董 鑫 吳承芳 劉 彤 邵 健

極固寧與高露潔專效抗敏牙膏聯(lián)合封閉牙本質(zhì)小管的體外研究

董 鑫 吳承芳 劉 彤 邵 健

目的：觀察極固寧與高露潔專效抗敏牙膏兩種脫敏藥物聯(lián)合應(yīng)用對牙本質(zhì)小管的堵塞作用，為牙本質(zhì)過敏的治療提供理論依據(jù)。方法：收集新拔除的第三磨牙84顆，制備成牙本質(zhì)過敏模型后隨機(jī)分為空白對照組(n=12)、極固寧組(n=24)、高露潔專效抗敏牙膏組(n=24)、聯(lián)合應(yīng)用組(n=24)。從涂布脫敏藥物的3組中各隨機(jī)抽取12個樣本進(jìn)行刷牙實驗。掃描電鏡下觀察牙本質(zhì)小管的堵塞情況，并采用SPSS17.0數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)對結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果：空白對照組牙本質(zhì)小管完全開放，極固寧、高露潔專效抗敏牙膏、聯(lián)合應(yīng)用組均能有效封閉牙本質(zhì)小管，聯(lián)合應(yīng)用組封閉效果最佳。經(jīng)過刷牙實驗聯(lián)合應(yīng)用組的封閉效果仍是最好的。結(jié)論：脫敏劑的聯(lián)合應(yīng)用具有較好的封閉性和抗磨耗性。

牙本質(zhì)過敏；極固寧；高露潔專效抗敏牙膏；牙本質(zhì)小管

牙本質(zhì)過敏癥(Dentin Hypersensitivity,DH)是指當(dāng)暴露的牙本質(zhì)受到機(jī)械刺激，溫度刺激(冷、熱)，化學(xué)刺激(酸、甜)，滲透性刺激或氣流刺激后，引起疼痛和不適[1]且不能歸因于其他原因的一種病損。它可以是尖銳的一過性疼痛也可以無明顯感覺。2008年我國牙本質(zhì)過敏癥流行病學(xué)調(diào)查顯示牙本質(zhì)過敏癥的發(fā)病率為 3%-98%[2]，其中50-59歲為高發(fā)年齡段，且女性高于男性[3]。隨著牙本質(zhì)過敏癥發(fā)病率的升高多種類型的脫敏藥物被運用于臨床，即刻效果尚可，而耐久性較差，臨床將脫敏方法聯(lián)合應(yīng)用來提高脫敏效果。本研究通過將極固寧和高露潔專效抗敏牙膏聯(lián)合應(yīng)用，并測定其牙本質(zhì)小管的堵塞效果，為脫敏藥物的聯(lián)合應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1.材料與方法

1.1 樣本來源及制備 選取北京煤炭總醫(yī)院口腔科因阻生拔除的新鮮完整的年輕第三磨牙84顆。去除牙齒表面的結(jié)石及因拔牙帶出的牙周膜，牙齦等軟組織后于生理鹽水中超聲震蕩2m in，沖洗干凈。然后置于4℃的生理鹽水中備用。

1.2 主要材料和設(shè)備 極固寧(Italmed，意大利)；高露潔專效抗敏牙膏(高露潔棕欖公司，美國)；Gluma酸蝕劑(中國賀利氏古莎齒科有限公司)；KQ118超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；生理鹽水；慢速渦輪手機(jī)(kavo公司，德國)；高露潔電動牙刷(高露潔棕欖公司，美國)；E-1010型離子衍射儀(日立公司，日本)；S-4800型場發(fā)射掃描電鏡(日立公司，日本)。

1.3 樣本制備 將所有的離體牙，在釉牙骨質(zhì)界上下1mm處用高速渦輪機(jī)單面金剛砂片垂直于牙長軸切斷，制成厚約2mm的牙本質(zhì)盤，細(xì)磨石打磨，超聲震蕩1m in，儲存于4℃的生理鹽水中備用。

1.4 分組及處理 所有牙本質(zhì)盤的工作面均用35%的Gluma酸蝕劑酸蝕20s，沖洗干凈后用三用槍輕吹30s進(jìn)行干燥。將所有處理過的牙本質(zhì)盤隨機(jī)分組，第一組空白對照組(n=12)，用小棉棒蘸取蒸餾水涂布1m in；第二組極固寧組(n=24)，用小棉棒蘸取極固寧1號液體涂擦于干燥牙面上約10s，然后用同樣的方法立即涂擦極固寧2號液體，重復(fù)兩次；第三組高露潔專效抗敏牙膏組(n=24)，用小棉棒蘸取脫敏牙膏涂抹于牙本質(zhì)面上，1m in后使用蒸餾水沖洗并干燥牙面；第四組(n=24)按組二和組三的方法先涂布極固寧再涂布高露潔專效抗敏牙膏;然后從涂布脫敏劑的3組中分別隨機(jī)抽取處理過的牙本質(zhì)盤各12個，將抽取的樣本放置于生理鹽水中靜置24h后，使用電動牙刷以正常的力度刷牙100次(每次30s)。

1.5 掃描電鏡SEM(scanning electron m icroscope)觀察 將所有樣本干燥，離子濺射儀鍍金，掃描電鏡下觀察樣本表面的超微結(jié)構(gòu)及牙本質(zhì)小管的堵塞情況。并對電鏡圖像隨機(jī)取點，拍照。

1.6 圖像分析處理 應(yīng)用Image-Pro Plus6圖像分析軟件對SEM(scanning electron m icroscope)圖像進(jìn)行分析處理，此軟件可以自動選中開放牙本質(zhì)小管管口區(qū)域并對其平均直徑和相對面積進(jìn)行自動測算。

1.7 統(tǒng)計分析 應(yīng)用SPSS17.0軟件包中的單因素方差分析對各圖片中牙本質(zhì)小管的平均直徑和相對面積進(jìn)行比較，P<0.05表示差異具有顯著性。

2.結(jié)果

2.1 牙本質(zhì)表面掃描電鏡觀察 由圖1和圖2觀察可見，空白對照組：牙本質(zhì)表面光滑，干凈，牙本質(zhì)小管管口清晰可見并呈完全開放狀態(tài)。極固寧組：牙本質(zhì)小管內(nèi)充滿晶體物質(zhì)，且牙本質(zhì)表面被層層的鱗狀晶體物質(zhì)覆蓋；極固寧涂布組經(jīng)過刷牙處理牙本質(zhì)小管口內(nèi)的晶體物質(zhì)大量流失，原本被覆蓋的牙本質(zhì)小管再次暴露。高露潔專效抗敏牙膏組：發(fā)現(xiàn)大多數(shù)的沉淀物沉積在牙本質(zhì)表面，呈分層狀，而牙本質(zhì)小管內(nèi)的沉淀物多疏松。高露潔專效抗敏牙膏涂布組經(jīng)過刷牙處理后牙本質(zhì)小管開放數(shù)目是三組中最多的。聯(lián)合應(yīng)用組：牙體表面有較厚的沉積物，牙體表面被完全覆蓋。聯(lián)合應(yīng)用組經(jīng)過刷牙處理后牙體表面的沉積物雖有減少，但是大部分的牙本質(zhì)小管內(nèi)仍然被晶體物質(zhì)所堵塞。

圖1 涂布脫敏劑組

2.2 統(tǒng)計分析結(jié)果 四組間牙本質(zhì)小管口平均直徑比較總體具有顯著性差異(F=88.376,P=0.000)；四組間平均直徑兩兩分別對比均具有顯著性差異(P<0.05)。四組間牙本質(zhì)小管口相對面積比較總體具有顯著性差異(F=2753.652,P=0.000)；四組間兩兩比較均具有顯著性差異(P<0.05)三組間牙本質(zhì)小管口平均直徑對比總體具有顯著性差異(F=35.422,P=0.000);三組間兩兩對比均具有顯著性差異(P<0.05)。三組間牙本質(zhì)小管口相對面積對比總體具有顯著性差異(F=140.473,P=0.000);三組間兩兩對比均具有顯著性差異(P<0.05)。由表1可以看出聯(lián)合應(yīng)用組的牙本質(zhì)小管開放管口的平均直徑和相對面積明顯小于極固寧組和高露潔組。

圖2 磨損組

表1 刷牙實驗前后各組間牙本質(zhì)小管口平均直徑和相對面積

3.討論

本實驗結(jié)果顯示牙本質(zhì)小管的封閉效果從強(qiáng)到弱依次是脫敏劑聯(lián)合應(yīng)用組、極固寧、高露潔專效抗敏牙膏。脫敏劑聯(lián)合應(yīng)用組的封閉性和抗磨耗性在三者中是最好的。

牙本質(zhì)過敏癥的發(fā)病機(jī)制目前尚不十分清楚，主要有以下三種假說[4]：(1)神經(jīng)終末傳導(dǎo)學(xué)說：認(rèn)為牙本質(zhì)中存在牙髓神經(jīng)，通過牙本質(zhì)小管可將刺激傳到牙髓，從而引起牙髓的應(yīng)激反應(yīng)；(2)牙本質(zhì)細(xì)胞傳導(dǎo)學(xué)說：認(rèn)為成牙本質(zhì)細(xì)胞的突起與神經(jīng)之間存在突觸樣關(guān)系，當(dāng)受到外界刺激后，可行使神經(jīng)感受器的功能，將刺激傳至中樞；(3)液體動力學(xué)說：牙本質(zhì)小管內(nèi)存在與牙髓相通的牙本質(zhì)小管液，在受到外界刺激后小管內(nèi)的液體迅速流動，將刺激傳到牙髓組織引起牙髓神經(jīng)纖維的興奮而引起疼痛。其中液體動力學(xué)說是被大多數(shù)學(xué)者所接受的學(xué)說[5]。有研究表明牙本質(zhì)過敏癥的小管直徑是正常牙本質(zhì)小管直徑的兩倍，牙本質(zhì)小管的數(shù)量也較正常的牙體多[6]。基于此理論，通過阻塞牙本質(zhì)小管，減小牙本質(zhì)小管的直徑，降低牙本質(zhì)小管內(nèi)液體的流動性可以減輕牙本質(zhì)的過敏癥狀。Mordan[7]等認(rèn)為牙本質(zhì)過敏模型是高可信度實驗結(jié)果的關(guān)鍵。而牙本質(zhì)小管的數(shù)目，直徑受年齡、磨耗等因素的影響，所以本實驗選用的是因阻生拔除的新鮮、完整的年輕第三磨牙。同時有研究表明[8]牙體頰側(cè)的頸部區(qū)域為牙本質(zhì)過敏癥發(fā)生的最常見部位，而釉牙骨質(zhì)界上下1mm區(qū)域內(nèi)的牙本質(zhì)盤為最接近牙本質(zhì)過敏的區(qū)域。目前，對于牙本質(zhì)過敏癥的體外研究主要有通過電鏡對牙本質(zhì)表面的觀察；對牙本質(zhì)礦物成分和含量的檢測；牙本質(zhì)滲透性的研究。而本實驗選用的是體外研究中最常用的掃描電鏡觀察，它具有分辨率高、放大率高及可連續(xù)調(diào)節(jié)等優(yōu)點[9]，它能將牙本質(zhì)小管的堵塞情況和牙本質(zhì)表面的狀況更加直觀的呈現(xiàn)出來。

極固寧由兩種液體組成：I液(碳酸鉀、磷酸鉀、羥苯甲酯鈉、去離子水)和Ⅱ液(苯甲酸鈣、氯化鈣、氯化鍶、去離子水)，是臨床上最常用的鉀鹽類脫敏劑，而且是一種具有雙重脫敏效果的脫敏劑。一方面通過阻斷小管中液體流動起到脫敏作用：當(dāng)兩種液體發(fā)生反應(yīng)時可在牙本質(zhì)表面產(chǎn)生不溶性磷酸鍶、磷酸鈣、碳酸鍶、碳酸鈣、等結(jié)晶物，可深度封閉開放的牙本質(zhì)小管，從而起到阻斷液體流動的作用；另一方面通過阻斷神經(jīng)傳導(dǎo)起到脫敏作用，當(dāng)兩種液體發(fā)生反應(yīng)時釋放的鉀離子可去極化小管中的神經(jīng)末梢，從而干擾了疼痛信號的傳導(dǎo)，使神經(jīng)纖維對疼痛的感覺不再敏感，而對牙齒起到脫敏的作用。雖然極固寧具有雙重脫敏效果但是許多研究報道顯示極固寧的長期效果較差，郭丹麗[10]等研究發(fā)現(xiàn)原本被極固寧封閉的牙本質(zhì)小管在經(jīng)過磨耗以后再次開放?？赡苁怯捎跇O固寧脫敏劑滲入牙本質(zhì)小管的深度不足及其沉淀物不能很好的附著于牙本質(zhì)小管壁上有關(guān)。

高露潔專效抗敏牙膏屬于鈣鹽類脫敏藥物，其價格便宜，操作簡單，容易買到而成為日常生活中患者治療牙本質(zhì)過敏癥選用的方式[11]。其主要成分為精氨酸、碳酸鈣以及1450ppm氟，體液環(huán)境下精氨酸可以和內(nèi)源性鈣磷相互吸附形成一個陽性基團(tuán)，促使鈣磷沉積在牙本質(zhì)表面，從而物理性的堵塞開放的牙本質(zhì)小管。從本實驗可以看出，經(jīng)過刷牙實驗高露潔專效抗敏牙膏組有許多牙本質(zhì)小管再次開放，這與陳蕾[12]等人的實驗結(jié)果相一致。

脫敏劑聯(lián)合應(yīng)用組在三組中是脫敏效果最好的一組，這可能是由于當(dāng)先后涂布極固寧I液和Ⅱ液后，液體滲入到牙本質(zhì)小管內(nèi)并在小管內(nèi)形成結(jié)晶物質(zhì)。再涂布高露潔專效抗敏牙膏后其形成的團(tuán)塊狀沉積物沉淀在牙齒的表面將極固寧溶液形成的結(jié)晶物質(zhì)封閉在牙本質(zhì)小管內(nèi)，并且起到了抵擋外界摩擦的作用，從而減少了小管內(nèi)結(jié)晶物質(zhì)的流失。極固寧為臨床上常用的脫敏藥物，他的涂布一般由醫(yī)生執(zhí)行。而高露潔專效抗敏牙膏為日常生活中最常用且可以自行涂抹的脫敏藥物，兩者的聯(lián)合應(yīng)用可以使臨床脫敏與日常脫敏相結(jié)合，不但提高了脫敏的效果，而且也為患者提供了便利。

脫敏藥物的聯(lián)合應(yīng)用可以達(dá)到較好的牙本質(zhì)小管封閉效果，其耐久性和封閉性也較好，但是本實驗為體外實驗只能對口腔環(huán)境極力模仿并不能真正代表臨床，所以脫敏藥物的聯(lián)合應(yīng)用還需要臨床的進(jìn)一步驗證。

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The effect of Green QrTMcombined w ith Colgate anti-sensitivity toothpastea on dentinal tubules－an in vitro study

DONG Xin,WU Cheng-fang,LIU Tong,SHAO Jian
(China meitan general hospital,Beijing 100028,China)

Objective:To observe investigate the sealing effect of Green QrTMcombined w ith Colgate anti-sensitivity toothpastel on dentin tubule,in order to provide theoretical basis for clinical treatment dentin hypersensitivity.M ethods:A total of 84 new ly extracted molars were collected.The dentin hypersensitivity model was prepared and then random ly divided into control group(n=12),Green QrTMgroup(n=24),Colgate anti-sensitivity toothpaste group(n=24),Green QrTMcombined w ith Colgate anti-sensitivity toothpastea group(n=24).Twelve teeth out of each desensitizer group were selected for tooth brushing test.Occluding effect on dentinal tubules was observed by SEM,then the plugging rate of dentin tubules was statistically analyzed w ith SPSS 17.0 software package.Results:Dentin tubules in control group were completely open, while the exposed tubule was almost occluded in the Green QrTMgroup,Colgate anti-sensitivity toothpaste group and Green QrTMcombined w ith Colgate anti-sensitivity toothpastea group.Among them,Green QrTMcombined w ith Colgate antisensitivity toothpastea group displayed the best occlusion effect and demonstrated better occluding ability after the tooth brushing test.Conclustion:Green QrTMcombined w ith Colgate anti-sensitivity toothpastea group were better in occluding ability and abrasion resistance.

Dentin allergies;Green QrTM;Colgate anti-sensitivity toothpaste;dentinal tubules

R781

A

1672-2973(2017)03-0132-04

2016-12-19)

董 鑫 煤炭總醫(yī)院 碩士生 北京 100028

吳承芳 通訊作者 煤炭總醫(yī)院 主任醫(yī)師 北京 100028

劉 彤 煤炭總醫(yī)院 碩士生 北京 100028

邵 健 煤炭總醫(yī)院 碩士生 北京 100028