王明川+于濤

摘要 [目的]研究不同培養(yǎng)代料對黑木耳中3種抗氧化物質含量的影響，比較3個品種總酚、總黃酮及黑色素含量的差異。[方法]測定樣品的總酚、總黃酮和粗黑色素等抗氧化物質含量，測定方法分別為福林酚法、比色法及黑色素堿提法。[結果]相比傳統(tǒng)椴木代料培養(yǎng)，混合木屑代料種植3種黑木耳的總黃酮含量有顯著的增加，粗黑色素的產量有所減少，而對黑木耳中的總酚含量影響不大。[結論]椴木、樺木、柞木等雜木屑培養(yǎng)代料較傳統(tǒng)椴木代料培養(yǎng)在保持對黑木耳中總酚、粗黑色素產量影響相同的條件下，可獲得更多含量的總黃酮。

關鍵詞 黑木耳；總黃酮；粗黑色素；抗氧化；總酚

中圖分類號 S646.6 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2017）09-0081-02

Abstract [Objective]To study the effects of different culture media on the contents of 3 kinds of antioxidants in Auricularia auricula，and compare the content of total phenolics，total flavonoids and melanin in the 3 varieties.[Method] The content of total phenolic antioxidants，determination of total flavonoids and the crude melanin，determination method were Folin phenol，colorimetry and alkali extraction of melanin.[Results] Compared with the traditional material basswood culture，significantly increased the content of total flavonoids of mixed sawdust substitute planting 3 kinds of Auricularia auricula，crude melanin production decreased，but little effect on the total phenolic content of black fungus.[Conclusion] Basswood，birch，oak and other wood sawdust cultivation material than the traditional culture while maintaining the basswood material total phenolic，Auricularia auricula crude melanin yield under the same conditions，it can get more content of total flavonoids.

Key words Auricularia auricula；total flavonoids；crude melanin；antioxidation；total phenolics

黑木耳（Auricolaria auricula）是木耳科木耳屬可食用的高等膠體真菌，別名木耳、黑木耳、細木耳，是一種食藥兼用菌，也是我國的傳統(tǒng)食品和出口貿易食品，具有藥食兩用價值，具有滋補強壯、扶正固本之功效[1-2]。黑木耳作為子實體，是一種黑褐色可食用的大型真菌，其含有豐富的黑色素，是中國越來越流行的的“黑色食品”之一。目前，有許多關于黑色素的分離和特性研究的報道，并且黑色素被認為是黑色素食品中最為重要的功能成分之一，且具有一定的抗氧化性[3-4]，此外黑木耳中還含有黃酮類等抗氧化物質[5]。本文針對不同代料培養(yǎng)對黑木耳中總酚、總黃酮、黑色素含量等抗氧化成分的影響進行研究，其結果可為提升黑木耳中抗氧化物質含量具有一定參考意義。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

用于試驗的3個品種，即林耳2號、林耳5號及對二筋，均取自牡丹江市林口縣江山嬌木耳基地。對供試樣品進行形態(tài)及感官性狀的初步觀察，結果如表1所示。

1.2 試驗方法

1.2.1 總酚測定?？偡雍繙y定使用福林酚試劑法[6]，選取沒食子酸作標液建立標曲。稱取0.1 g不同黑木耳干粉作為一個樣品，每個樣品加入2 mL甲醇提取液?；旌虾髽悠贩胖糜?00 kHz、功率120 W、溫度45 ℃的條件下超聲1 h，過夜靜置。離心10 min，取上清液轉移至離心管中，使用旋轉蒸發(fā)儀45 ℃旋蒸至干燥，然后向管內加入1 mL甲醇∶水（1∶1）溶液進行溶解，離心30 min，上清轉入新管中備用。吸取50 μL樣品加入5 mL離心管中，加入450 μL 50%甲醇溶液、0.5 mL福林酚試劑混勻，隨后加入1.5 mL 10%碳酸鈉溶液。將上述混合液放入75 ℃水浴中反應10 min，760 nm處測定吸光光度值。總酚含量以mg GAE/g DW表示。

1.2.2 總黃酮測定?？傸S酮含量測定采用硝酸鋁比色法[6]，選取蘆丁作為標品進行標曲的測定。吸取125 μL的樣品（同1.2.1）加入到5 mL離心管中，然后加入5%亞硝酸鈉溶液搖勻，放置6 min；加入10%硝酸鈉鋁溶液125 μL，放置6 min；加入4%氫氧化鈉溶液1.0 mL，然后再加入1.125 mL乙醇定容到2.5 mL。待測樣品在510 nm處測定吸光光度值，總黃酮含量以mg GAE/g DW表示。

1.2.3 粗黑色素測定。粗黑色素含量測定方法選用堿提法[7]。取2 g待測品種黑木耳粉末，按料液比1∶30（g∶mL）加入1 mol/L氫氧化鈉溶液按10 000 r/min離心15 min取上清液調pH值至1.5，80 ℃水浴12 h，酸沉，離心（10 000 r/min，15 min），取沉淀用去離子水洗4次后冷凍干燥獲得黑色素粗品，稱重并記錄。

2 結果與分析

2.1 不同培養(yǎng)代料對黑木耳抗氧化物質含量的影響

由表2可知，同一黑木耳品種，在椴木及雜木2種培養(yǎng)代料中培養(yǎng)其總酚、總黃酮及粗黑色素含量上均有差異。林耳2號品種中雜木代料培養(yǎng)條件下，總黃酮含量明顯增多，達到6.86 mg/g，而粗黑色素的含量相比與椴木代料培養(yǎng)有所減少；林耳5號品種中雜木代料培養(yǎng)，對總酚、總黃酮含量的影響較小，但可增加粗黑色素含量；相比較于前2個菌株，對二筋品種在雜木培養(yǎng)條件下，總黃酮含量明顯減少，這可能與該菌種有關。

2.2 不同品種在相同代料培養(yǎng)下的抗氧化物質含量變化

由表2可知，同一代料下培養(yǎng)，上述3種黑木耳中總酚、總黃酮、粗黑色素的含量上均有差異，其中對二筋中粗黑色素含量最高，達到0.63 mg/g。椴木代料培養(yǎng)的林二和對二筋較林五有更高的總酚含量。雜木代料培養(yǎng)條件下，可獲得較高的總黃酮含量。

2.3 品種與培養(yǎng)代料間交互作用對黑木耳抗氧化物質含量的影響

方差分析結果（表3）表明，品種及培養(yǎng)代料與品種的交互作用對木耳黑色素、總酚和總黃酮含量的影響均極為顯著，而培養(yǎng)代料對黑色素和總黃酮含量的影響顯著，而對總酚含量的影響不顯著。

3 結論與討論

試驗結果表明，黑木耳中總酚含量很低，1 g干粉中最多含有0.03 mg。然而相比較酚類含量而言，黑木耳中總黃酮含量較高，可達6.86 mg/g。雜木混合代料較傳統(tǒng)的椴木培養(yǎng)代料在木耳培養(yǎng)上能有效提高黑木耳中總黃酮的含量。而對黑木耳黑色素的影響相對較小。值得指出的是，雜木對二筋中的總黃酮含量較少，這可能與該菌種有關。

綜上所述，雜木混合代料在木耳培養(yǎng)中可獲得較高的總黃酮含量，而對黑木耳中的總酚含量無明顯影響，對二筋品種較林耳2號、林耳5號能產生更多的粗黑色素。雜木屑代料培養(yǎng)可有效節(jié)約成本并提高黑木耳的品質，獲取更多的總黃酮和黑色素。

4 參考文獻

[1] 鄧叔群.中國的真菌[M].北京：北京出版社，1963：365-367.

[2] 吳春敏，陳瓊華.毛木耳多糖的分離、分析及免疫藥理活性的研究[J].中國藥科大學學報，1991，22（2）：97.

[3] CHEN S R，JIANG B，ZHENG J X，et al.Isolation and characterization of natural melanin derived from silky fowl（Gallus gallus domesticus Briss-on）[J].Food Chemistry，2008，111：745-749.

[4] 鄒宇，尹冬梅，胡文忠，等.黑木耳天然黑色素理化性質及其抗氧化活性的研究[J].食品工業(yè)科技，2013（5）：118-125.

[5] 韓秋菊，李薇.黑木耳黃酮類化合物提取工藝研究[J].安徽農業(yè)科學，2011，39（28）：17237-17238.

[6] 王海濤，于濤.菊芋花盤酚類物質提取和體外抗氧化活性研究[J].食品工業(yè)科技，2016，37（9）：101-105.

[7] 李琦，侯麗華，劉鑫，等.黑木耳黑色素鑒定及提取工藝優(yōu)化[J].食品科學，2010，31（16）：87-92.