郝文君 張子川 李巖峰 王 欣

老年復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍患者唾液和血清中硫氰酸鹽離子濃度的研究

郝文君 張子川 李巖峰 王 欣

目的：探討硫氰酸鹽離子(SCN-)與復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍發(fā)病機制間可能存在的關(guān)系。方法：隨機選取60名(男28，女32)確診為輕型復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍的老年患者和同期來我院體檢的60名(男性30名，女性30名)同齡的健康人為研究對象。分別在患者發(fā)病期(A1組)和無癥狀期(A2組)收集5m l空腹靜脈血和3m l非刺激性唾液，以健康人為對照組(B組)。采用吡啶-巴比妥酸分光光度法檢測SCN-濃度。結(jié)果：A1、A2組唾液SCN-濃度分別為0.61±0.29mmol/L、0.64±0.31mmol/L，組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.052>0.05)。而A2組SCN-血清濃度(24.06±10.31μmol/L)顯著高于A1組(20.39±8.85μmol/L;P=0.000<0.05)。B組的唾液和血清SCN-濃度分別為1.05±0.61mmol/L、36.60±14.81μmol/L，均顯著高于A1、A2組(P=0.000<0.05)。結(jié)論：作為一種機體非酶類抗氧化劑，SCN-可能與復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍存在著某種相關(guān)性。

復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍；硫氰酸鹽離子；氧化應(yīng)激；分光光度法；老年

復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍(Recurrent aph thous ulcer, RAU)是一種臨床常見病因不明的口腔黏膜炎癥性疾病。其典型的臨床表現(xiàn)為潰瘍邊界清晰，形態(tài)為圓形或卵圓形，周圍粘膜充血呈紅暈狀，患者常有燒灼痛感覺，周期性發(fā)作，具有自愈性[1]。流行病學(xué)調(diào)查顯示在60歲以上的老年人群中，RAU患病率高達25%-30%，本病的確切病因至今尚不清楚，近年來有報道提出，影響發(fā)病的因素有：病毒或細菌感染、免疫功能異常、胃腸功能失調(diào)、內(nèi)分泌因素、口腔局部損傷、精神因素、微量元素缺乏等[2]。

有研究顯示，吸煙有利于預(yù)防RAU，降低RAU的發(fā)生率，但其作用機制尚存有爭議[3]。煙草中含有氫氰酸，吸入體內(nèi)后，經(jīng)肝臟代謝生成硫氰化合物，廣泛分布于腦脊液、血液、唾液、胃液、淚液及尿液中。故而，吸煙者體內(nèi)的硫氰酸鹽離子(Thiocyanate,SCN-)濃度要顯著高于不吸煙者[4]。本研究通過測定老年RAU患者發(fā)病期與無癥狀期時唾液和血清SCN-濃度，并與同齡健康人群的SCN-進行比較，旨在探討SCN-與RAU發(fā)病機制間可能存在的關(guān)系，為預(yù)防和治療RAU提供理論依據(jù)。

1.資料與方法

1.1 研究對象 選取2016年3月至2017年2月來我科就診的患有輕型復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍的老年患者60名，其中男性28名，女性32名，年齡61歲-68歲，平均65.38±4.13歲，所有患者均由同一名口腔黏膜病專業(yè)的主治醫(yī)師確診。以同期來我院體檢的同齡健康人60名，(男性30名，女性30名)為對照組，年齡62歲-69歲，平均66.35± 4.44歲。兩組人群具有相似的年齡，性別構(gòu)成，經(jīng)濟條件和社會地位。納入標準：①血常規(guī)、血壓、血糖、肝功能、腎功能均無明顯異常。②無酗酒、吸煙、吸毒者。③女性受試者均絕經(jīng)。④無急性炎癥、肝腎疾病、心血管系統(tǒng)疾病、消化系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病。⑤無天皰瘡、白塞病、紅斑狼瘡、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等免疫系統(tǒng)疾病。⑥無白斑、紅斑、皰疹性咽峽炎、單純皰疹病毒感染、手足口病、扁平苔癬等口腔黏膜疾病。⑦3個月內(nèi)未服用維生素類、甾類化合物、免疫調(diào)節(jié)類等藥物。⑧患者無明顯原因的口腔潰瘍年發(fā)病次數(shù)為3-12次。本研究獲得白求恩國際和平醫(yī)院臨床研究醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(批準號：2015-12-8號)，所有受試者均簽署了臨床科研知情同意書。

1.2 研究方法 所有受試者禁食10-12小時，未吸煙、未刷牙、未喝水及任何可食性液體。收集無刺激性唾液前，先用無菌蒸餾水漱口，靜坐5m in后，由受試者自行向無菌試管內(nèi)吐唾液3m l，2-3次/m in；由相同的護士抽取受試者空腹肘前靜脈血5m l。室溫4℃條件下，分別對唾液和靜脈血進行離心處理，3000r/m in離心10m in，取上層清液(或血清)置于-40℃冰箱保存。所有操作均在上午7-9點完成。

采用吡啶-巴比妥酸分光光度法[5]測定唾液和血清中SCN-濃度。其原理為：SCN-與氯胺丁反應(yīng)生成氯化氰，致使吡啶環(huán)裂開,生成戊烯二醛。而戊烯二醛與巴比妥酸反應(yīng),可生成紫紅色染料,其色度值與SCN-濃度成正比。室溫環(huán)境下，在波長為580nm處，1cm光徑比色杯，蒸餾水調(diào)零，測定吸光度值。實驗分組如下：發(fā)病期的M iRAU患者為實驗1組(A1組)；無癥狀期的同批M iRAU患者為實驗2組(A2組)；無M iRAU的健康人為對照組(B組)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理。計量資料均以均數(shù)±標準差(x±s )表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗和配對t檢驗；計數(shù)資料采用χ2檢驗。檢驗水準為雙側(cè)α=0.05。

2.結(jié)果

兩組受試者的一般臨床資料見表1。A組和B組的性別及年齡均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；圖1、圖2分別為A1組、A2組和B組的唾液和血清SCN-濃度。其中，A1組唾液SCN-濃度為0.61± 0.29mmol/L，與 A2組(0.64±0.31mmol/L)相比，無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.052>0.05)。但均顯著低于B組唾液SCN-濃度(1.05±0.61mmol/L;P= 0.000<0.05)。A1、A2、B組的血清SCN-濃度分別為20.39±8.85μmol/L、24.06±10.31μmol/L、36.60±14.81μmol/L，組間差異顯著(P=0.000< 0.05)。

表1 A、B組受試人群的一般臨床資料

3.討論

復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍是一種臨床常見的口腔黏膜疾病，好發(fā)于唇、頰、舌等部位，牙齦及硬腭少見。多年來，國內(nèi)外的學(xué)者們進行了大量的實驗研究，但仍未能明確其發(fā)病機制[2]。目前臨床醫(yī)師只能依據(jù)患者口腔潰瘍的臨床表現(xiàn)實施對癥治療[6]。

圖1 A1、A2、B組的唾液SCN-濃度(**表示組間差異顯著)

圖2 A1、A2、B組的血清SCN-濃度(**表示組間差異顯著)

臨床流行病學(xué)研究顯示，吸煙者患復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍的機率顯著低于非吸煙者[7]，且吸煙者戒煙后RAU的患病機率明顯增加[8]。而Saw air[3]等對1000名在校大學(xué)生問卷調(diào)查的結(jié)果卻顯示，吸煙者和非吸煙者RAU患病率無統(tǒng)計學(xué)差異，但是吸煙量大、吸煙時間長的學(xué)生其RAU患病率顯著小于吸煙量小、吸煙時間短的人群。也就是說，吸煙預(yù)防RAU是具有劑量和時間依賴性的。但是當口腔內(nèi)出現(xiàn)潰瘍后，吸煙對RAU臨床癥狀的嚴重程度無明顯影響。

氧化應(yīng)激(Oxidativestress;OS)是指機體受到多種因素刺激后，導(dǎo)致體內(nèi)活性氧(Reactive oxygen species;ROS)增多，抗氧化能力降低，打破了機體正常的氧化還原動態(tài)平衡，造成蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸等生物大分子的氧化損傷，而形成的一種嚴重的應(yīng)激狀態(tài)[9]。ROS是機體內(nèi)最常見的自由基，已有研究證明ROS是癌癥、心血管疾病、免疫系統(tǒng)疾病等多種慢性疾病發(fā)病機制的關(guān)鍵因素。Gurel等[10]認為，ROS增多所導(dǎo)致的氧化應(yīng)激反應(yīng)與復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍具有一定的相關(guān)性。

硫氰酸鹽離子(SCN-)作為一種抗氧化劑已被認為在心血管方面具有十分重要的意義[11]。近年來，人們對參與機體氧化應(yīng)激反應(yīng)的酶類物質(zhì)(超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、髓過氧化物酶、谷胱甘肽過氧化物酶等)和非酶類物質(zhì)(尿素、維生素A、維生素C、鋅離子、硒離子、銅離子等)與RAU相關(guān)性的研究較多[12-14]，但是SCN-在RAU發(fā)病機制中的作用目前研究很少，且國內(nèi)尚無相關(guān)報道。唾液中的SCN-與血液中的SCN-可在過氧化物酶(CAT)或髓過氧化物酶(MPO)的催化作用下形成OSCN-，從而減小了過氧化氫(H2O2)對機體的損害，降低了宿主體內(nèi)的ROS[15,16]。有研究顯示[17]，OSCN-具有改變還原型和氧化型谷胱甘肽比率(GSH/GSSG)的作用，而該比率是反應(yīng)機體氧化應(yīng)激狀態(tài)的重要指標。

本研究中，老年RAU患者發(fā)病期和無癥狀期時唾液中的SCN-濃度分別為0.61±0.29mmol/L和 0.64±0.31mmol/L，兩者間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，這與Cherubini等[15]的研究結(jié)果相似。本研究所測定的健康人群唾液中SCN-濃度為1.05±0.61mmol/L，雖略大于Cherubini測得的結(jié)果(0.96±0.77mmol/L)，但與Glatz等[18]的研究結(jié)果相似，這可能與所選受試人群的種族、年齡、性別構(gòu)成及研究方法不同有關(guān)。

本研究不僅對唾液SCN-濃度進行了研究，還比較分析了各組受試者的SCN-血清濃度。結(jié)果顯示，老年RAU患者發(fā)病期的SCN-血清濃度顯著低于無癥狀期(P<0.05)；同齡健康人的SCN-血清濃度為36.60±14.81μm ol/L，低于以往研究的結(jié)果[19]。Assaf[20]等測得的不吸煙的健康男性SCN-血清濃度為60.6μmol/L，不吸煙的健康女性為43.0μmol/L，且女性SCN-血清濃度顯著低于男性。而本研究中女性受試者多于男性，這也可能是本研究所得結(jié)果小于以往研究結(jié)果的原因。

盡管Saw air[3]認為，吸煙對RAU的預(yù)防效果是由于①粘膜的角化程度增加，角質(zhì)蛋白層增厚，對外界的物理和化學(xué)刺激抵抗力增強。②尼古丁可誘導(dǎo)腎上腺類固醇激素增多，減少TNF-α、IL-1、IL-6，從而影響機體的炎癥性免疫應(yīng)答。但是本研究的結(jié)果顯示SCN-水平與RAU是存在一定相關(guān)性的，這也可能是吸煙降低RAU發(fā)病機率的一個重要因素。

機體獲取SCN-的途徑包括吸煙和食物，大白菜、蘿卜等根莖類蔬菜為其主要來源。故而，作者認為適量的食用該類蔬菜，提高機體的SCN-血清濃度，可能會減少RAU的發(fā)病機率，有助于RAU的預(yù)防和治療。

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A study of the concentrations of salivary and serum thiocyanate in elderly patients w ith recurrent aphthous ulcer

HAO Wen-jun,ZHANG Zi-chuan,LI Yan-feng,WANG Xin
(Department of Stomatology,First Affiliated Hospital of PLA General Hospital,Beijing 100048,China)

Objective:The aim of this study was to investigate the possible relationship between thiocyanate(SCN-)and the pathogenesis of recurrent aphthous ulcer(RAU).M ethods:Sixty elderly patients(28 males,32 females)having been diagnosed with minor recurrent aphthous ulcer(M iRAU)and sixty age-matched healthy persons(30 males,30 females) being taken normal medical examination in our hospital were enrolled.After an overnight fast,5 m l venous blood and 3m l of unstimulated saliva samples were obtained from the patients w ith current active lesion of RAU(Group A1),the same patients in the rem ission phase of RAU(Group A2),healthy persons(Group B),respectively.The concentrations of saliva and serum SCN-were measured by the spectrophotometric method.Results:A1,A2group saliva SCN-concentration were 00.61±0.29mmol/L、0.64±0.31mmol/L,and there was no significant difference between the groups(P=0.052＞0.05). The serum thiocyanate concentration of group A2(24.06±10.31μmol/L)was significantly higher than that of group A1(20.39±8.85μmol/L;P=0.000＜0.05).The concentrations of salivary and serum thiocyanate of group B were 1.05± 0.61mmol/L、36.60±14.81μmol/L,which were significantly higher than those values of group A1and group A2(P=0.000＜0.05).Conclusion:As a kind of nonenzymatic antioxidant,SCN-may have some relevance to recurrent aphthous ulcer.

recurrent aphthous ulcer;thiocyanate;oxidative stress;spectrophotometric method;elderly

R781.5

A

1672-2973(2017)03-0149-04

2017-01-25)

郝文君 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院口腔科 碩士生北京 100048解放軍政治工作部黃寺第一干休所 主治醫(yī)師北京 100120

張子川 解放軍白求恩國際和平醫(yī)院口腔科 主治醫(yī)師石家莊 050082

李巖峰 通訊作者 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院口腔科主任醫(yī)師 教授 北京 100048

王 欣 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院口腔科 碩士生北京 100048