劉君

摘要：目的 比較馬錢(qián)子生品、油炸品、油炸煨制炮制品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量。方法 采用HPLC法測(cè)定。結(jié)果 馬錢(qián)子油炸品與生品比較，馬錢(qián)子堿降低22.5%，士的寧降低21.0%，油炸煨制品與生品比較馬錢(qián)子堿降低35.5%，士的寧降低41.1%，與油炸品比較馬錢(qián)子堿與士的寧分別降低16.8%、25.4%。結(jié)論 油炸煨制炮制法可以在油炸法的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步的降低士的寧與馬錢(qián)子堿的含量。

關(guān)鍵詞：馬錢(qián)子；油炸法；炮制；含量測(cè)定

馬錢(qián)子為傳統(tǒng)中藥，始載于《本草綱目》，其藥性寒，苦，有大毒，具有通絡(luò)止痛，散結(jié)消腫之功效。作為散血熱，消腫，止痛的要藥，臨床用于治療風(fēng)濕頑痹，麻木癱瘓，跌打損傷和癰疽腫痛等疾病[1]。由于馬錢(qián)子有劇毒，限制了其在臨床上的應(yīng)用，臨床上使用的馬錢(qián)子基本上都要經(jīng)過(guò)炮制。炮制后不僅降低了毒性，而且擴(kuò)大了臨床應(yīng)用。

馬錢(qián)子的炮制方法在明代有豆腐制、油炸等；在清代有用甘草制、用固體輔料炒等方法?，F(xiàn)代多采用砂燙法和油炸法。有研究表明，油炸法和砂燙法二者在減毒及增效方面有較大的差別，油炸法的制品較砂燙法毒性更低而且抗炎及鎮(zhèn)痛作用更強(qiáng)，故認(rèn)為油炸法值得深入地研究[2]。

在部分地區(qū)一直沿用油炸法，并有在油炸后以面裹煨制的炮制方法，在民間應(yīng)用多年，被認(rèn)為毒性低，療效穩(wěn)定可靠。本實(shí)驗(yàn)采用HPLC法測(cè)定了馬錢(qián)子生品、油炸品、及油炸后煨制炮制品中士的寧及馬錢(qián)子堿的含量，以此考察炮制后馬錢(qián)子主要毒性成分的變化。

1 儀器與材料

1.1儀器 高效液相色譜儀（四元泵，美國(guó) Agilent 1100 Series，二極管陣列檢測(cè)器），Licrospher C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）。

1.2材料 馬錢(qián)子藥材購(gòu)于廣東省，經(jīng)沈陽(yáng)藥科大學(xué)中藥學(xué)院王延年副教授鑒定為馬錢(qián)科植物馬錢(qián)（Strychnos nux-vomica L）的干燥成熟種子。士的寧與馬錢(qián)子堿對(duì)照品均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件 色譜柱：：流動(dòng)相： 乙腈-0.01 mol/L庚烷磺酸鈉溶液與0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液的等量混合液（10%磷酸調(diào)pH2.8）（21∶79）；檢測(cè)波長(zhǎng)：260 nm；流速：1.0 ml/min；進(jìn)樣量：10 μL 柱溫：25 ℃。

2.2生馬錢(qián)子粉 取生馬錢(qián)子，粉碎，過(guò)三號(hào)篩，備用。

2.3油炸馬錢(qián)子 取市售的麻油，倒入鐵鍋中加熱至235 ℃，投入馬錢(qián)子炸至老黃色為度（約3 min），取出瀝盡油，晾干即得[3]。粉碎過(guò)三號(hào)篩，備用。

2.4油炸煨制馬錢(qián)子 取以上油炸馬錢(qián)子粉，以濕面包裹，投入定量預(yù)熱的麥麩中，煨制1 h，取出，剝?nèi)ッ嫫溆谩?/p>

2.5供試品溶液的制備 取以上三種馬錢(qián)子粉，各約0.6 g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，加氫氧化鈉試液3 ml，混勻，放置30 min，精密加入三氯甲烷20 ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴中回流提取2 h，放冷，再稱(chēng)定重量，用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻，分取三氯甲烷液，用鋪有少量無(wú)水硫酸鈉的濾紙濾過(guò)，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液3 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻即得[4]。

2.6方法學(xué)考察

2.6.1標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 對(duì)照品溶液的制備：取士的寧對(duì)照品6mg，馬錢(qián)子堿對(duì)照品5 mg，精密稱(chēng)定，分別置10 ml量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻[5]。分別精密量取2 ml，置同一10 ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。（每ml含士的寧0.12 mg，馬錢(qián)子堿0.1 mg）

分別精密量取對(duì)照品溶液1.0，3.0，5.0，8.0，10.0 ml，置10 ml量瓶中，分別加甲醇至刻度，搖勻。各吸取10μL進(jìn)樣，計(jì)算出峰面積（M）與質(zhì)量濃度（X）的線性回歸方程，馬錢(qián)子堿的回歸方程為y=14835x-98235；士的寧的回歸方程為：y=19486x-15870。馬錢(qián)子堿在0.1～1.0 μg、士的寧在0.12～1.2μg范圍內(nèi)，峰面積與質(zhì)量濃度呈良好的線性關(guān)系。

2.6.2精密度試驗(yàn) 精密吸取以上對(duì)照品溶液各10 μL，分別重復(fù)進(jìn)樣6次，按以上色譜條件測(cè)定峰面積。結(jié)果：馬錢(qián)子生品、油炸品、油炸煨制品中馬錢(qián)子堿RSD%分別為1.56%、1.87%、1.99%，士的寧RSD%分別為2.1%、1.88%、1.74%，表明方法的精密度良好。

2.6.3穩(wěn)定性試驗(yàn) 分別取三種樣品的同一供試品溶液分別放置0、2、4、6、8 h，進(jìn)樣檢測(cè)，分別測(cè)定峰面積，結(jié)果：馬錢(qián)子生品、油炸品、油炸煨制品中馬錢(qián)子堿的RSD%分別為1.45%、1.98%、1.88%，士的寧的RSD%分別為1.54%、1.96%、2.03%，表明供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.6.4重復(fù)性試驗(yàn) 按以上方法分別制備三種供試品各6份，分別進(jìn)樣10 μL，測(cè)定峰面積，結(jié)果：馬錢(qián)子生品、油炸品、油炸煨制品中馬錢(qián)子堿RSD%分別為1.78%、1.90%、1.73%，士的寧RSD%分別為1.96%、1.43%、1.62%，表明方法的重復(fù)性良好。

2.6.5加樣回收率試驗(yàn) 精密稱(chēng)取已知含量的供試品6份，分別精密加入士的寧及馬錢(qián)子堿對(duì)照品適量，按供試品制備方法制備后，按以上方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果如下：馬錢(qián)子生品馬錢(qián)子堿平均回收率（%）為96.7%，RSD為1.31%；士的寧的平均回收率為98.4%，RSD為1.71%。馬錢(qián)子油炸品馬錢(qián)子堿平均回收率（%）為97.4%，RSD為1.89%；士的寧平均回收率（%）為98.4%，RSD為1.92%。馬錢(qián)子油炸煨制品馬錢(qián)子堿平均回收率（%）為98.3，RSD為2.17%。；士的寧平均回收率（%）為98.2，RSD為1.19%。

2.6.6馬錢(qián)子生品及不同炮制品含量測(cè)定結(jié)果 生品：馬錢(qián)子堿平均含量1.38%；士的寧平均含量2.14%。油炸品：馬錢(qián)子堿平均含量1.07%，士的寧平均含量1.69%，降低比率分別為22.5%，21.0%。油炸煨制品：馬錢(qián)子堿平均含量0.89%，士的寧平均含量1.26%，降低比率分別為35.5%，41.1%。

3 討論

結(jié)果表明，馬錢(qián)子油炸品與生品比較，馬錢(qián)子堿降低22.5%，士的寧降低21.0%，油炸煨制品與生品比較馬錢(qián)子堿降低35.5%，士的寧降低41.1%，與油炸品比較馬錢(qián)子堿與士的寧分別降低16.8%、25.4%。表明馬錢(qián)子油炸煨制法與生品比較可以明顯降低馬錢(qián)子堿與士的寧的含量；油炸煨制法與油炸法比較也可以降低士的寧與馬錢(qián)子堿的含量。

馬錢(qián)子的炮制方法傳統(tǒng)為油炸法，藥典采用砂燙法。有研究表明，馬錢(qián)子油炸法與砂燙法炮制品中馬錢(qián)子堿與士的寧的含量差別不大，故二者區(qū)別也不大，但也有研究表明，二者在減毒及增效方面有較大的差別，油炸法的制品較砂燙法毒性更低而且抗炎及鎮(zhèn)痛作用更強(qiáng)，故認(rèn)為油炸法值得深入地研究。

目前，油炸法在民間應(yīng)用仍然比較廣泛，并有用油炸后再煨制去油再使用的方法，本研究對(duì)馬錢(qián)子的生品、油炸炮制品、油炸煨制品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量進(jìn)行了測(cè)定，以比較生品和炮制品、以及二種炮制品中毒性成分的含量，初步的探討不同的炮制方法對(duì)其毒性的影響。結(jié)果表明：油炸煨制炮制法可以在油炸法的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步的降低士的寧與馬錢(qián)子堿的含量，至于油炸煨制后馬錢(qián)子毒性及治療作用是否有所改變有待于進(jìn)一步的研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]金芝蘭，潘金火.炮制和配伍對(duì)馬錢(qián)子減毒效應(yīng)的研究[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2009，23（5）：76-79.

[2]蔣以號(hào)，楊武亮.HPLC法測(cè)定馬錢(qián)子及炮制品中士的寧和馬錢(qián)子堿的含量[J].中國(guó)中藥雜志，2002，27（12）：899-901.

[3]蘇友新，鄭良樸.HPLC法測(cè)定復(fù)方馬錢(qián)子總堿凝膠液中士的寧和馬錢(qián)子堿含量[J].福建中醫(yī)藥，2012，43（5）：51-52.

[4]那微，張清波.HPLC法測(cè)定骨筋丸系列品種中馬錢(qián)子堿和士的寧[J].中成藥，2012，34（4）：759-762.

編輯/成森