進(jìn)

李明顯，趙杰，何青蓮*，鄭廣娟

(廣東省中醫(yī)院病理科，廣州，510120)

目的探討四格小孔徑包埋盒應(yīng)用于胃腸鏡活檢組織病理標(biāo)本取材和石蠟包埋過程中的改進(jìn)方法，以提高制片效率和質(zhì)量。方法將胃腸鏡活檢組織隨機(jī)放入四格小孔徑包埋盒內(nèi)作為對照組，包埋盒上不記錄（對照組A）或記錄（對照組B）每例活檢組織的數(shù)量；改進(jìn)組對四格小孔徑包埋盒的四個分區(qū)重新定義為I-IV四個象限，取材時將1-4個活檢組織分別對應(yīng)放入I-IV四個象限的小格中。對照組和改進(jìn)組標(biāo)本均進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋、切片以及HE染色，比較3組間病理組織取下后放入包埋盒內(nèi)的耗時、石蠟包埋過程中收集標(biāo)本的耗時以及顯微鏡觀察標(biāo)本數(shù)與實際標(biāo)本數(shù)的符合率。結(jié)果改進(jìn)組平均每例標(biāo)本取材后放置標(biāo)本和包埋收集標(biāo)本耗時均顯著短于對照組B；與對照組A相比，改進(jìn)組放置標(biāo)本耗時無顯著差異，而收集標(biāo)本耗時顯著縮短。改進(jìn)組鏡檢標(biāo)本數(shù)量符合率為100%，顯著高于兩個對照組。結(jié)論對四格小孔徑包埋盒的四個小格重新定義并賦予特定的數(shù)量關(guān)系，將該規(guī)則應(yīng)用于病理組織取材過程和常規(guī)石蠟包埋過程中可提高胃腸鏡活檢組織的制片效率和質(zhì)量。

胃腸鏡活檢；四格小孔徑包埋盒

胃腸鏡活檢組織是病理科日常工作中的重要標(biāo)本來源，由于其體積小且標(biāo)本間存在數(shù)量差異，在傳統(tǒng)的石蠟包埋過程中給操作者帶來一些不便。我們將胃腸鏡活檢組織應(yīng)用四格小孔徑包埋盒的特殊處理方式，經(jīng)反復(fù)實踐，證明了該方法不但保證了標(biāo)本制片過程中的效率和質(zhì)量，而且使取材過程和石蠟包埋過程變得更加簡便。

材料與方法

1 材料

收集2017年2月本院胃腸鏡室行消化道內(nèi)窺鏡檢查術(shù)中鉗取的活檢標(biāo)本90例，每例標(biāo)本的組織數(shù)量1～4粒，每粒胃組織標(biāo)本及腸組織標(biāo)本直徑0.1～0.5cm，標(biāo)本均采用10%中性福爾馬林固定。

2 實驗設(shè)備

四格小孔徑包埋盒（威格斯,廣州），自動脫水機(jī)（Thermo，美國），石蠟包埋機(jī)（Thermo，美國），石蠟切片機(jī)（Leica,德國），自動染色機(jī)（Leica,德國）。

3 實驗分組與方法

90例胃腸鏡活檢組織隨機(jī)分成3組，即對照組A，對照組B和改進(jìn)組，每組30例標(biāo)本，依次編號為1～30。

傳統(tǒng)方法：將胃腸鏡活檢組織隨機(jī)放入四格小孔徑包埋盒內(nèi)，包埋盒上不記錄每例活檢組織的數(shù)量，該組作為對照組A（圖1A）；在包埋盒上記錄每例活檢組織的數(shù)量，該組作為對照組B（圖1B）。記錄每例標(biāo)本病理組織取材后從打開標(biāo)本瓶至將該標(biāo)本瓶內(nèi)所有活檢組織放入四格小孔徑包埋盒內(nèi)所消耗的時間（即放置標(biāo)本耗時），取材后點(diǎn)染伊紅并合上蓋子，依次脫水、透明、浸蠟、包埋。包埋過程：按石蠟包埋原則[1-4]進(jìn)行操作，并記錄每例標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋過程中從打開包埋盒至將該包埋盒內(nèi)所有活檢組織收集完畢所消耗的時間（即收集標(biāo)本耗時）。然后常規(guī)切片及HE染色，并于顯微鏡下計數(shù)每例標(biāo)本的組織數(shù)量。

圖1 對照組四格小孔徑包埋盒標(biāo)本放置示意圖。A1～A4，分別顯示對照組A中1～4個組織標(biāo)本隨機(jī)放置在不同的小格內(nèi)； B1～B4，分別顯示對照組B中1～4個組織標(biāo)本隨機(jī)放置在不同的小格內(nèi)Fig. 1 Placement of samples in control groups. A1 – A4, in control group A, samples from one to four pieces were random ly placed into dif erent partitions; B1 – B4, in control group B, samples from one to four pieces were random ly placed into dif erent partitions

改進(jìn)方法：將四格小孔徑包埋盒的四個格子分別定義為相應(yīng)的四個象限（圖2A）。標(biāo)本放置規(guī)則：①組織數(shù)量為1時，將活檢組織放置在象限Ⅰ的小孔中；②組織數(shù)量為2時，將活檢組織均放置在象限Ⅱ的小孔中；③組織數(shù)量為3時，將活檢組織均放置在象限Ⅲ的小孔中；④組織數(shù)量為4時，將活檢組織均放置在象限Ⅳ的小孔中，且每個包埋盒內(nèi)最多放置4粒組織（圖2B）。記錄每例標(biāo)本病理組織取材后放置標(biāo)本耗時，取材后點(diǎn)染伊紅并合上蓋子，依次脫水、透明、浸蠟、包埋。包埋過程：按石蠟包埋原則[1-4]進(jìn)行操作，并記錄每例標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋過程中收集標(biāo)本耗時。然后常規(guī)切片及HE染色，并于顯微鏡下計數(shù)每例標(biāo)本的組織數(shù)量。

4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件，取材耗時、包埋耗時及每例標(biāo)本取材時及制片后組織數(shù)量的差異在三組間的比較采用t檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

為了明確在常規(guī)病理技術(shù)中改進(jìn)四格小孔徑包埋盒的使用規(guī)則后是否能快速、高效的處理病理標(biāo)本，我們記錄各組標(biāo)本取材后從打開標(biāo)本瓶至將該標(biāo)本瓶內(nèi)所有活檢組織放入四格小孔徑包埋盒內(nèi)所消耗的時間（即放置標(biāo)本耗時）和石蠟包埋過程中從打開包埋盒至將該包埋盒內(nèi)所有活檢組織收集完畢所消耗的時間（即收集標(biāo)本耗時），以及染色后顯微鏡鏡檢每例標(biāo)本的數(shù)量與實際數(shù)量的符合率。結(jié)果顯示：與對照組B比較，改進(jìn)組放置標(biāo)本耗時和收集標(biāo)本耗時均顯著縮短；與對照組A比較，改進(jìn)組放置標(biāo)本耗時無明顯變化，而收集標(biāo)本耗時顯著縮短。此外，改進(jìn)組顯微鏡下觀察到的每例標(biāo)本數(shù)量與實際標(biāo)本數(shù)量完全吻合，符合率為100%，而兩組對照組標(biāo)本數(shù)量符合率均顯著低于改進(jìn)組（表1）。這些結(jié)果提示改進(jìn)后的四格小孔徑包埋盒使用規(guī)則能顯著提高病理標(biāo)本檢測的效率和質(zhì)量，更好的服務(wù)于臨床病理診斷。

圖2 改進(jìn)組四格小孔徑包埋盒標(biāo)本放置示意圖。A，四格小孔徑包埋盒I-IV四個象限的定義；B1～B4, 分別顯示改進(jìn)組中1～4個組織標(biāo)本分別放置在定義為I-IV象限的不同小格內(nèi)Fig. 2 Placement of samples in the improvement group. A, def nition of quadrants I to IV in the boxes; B1 – B4, in the improvement group, samples from one to four pieces were placed into quadrants I to IV, respectively

表1 對照組與改進(jìn)組胃腸鏡活檢組織制片效率和質(zhì)量比較Tab. 1 Com parison of the ef ciency and quality of gastrointestinal biopsy slice preparation between control groups and the im provement group

討 論

胃腸鏡活檢組織是病理科日常工作中的重要標(biāo)本來源，由于其體積小且標(biāo)本間存在數(shù)量差異，在病理組織取材和常規(guī)石蠟包埋過程中給操作者帶來一些不便。傳統(tǒng)的取材方法是普通包埋盒與包埋紙相結(jié)合，而小孔徑包埋盒的密集孔徑設(shè)計可以省去包埋紙的相關(guān)操作，一定程度上簡化了工作流程，但取材時仍需在包埋盒上記錄組織的數(shù)量以保證制片質(zhì)量。對照組A表明省去該操作，雖然可以節(jié)省制片時間，但帶來更嚴(yán)重的問題是質(zhì)量控制工作無法保證。常規(guī)石蠟包埋過程中，操作者需仔細(xì)檢查包埋盒內(nèi)及頂部蓋子以防止組織丟失，但實際數(shù)量仍然不能明確。因為“多粒”組織可能是一個形狀不規(guī)則的息肉，而“一粒”組織也可能是大小不同的幾粒組織相互嵌合在一起，出現(xiàn)這種情況時若操作者僅憑經(jīng)驗來處理就會造成工作上的失誤，進(jìn)而影響質(zhì)量控制工作及診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。對照組B通過在包埋盒上記錄每例組織數(shù)量在一定程度上降低了上述失誤發(fā)生的可能性，而整個制片過程的工作效率也因該操作而降低，而且常規(guī)石蠟包埋的質(zhì)量控制工作仍然有待提高。因為包埋盒上的記錄數(shù)字大多是記錄者用鉛筆書寫，字跡在多次摩擦碰撞過程中會變得模糊不清，尤其是數(shù)字“3”常被誤認(rèn)為“2”，從而造成對記錄數(shù)字的辨認(rèn)錯誤，進(jìn)而引起后續(xù)操作失誤。

四格分區(qū)的設(shè)計保證了小組織在脫水過程中限制在某個分區(qū)內(nèi)而不發(fā)生多個分區(qū)間的相互遷移，改進(jìn)方法利用這一特點(diǎn)對四格小孔徑包埋盒的四個分區(qū)重新定義并賦予特定的數(shù)量關(guān)系，在常規(guī)石蠟包埋過程中操作者根據(jù)組織所在象限就能準(zhǔn)確判斷出組織的數(shù)量，從而正確反映取材時組織的數(shù)量，這不但解決了對照組B的工作效率問題，而且解決了對照組A的制片質(zhì)量問題。應(yīng)用該方法需要注意的是：①當(dāng)組織數(shù)量超過4時，需增加包埋盒的數(shù)量并依次編號，同時參照規(guī)則進(jìn)行取材。②當(dāng)組織直徑小于0.05cm時，需用包埋紙將組織包好后再進(jìn)行脫水。該方法同樣適用于宮腔鏡、膀胱鏡、纖支鏡及鼻咽鏡等鉗取的小組織在常規(guī)標(biāo)本制片過程中的應(yīng)用。

應(yīng)用改進(jìn)方法不但保證了制片過程的工作效率，而且提高了石蠟包埋工作的質(zhì)量控制，是一種值得推廣的技術(shù)應(yīng)用方法。

[1] 中華醫(yī)學(xué)會.臨床技術(shù)操作規(guī)范-病理學(xué)分冊.北京：人民軍醫(yī)出版社，2004，31-32.

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An improved method of app lying four-partition small-aperture embedding boxes in routine pathological practice

Li M ingxian, Zhao Jie, He Qinglian*, Zheng Guangjuan
(Department of Pathology, Guangdong Hospital of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510120, China)

ObjectiveTo explore an improved method of applying four-partition small-aperture embedding boxes (the boxes) in sampling and embedding the pathological specimens of gastrointestinal biopsies for an improvement of the ef ciency and quality of slice preparation.MethodsIn control groups, pieces of gastrointestinal biopsy tissue were random ly placed in the boxes w ithout (control A) or w ith (control B) record of the number. In the improvement group, the four partitions of the boxes were defned as four quadrants from I to IV respectively, and samples from one to four pieces were placed into corresponding quadrants. All samples were embedded in paraf n, sectioned and stained by HE. The time spent to place the samples into the boxes after sampling (placement time), time spent to collect the specimens during embedding (collection time), and the rate that the sample number observed under the microscope was in accordance w ith the actual number (accordance rate) were compared among the three groups.ResultsBoth the placement time and collection time of the improvement group were obviously shorter than those of control B. There was no signif cant dif erence in the placement time between the improvement group and control A, but the collection time of the former was obviously shorter. The accordance rate of the improvement group was 100%, signif cantly higher than those of the control groups.ConclusionBy redefning the four partitions of four-partition small-aperture embedding boxes and taking advantage of the quantitative relationship between partitions and sample numbers during pathological sampling and regular paraf n embedding processes, the ef ciency and quality of gastrointestinal biopsy slice preparation can be improved.

Gastrointestinal biopsy; four-partition small-aperture embedding box

R-331

A

10.16705/ j. cnki. 1004-1850.2017.03.014

2017-03-19

2017-06-10

李明顯，男(1980年)，漢族，碩士研究生

*通訊作者(To whom correspondence should be addressed)：2312836233@qq.com