楊滋淵 ，惠愛(ài)武 ，高敬龍，趙 崗， 楊甫昭， 解 娟△

1.陜西省人民醫(yī)院(西安710068)，2.陜西省中醫(yī)藥研究院(西安710003)

·實(shí)驗(yàn)研究·

舒通片治療原發(fā)性頭痛的藥效學(xué)研究*

楊滋淵1，惠愛(ài)武2，高敬龍1，趙 崗2， 楊甫昭2， 解 娟1△

1.陜西省人民醫(yī)院(西安710068)，2.陜西省中醫(yī)藥研究院(西安710003)

目的:研究舒通片對(duì)偏頭痛模型大鼠的作用及鎮(zhèn)痛作用。方法: 采用皮下注射硝酸甘油復(fù)制大鼠偏頭痛模型，采用時(shí)間分段計(jì)數(shù)法持續(xù)觀察造模后大鼠耳紅、撓頭等行為學(xué)變化情況，酶免法測(cè)定各組大鼠血清 5-羥色胺 ( 5-HT)、去甲腎上腺素(NA)和組織胺(Histamine)含量；鎮(zhèn)痛作用采用小鼠扭體法。結(jié)果: 舒通片2.4 g/kg和1.2 g/kg組大鼠耳紅消失時(shí)間顯著縮短(P<0. 01 或P< 0.05)；舒通片各劑量組在30～120 min不能有效降低模型大鼠撓頭次數(shù)(P>0.05)，對(duì)外周血5-HT含量、組胺和去甲腎上腺素?zé)o明顯影響(P>0.05)，舒通片3.6 g/kg、1.8 g/kg可明顯減少小鼠扭體次數(shù)，表明舒通片有明顯的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)論:舒通片能使大鼠耳紅消失時(shí)間顯著縮短，減少小鼠扭體次數(shù)，具有明顯鎮(zhèn)痛作用。

舒通片來(lái)源于臨床經(jīng)驗(yàn)方，驗(yàn)之臨床取得了很好療效。其功能為：袪風(fēng)通絡(luò)止痛，治療以經(jīng)脈不通，阻遏氣機(jī)，清陽(yáng)失養(yǎng)所致的血管性頭痛。為了探討本方的作用機(jī)理，本研究建立大鼠偏頭痛模型觀察藥物的作用，小鼠鎮(zhèn)痛試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證其藥理作用，為本品臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

材料與方法

1 試驗(yàn)材料

1.1 器材：電子天平型號(hào)：AL104，精確度：0.1 mg，(METTLERTOLEDO生產(chǎn))。YP1201N電子天平 分度值：0.1 g(上海精密儀器有限公司生產(chǎn))。721型分光光度計(jì) (上海第三分析儀器廠)。

1.2 試劑：硝酸甘油注射液：北京益民藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H11020289，規(guī)格：1 ml：5 mg，(產(chǎn)品批號(hào)：20140321)，冰醋酸(批號(hào)：880512 )西安化學(xué)試劑廠。

1.3 動(dòng)物：KM小鼠，體重18～22 g，SD大鼠，體重180～220 g，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量許可證號(hào)：SCXK(陜)2012-003。

1.4 陽(yáng)性藥：鹽酸氟桂利嗪膠囊(西比靈)：國(guó)藥準(zhǔn)字H10930003，規(guī)格：每粒5 mg(以氟桂利嗪計(jì))，批號(hào)131021428。用法用量：口服，1粒/次，2次/d。

吲哚美辛片(消炎痛)，臨汾奇林藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H14020549，規(guī)格：每片25 mg，批號(hào)：1307022。

1.5 受試藥：舒通片(批號(hào)：130619)；提供單位：陜西省人民醫(yī)院。規(guī)格：每片0.4 g。每克相當(dāng)于原生藥2.5 g。用法與用量：6粒/次，3次/d。功能主治：袪風(fēng)通絡(luò)止痛，治療以經(jīng)脈不通，阻遏氣機(jī)，清陽(yáng)失養(yǎng)所致的血管性頭痛。

2 試驗(yàn)方法

2.1劑量設(shè)置：本品人用量為每日0.12 g/kg，經(jīng)預(yù)試確定大鼠大、中、小劑量為 2.4 g/kg、1.2 g/kg、0.6 g/kg，分別相當(dāng)于臨床人用量20、10、5倍。經(jīng)預(yù)試確定小鼠大、中、小劑量為3.6 g/kg、1.8 g/kg、0.9 g/kg，分別相當(dāng)于臨床人用量30、20、10倍。

2.2 大鼠偏頭痛模型：參考文獻(xiàn)[1～3]，SD大鼠，雌雄各半，體重180～220 g，隨機(jī)分為六組，每組10只，分別為第2組空白對(duì)照組造模前灌胃去離子水10 ml/kg、第2組模型對(duì)照組造模前灌胃去離子水10 ml/kg，第3組陽(yáng)性對(duì)照組造模前灌胃西比靈1.67 mg/kg、第4-第6組造模前分灌胃舒通片2.4、1.2、0.6 g/kg。連續(xù)給藥7 d，每天一次，末次給藥后 30 min，除空白對(duì)照組外，其余各組均皮下注射硝酸甘油注射劑10 mg/kg，復(fù)制偏頭痛模型， 觀察大鼠造模后耳紅出現(xiàn)和消失的時(shí)間，從造模之時(shí)起，把每 30 min 作為一個(gè)時(shí)間段，采用持續(xù)時(shí)間分段計(jì)數(shù)的方法觀察大鼠造模后，在每一時(shí)間段撓頭的次數(shù)，連續(xù)觀察4個(gè)時(shí)間段，分別記錄 4 個(gè)時(shí)間段的撓頭總數(shù)。

2.3 酶聯(lián)免疫試驗(yàn)：大鼠皮下注射硝酸甘油注射劑4 h后，以10%烏拉糖麻醉，頸動(dòng)脈插管取血， 2000 r/min離心10 min，分離血清，-70 ℃保存，用于測(cè)定5-HT、去甲腎上腺素、組織胺，檢測(cè)嚴(yán)格按免疫試劑盒操作說(shuō)明書進(jìn)行。

2.4 扭體反應(yīng)：參考文獻(xiàn)[4]方法，取小鼠50只，體重18～22 g，隨機(jī)分為5組，每組10只，♀♂各半。第1組為正常對(duì)照組，灌胃去離子水20 ml/kg；第2組為陽(yáng)性對(duì)照組，灌胃消炎痛15mg/kg(在實(shí)驗(yàn)第五天灌胃一次)；第3～5組灌胃舒通片3.6、1.8、0.9 g/kg；連續(xù)5 d，末次給藥后30min，腹腔注射0.8%冰醋酸0.2 ml/鼠，5 min后，計(jì)數(shù)10 min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)(腹部收縮內(nèi)凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行)。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 舒通片對(duì)硝酸甘油致大鼠偏頭痛模型的影響 正常對(duì)照組未出現(xiàn)耳紅的癥狀，其它各組大鼠在造模 5min 左右皆出現(xiàn)耳紅癥狀 (P<0.01) ；與模型對(duì)照組比，各組耳紅出現(xiàn)時(shí)間無(wú)顯著性差異；西比靈組、舒通片2.4 g/kg和1.2 g/kg組大鼠耳紅消失時(shí)間顯著縮短(P<0. 01 或P< 0.05)，見(jiàn)表1 。

2 舒通片對(duì)硝酸甘油致大鼠撓頭次數(shù)的影響 正常對(duì)照組只在少數(shù)幾個(gè)時(shí)間段里偶爾有一兩次撓頭動(dòng)作，而模型組在 30 ～ 120 min 有明顯的撓頭現(xiàn)象 (P<0.01)；與模型組比，西比靈組在造模后120 min 內(nèi)能顯著減少撓頭次數(shù) (P<0.05)，舒通片各劑量組在 30 ～ 120 min對(duì)降低模型大鼠撓頭次數(shù)無(wú)明顯影響(P>0.05) ，見(jiàn)表2 。

表1 舒通片對(duì)硝酸甘油致大鼠耳紅出現(xiàn)和消失時(shí)間的影響

注：與正常對(duì)照組比較△△P<0.01，與模型組比較*P<0.05，**P<0.01

表2 舒通片對(duì)硝酸甘油致大鼠撓頭次數(shù)的影響

注：與正常對(duì)照組比較△△P<0.01，與模型組比較*P<0.05，**P<0.01

3 舒通片對(duì)偏頭痛大鼠5-HT、去甲腎上腺素、組織胺的影響 模型鼠外周血5-HT明顯降低，組織胺明顯升高，西比靈組能夠明顯的提高外周血5-HT含量，明顯抑制組胺的升高從而減輕疼痛，對(duì)外周血中去甲腎上腺素?zé)o明顯影響。舒通片各劑量組對(duì)外周血5-HT、 組織胺、去甲腎上腺素?zé)o明顯影響(P>0.05)，見(jiàn)表3。

表3 舒通片對(duì)5-HT、去甲腎上腺素、組織胺的影響

注：與正常對(duì)照組比較△P<0.05，△△P<0.01，與模型組比較*P<0.05，**P<0.01

4 舒通片對(duì)冰醋酸致小鼠疼痛的影響 舒通片3.6 g/kg、1.8 g/kg及吲哚美辛片15 mg/kg可明顯減少小鼠扭體次數(shù)，表明舒通片有明顯的鎮(zhèn)痛作用，見(jiàn)表4。

表4 舒通片對(duì)小鼠扭體反應(yīng)的影響

注：與正常對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01

討 論

舒通片是我院老年神經(jīng)內(nèi)科俞世勛主任根據(jù)多年治療原發(fā)性頭痛的臨床經(jīng)驗(yàn)，組方而成的純中藥制劑，屬陜西省人民醫(yī)院院內(nèi)中藥制劑，已應(yīng)用于臨床20多年，臨床療效良好，是治療原發(fā)性頭痛的顯效方劑。臨床研究表明，舒通片治療600例原發(fā)性頭痛，顯效 542例，有效26例，其總有效率94.6% ，服藥治療期間未發(fā)現(xiàn)有明顯不良反應(yīng)。該藥除了能顯著減輕頭痛程度，減少頭痛發(fā)作次數(shù)，縮短頭痛持續(xù)時(shí)間之外，還能有效的緩解頭昏頭脹、惡心欲吐、情緒不佳、睡眠不安等癥狀。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為“不通則痛”，“痛則不通”，本方即是在此理論基礎(chǔ)上，以袪風(fēng)通絡(luò)止痛為法，治療以經(jīng)脈不通，阻遏氣機(jī)，清陽(yáng)失養(yǎng)所致的原發(fā)性頭痛，其主要成分有海風(fēng)藤、柴胡、葛根、羌活、白芷、丹參、細(xì)辛、五味子等，海風(fēng)藤祛風(fēng)通絡(luò)，柴胡善治少陽(yáng)經(jīng)頭痛(偏頭疼)，羌活治太陽(yáng)經(jīng)頭疼(后腦及前額頭疼)，白芷治陽(yáng)明經(jīng)頭疼(眉棱額骨通)為主藥。丹參、細(xì)辛、葛根散寒化痰、活血通絡(luò)、開(kāi)竅止痛、清熱除煩為輔藥。山楂消食積，散瘀滯，資料報(bào)道能降壓、強(qiáng)心、擴(kuò)張血管、降低膽固醇等作用。甘草和中，調(diào)和諸藥，為佐使藥。諸藥合用共成祛風(fēng)通絡(luò)，主治原發(fā)性頭痛。

“頭為人之元首，性命之樞機(jī)，思維之器官”，頭痛的危害極大，不僅嚴(yán)重影響人們的身心健康與生活質(zhì)量，更影響人們的思維能力。長(zhǎng)期頭痛還容易誘發(fā)腦中風(fēng)、癡呆、腦梗塞、偏癱等疾病，危及生命。目前治療原發(fā)性頭痛的藥物很多，臨床常以非甾體類或阿片類鎮(zhèn)痛藥物為主，這些藥物都是對(duì)癥治療，對(duì)緩解頭痛等癥狀方面有一定作用，但副作用較大。課題組對(duì)臨床療效確切，中醫(yī)藥特點(diǎn)明顯，組方合理，劑型確定，并具有較好臨床基礎(chǔ)的院內(nèi)中藥制劑舒通片進(jìn)行規(guī)范化的研究與試驗(yàn)，為了探討本方的作用機(jī)理，本研究建立大鼠偏頭痛模型觀察藥物的作用，結(jié)果舒通片組能使大鼠耳紅消失時(shí)間顯著縮短，小鼠鎮(zhèn)痛試驗(yàn)觀察舒通片組可明顯減少小鼠扭體次數(shù)，表明舒通片有明顯的鎮(zhèn)痛作，本試驗(yàn)的藥效學(xué)研究為中藥鎮(zhèn)痛藥的研發(fā)奠定了基礎(chǔ)，同時(shí)也為其進(jìn)一步應(yīng)用于臨床提供理論依據(jù)。

[1] 楊 勝，張定堃，蘇柘僮，等.川芎-白芷藥對(duì)不同配比不同劑型對(duì)偏頭痛動(dòng)物模型的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17(14)：225-228.

[2] 張 慧，李冬霞，栗志勇，等.芎芷石膏湯對(duì)硝酸甘油致偏頭痛大鼠血漿 NO，NOS，CGRP及腦中 5-HT，5-HIAA 含量的影響[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2014，20(17)：175-180.

[3] 趙珺彥，樓招歡，夏伯侯，等. 天麻鉤藤飲不同萃取部位對(duì)硝酸甘油致偏頭痛模型大鼠的影響[J]. 浙江中醫(yī)雜志，2014，49(3)：172-174.

[4] 陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M]. 2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006:378-379.

(收稿：2017-01-26)

The pharmacodynamics study of Shu tong tablet on primary headache

Yang Ziyuan， Hui Aiwu， Gao Jinglong ，et al.
Shaanxi Provincial People’s Hospital(Xi’an710068)

Objective: To study the effect of Shu Tong tablet on migraine model rats. Methods: The rats model of migraine were contructed by injected with nitroglycerin subcutaneously. The behavioral changes of rats，such as redding ear and scratching head， were continuous observed by time segment counting method. The serum serotonin (serotonin) 5-HT， norepinephrine (NA) and histamine (Histamine) content were detected through enzyme - linked immunoassay， analgesic effect were analysed by mouse writhing method. Results: The time of redding ear was significantly shortened in 2.4 g/kg and 1.2 g/kg (P<0.01 orP<0.05). Shu Tong tablet， in anyone dose， could not effectively reduce the frequency of scratching head in 30 ～ 120 min (P>0.05). Shu tong table was no significant effect on the content of 5-HT， histamine and norepinephrine in peripheral blood in all groups (P> 0.05). The dose of 3.6g / kg and 1.8g / kg were significantly decreased the frequency of writhing， which show Shu Tong table has obvious analgesic effect. Conclusion: Shu Tong tablet can significantly reduce the time of rat redding ear， reduce the frequency of writhing， with significant analgesic effect.

Headache/traditional Chinese medicine therapy Shu tong tablet Animal Experimentation

*陜西省自然科學(xué)基礎(chǔ)研究計(jì)劃項(xiàng)目(2014JM4173)

頭痛/中醫(yī)藥療法 舒通片 動(dòng)物，實(shí)驗(yàn)

R749.61

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.07.080

△通訊作者