吳雨祺 陳伊凡 胡福良

（浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，杭州310058）

2016年國(guó)內(nèi)外蜂王漿研究概況

吳雨祺 陳伊凡 胡福良

（浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，杭州310058）

本文對(duì)2016年國(guó)內(nèi)外蜂王漿的研究概況進(jìn)行了綜述，對(duì)公開發(fā)表的71篇中英文文獻(xiàn)和蜂王漿相關(guān)專利的地域分布和研究領(lǐng)域進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析和評(píng)述，并重點(diǎn)介紹了蜂王漿的化學(xué)組分、質(zhì)量控制、生物學(xué)活性等領(lǐng)域的研究新進(jìn)展。與2015年相比，2016年蜂王漿的研究熱度出現(xiàn)回升，成果豐碩。

蜂王漿；成分測(cè)定；質(zhì)量控制；生物學(xué)活性；專利

蜂王漿是僅次于蜂蜜的主要蜂產(chǎn)品，應(yīng)用歷史悠久。隨著科學(xué)研究技術(shù)的發(fā)展，蜂王漿的相關(guān)研究也得到不斷地深入。關(guān)注國(guó)際、國(guó)內(nèi)蜂王漿研究動(dòng)態(tài)，了解蜂王漿研究的熱點(diǎn)，將有助于國(guó)內(nèi)蜂王漿科學(xué)研究的縱深發(fā)展，有助于蜂王漿產(chǎn)業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。本文介紹了2016年度國(guó)內(nèi)外蜂王漿論文、專利情況，從地域和研究領(lǐng)域兩方面入手，對(duì)蜂王漿的研究進(jìn)行了分析比較，對(duì)其中部分研究?jī)?nèi)容進(jìn)行了介紹，并對(duì)未來(lái)蜂王漿研究作了展望。

1 蜂王漿相關(guān)的研究性論文

1.1 論文的地域分布

根據(jù) Google Scholar、Elsevier、Springerlink、NCBI、ISI Web of Knowledge、中國(guó)知網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫(kù)的搜索結(jié)果，2016年度發(fā)表與蜂王漿相關(guān)的中、英文研究論文共71篇，其中被SCI收錄37篇，普通英文類20篇；中文論文共14篇，其中核心期刊論文5篇；相比于2015年，2016年的研究熱度有一定的回升（表1）。

在37篇SCI論文中，第一作者單位來(lái)自中國(guó)的論文有10篇，是發(fā)表蜂王漿相關(guān)研究論文最多的國(guó)家。而蜂王漿研究的傳統(tǒng)主力，日本本年度共發(fā)表了5篇。伊朗有4篇，土耳其和沙特分別有2篇和1篇，與去年的狀況基本持平。此外，西班牙有4篇，美國(guó)有3篇，希臘、斯洛伐克、羅馬尼亞、黑山、德國(guó)、波蘭、巴西、巴基斯坦各有1篇。普通英文論文仍以中東國(guó)家為主，尤其是伊朗和埃及。

表1 2012～2016年蜂王漿研究論文數(shù)

1.2 論文的研究領(lǐng)域分布

2016年蜂王漿研究仍然主要集中于生物學(xué)活性和化學(xué)成分分析。在37篇SCI論文中，有26篇是有關(guān)蜂王漿生物學(xué)活性與應(yīng)用的研究，11篇是有關(guān)蜂王漿成分和質(zhì)量控制的研究。

2 研究新進(jìn)展

2.1 成分分析與質(zhì)量控制

與往年相比，2016年蜂王漿新鮮度相關(guān)的研究數(shù)量有所下降，沒有報(bào)道新的新鮮度檢測(cè)手段。Gutiérrez等[1]報(bào)道了在一年時(shí)間內(nèi)，保存在5℃條件下，蜂王漿中植物源成分的變化情況。結(jié)果顯示，大多數(shù)成分的含量在整個(gè)檢測(cè)周期中均保持穩(wěn)定。中國(guó)農(nóng)科院蜜蜂研究所的研究團(tuán)隊(duì)報(bào)道了蜂王漿中揮發(fā)性有機(jī)成分與產(chǎn)漿時(shí)蜜源植物的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)這二者間有著一定的相關(guān)性。因此，可以將蜂王漿中的揮發(fā)性成分用于確定蜂王漿的生產(chǎn)季節(jié)和相應(yīng)的蜜源植物[2]。

來(lái)自日本的研究團(tuán)隊(duì)首次報(bào)道了蜂王漿中特有蛋白成分apisin的檢測(cè)方法及其在蜂王漿中的含量。檢測(cè)結(jié)果顯示，這一蛋白在多個(gè)蜂王漿樣本中含量穩(wěn)定（4%左右），且在4℃保存條件下，一年內(nèi)含量基本維持不變[3]。

本年度有多篇論文報(bào)道了蜂王漿與其他蜂產(chǎn)品的成分比較研究。Hryniewicka等[4]利用LC/MS/MS檢測(cè)了蜂王漿凍干粉、蜂糧和雄蜂蛹這三種蜂產(chǎn)品中α-生育酚和輔酶Q10的含量。結(jié)果顯示，雄蜂蛹中的輔酶Q10含量最高，而蜂糧則含有最豐富的α-生育酚。重慶市藥物種植研究所的研究團(tuán)隊(duì)報(bào)道了蜂王漿氨基酸組成與采集時(shí)間的關(guān)系；在蜂王漿中高含量的游離氨基酸主要為脯氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、谷氨酸和酪氨酸，而總氨基酸中含量較高的則是天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸、賴氨酸和纈氨酸；在移蟲24 h至72 h這一時(shí)間區(qū)間內(nèi)，蜂王漿中游離氨基酸的含量呈現(xiàn)逐步上升的趨勢(shì)，而總氨基酸的含量則呈現(xiàn)下降-上升-下降的變化趨勢(shì)，移蟲24 h和72 h分別是總氨基酸含量最高和最低的時(shí)間點(diǎn)[5]。山東農(nóng)大的研究團(tuán)隊(duì)比較了工蜂漿和蜂王漿的成分差異，結(jié)果顯示，這二者的成分含量有著明顯的區(qū)別，工蜂漿中含水量要明顯高于蜂王漿，而其他營(yíng)養(yǎng)成分的含量則低于蜂王漿[6]。

蜂王漿中獸藥和殺蟲劑殘留檢測(cè)是本年度研究的一個(gè)熱點(diǎn)。Jin等[7]介紹了一種樣品前處理方法，能夠適用于42種獸藥的檢測(cè)，使得蜂王漿中獸藥殘留的檢測(cè)更加簡(jiǎn)單。河北大學(xué)Zhang等[8]和西班牙阿爾梅里亞大學(xué)的Martinez-Dominguez等[9]分別報(bào)道了基于UPLCQTOF-MS和UHPLC-HRMS的檢測(cè)方法，適用于多種殺蟲劑和獸藥殘留的檢測(cè)。Cestaro等[10]報(bào)道了一種蜂產(chǎn)品中孢子蟲（Nosema spp.，Ascosphaeraapis）和芽孢桿菌的快速檢測(cè)方法。劉秀紅和徐錦忠[11]報(bào)道了一種蜂王漿產(chǎn)品中人工合成癸烯酸的檢測(cè)方法，并對(duì)市場(chǎng)上的蜂王漿產(chǎn)品中人工癸烯酸進(jìn)行了測(cè)定，發(fā)現(xiàn)部分產(chǎn)品的檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，顯示市場(chǎng)上存在部分摻入了人工合成癸烯酸的蜂王漿和蜂王漿凍干粉。

2.2 蜂王漿的生物學(xué)活性研究

2.2. 1蜂王漿功能單體的活性及其分子機(jī)制研究

中國(guó)浙江大學(xué)和日本岐阜藥科大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)分別報(bào)道了蜂王漿中脂肪酸類成分的生物學(xué)功能作用機(jī)制。浙江大學(xué)的Chen等[12]首次報(bào)道了蜂王漿中三種脂肪酸（10-HDA、10-HDAA和SEA）的顯著抗炎效果和相應(yīng)作用機(jī)制。有趣的是，這三種脂肪酸雖然在結(jié)構(gòu)上高度相似，但在抗炎過(guò)程中調(diào)控的信號(hào)通路卻不盡相同；10-HDAA和SEA能通過(guò)抑制p-p65來(lái)抑制NF-κB通路的激活，而10-HDA對(duì)這一蛋白的磷酸化沒有顯著影響，此外只有SEA表現(xiàn)出了抑制p38和JNK1/2激活的效果。Makino等[13]則報(bào)道了蜂王漿中三種成分（10-HAD、10-HDAA和SEA）和一種10-HDA衍生物（4-HPO-DAEE）對(duì)細(xì)胞外超氧化物歧化酶（EC-SOD）表達(dá)的影響。三種蜂王漿脂肪酸能通過(guò)抑制組蛋白脫乙酰酶影響EC-SOD啟動(dòng)子區(qū)域組蛋白H4的乙酰化，進(jìn)而顯著提高EC-SOD的表達(dá)；而4-HPO-DAEE能同時(shí)提高啟動(dòng)子區(qū)域組蛋白H3和H4的乙?；?，從而表現(xiàn)出了更強(qiáng)的促進(jìn)EC-SOD表達(dá)的能力。EC-SOD在對(duì)抗超氧化物導(dǎo)致的血管壁損傷等過(guò)程中起著重要的作用，蜂王漿中這幾種脂肪酸對(duì)EC-SOD的表達(dá)的促進(jìn)作用顯示，這三種物質(zhì)在動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病的治療過(guò)程中可能能起到良好的作用，而10-HDA衍生物的良好功效意味著蜂王漿中功能性脂肪酸的衍生物可能也有著良好的應(yīng)用前景。

中國(guó)農(nóng)科院蜜蜂研究所的Fan等[14]報(bào)道了MRJP1抗高血壓功能的作用機(jī)制，采用慢病毒載體，首次將MRJP1基因轉(zhuǎn)入小鼠平滑肌細(xì)胞（VSMC）的基因組中，成功制備了能內(nèi)源性表達(dá)MRJP1的小鼠平滑肌細(xì)胞。與對(duì)照組相比，轉(zhuǎn)入MRJP1基因后，VSMC的遷移和增殖都明顯受到了抑制；進(jìn)一步的蛋白質(zhì)組分析顯示，VSMC的蛋白表達(dá)發(fā)生了明顯的變化，有超過(guò)600個(gè)蛋白的表達(dá)明顯下調(diào)，包括多個(gè)與VSMC收縮相關(guān)的蛋白和多個(gè)與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白。這表明MRJP1可能通過(guò)降低平滑肌細(xì)胞的收縮能力來(lái)降低血壓。

2.2.2 蜂王漿保健功能的分子機(jī)制研究

阿爾茲海默癥是一種發(fā)病進(jìn)程緩慢、隨著時(shí)間不斷惡化的持續(xù)性神經(jīng)功能障礙疾病，近年來(lái)全球患者數(shù)目增長(zhǎng)迅速。Wang等[15]研究發(fā)現(xiàn)，蜂王漿或酶解蜂王漿可以有效推遲阿爾茨海默癥模型線蟲的臨床癥狀出現(xiàn)時(shí)間，并且能顯著降低線蟲體內(nèi)的β-淀粉樣蛋白含量；利用RNA干擾技術(shù)，證實(shí)了蜂王漿是通過(guò)調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子DAF-16和胰島素/IGF信號(hào)通路，進(jìn)而提高體內(nèi)蛋白質(zhì)內(nèi)穩(wěn)態(tài)（proteostasis），從而緩解阿爾茨海默癥的臨床癥狀。這一研究為蜂王漿抗阿爾茨海默癥的功效提供了理論基礎(chǔ)。

日本學(xué)者M(jìn)inami等[16]利用卵巢切除大鼠模型，研究了蜂王漿對(duì)雌激素缺失導(dǎo)致的記憶缺陷和抑郁等癥狀的作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示雌激素缺陷大鼠的記憶缺失和抑郁癥狀有明顯的緩解。Yoshida等[17]利用肥胖糖尿病模型大鼠，證實(shí)了蜂王漿能有效改善血糖過(guò)高并抑制體重增加，葡糖六磷酸激酶的表達(dá)明顯抑制，脂肪連接蛋白和磷酸化AMP活化蛋白激酶的表達(dá)均上調(diào)。浙江大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)[18]利用D-半乳糖模型小鼠，研究了蜂王漿酶解產(chǎn)物的抗衰老作用，結(jié)果顯示蜂王漿酶解產(chǎn)物能干預(yù)小鼠體質(zhì)量的下降，抵抗小鼠活動(dòng)能力的下降并提升小鼠長(zhǎng)期學(xué)習(xí)記憶能力，同時(shí)多種內(nèi)部衰老表征都有所改善，顯示蜂王漿酶解產(chǎn)物有著極好的抗衰老功效。

Malekinejad等報(bào)道了蜂王漿能有效緩解紫杉醇對(duì)心臟[19]和肝臟[20]的毒副作用，服用蜂王漿后，紫杉醇引發(fā)的丙二醇和一氧化氮上調(diào)得到了明顯的緩解，小鼠心臟的病理學(xué)病變也有了明顯的減輕；通過(guò)降低E2f1同時(shí)促進(jìn)c-Myc的表達(dá)，蜂王漿能有效保護(hù)肝臟緩解紫杉醇導(dǎo)致的肝損傷。伊朗學(xué)者Zargar等[21]報(bào)道了蜂王漿的抗肺纖維化功能，長(zhǎng)期服用蜂王漿能有效逆轉(zhuǎn)博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺部纖維化，多種炎癥因子包括TNF-α和TNF-β的含量也有明顯下調(diào)。

2.3 蜂王漿的應(yīng)用研究

蜂王漿的保健功效是蜂王漿研究的一大重點(diǎn)，本年度多位學(xué)者報(bào)道了蜂王漿臨床應(yīng)用的效果。Khoshpey等[22]研究了蜂王漿對(duì)2型糖尿病病人的血糖、載脂蛋白A1和載脂蛋白B等指標(biāo)的影響；服用王漿后，病人的血糖含量顯著降低，載脂蛋白A1的含量顯著上升，同時(shí)載脂蛋白A1和載脂蛋白B的比值顯著下降。埃及學(xué)者Zahran等[23]研究發(fā)現(xiàn)，蜂王漿能有效降低全身性紅斑狼瘡患兒的病癥，服用蜂王漿后，患者體內(nèi)的CD4+淋巴細(xì)胞含量和CD4+/CD8+淋巴細(xì)胞比例顯著下降。Lambrinoudaki等[24]報(bào)道了蜂王漿對(duì)絕經(jīng)后婦女身體狀況的作用，發(fā)現(xiàn)服用蜂王漿能有效改善更年期女性的血脂情況。臺(tái)灣臺(tái)中醫(yī)院的研究團(tuán)隊(duì)[25]發(fā)現(xiàn)，蜂王漿能有效降低血壓偏高患者血液中的總膽固醇和低密度脂蛋白的含量。作為一種抗炎物質(zhì)，Pajovic等[26]將蜂王漿用于前列腺增生患者，在3個(gè)月使用后，前列腺增生患者的生活質(zhì)量能得到有效提升。

本年度多位學(xué)者報(bào)道了蜂王漿在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用。Guldas等[27]評(píng)估了蜂王漿對(duì)羊精子復(fù)蘇后的質(zhì)量和孵育過(guò)程中的活力變化，結(jié)果顯示添加蜂王漿能有效提高羊精子的活力和運(yùn)動(dòng)能力。與此類似，巴基斯坦學(xué)者Shahzad等[28]報(bào)道了蜂王漿在提高水牛精子活力和受精率上的良好效果。

胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS）是體外培養(yǎng)細(xì)胞不可或缺的重要營(yíng)養(yǎng)成分，Chen等[29]報(bào)道了將王漿主蛋白作為FBS替代物的可能性，不同比例的王漿主蛋白和FBS混合物被用于多種人體細(xì)胞系的培養(yǎng)。結(jié)果顯示，在部分細(xì)胞系中，王漿主蛋白能部分替代FBS用于細(xì)胞培養(yǎng)，而且對(duì)某些細(xì)胞系，王漿主蛋白/FBS混合物能促進(jìn)細(xì)胞的增殖。這一研究成果為蜂王漿的應(yīng)用指出了一個(gè)新的可能方向。

3 蜂王漿相關(guān)專利

3.1 專利類型分布

2016年中國(guó)蜂王漿相關(guān)專利數(shù)量與2015年大致持平，其中發(fā)明專利授權(quán)10項(xiàng)，公布38項(xiàng)。此外，還有9項(xiàng)實(shí)用新型專利和7項(xiàng)外觀設(shè)計(jì)專利（表2）。

表2 2016年度中國(guó)（大陸）蜂王漿專利概況

3.2 專利領(lǐng)域分布

國(guó)外的專利主要是蜂王漿制品的制備方法，比如一種含有蜂王漿的奶制品“method of producing milk product（0002588443）”，含有蜂王漿的食物“food product containing lyophilised bee royal jelly and saw-wort extract（0002575823）”和一種含有蜂王漿的肥皂“manufacturing method of bee venom soap and bee venom soap manufactured thereby（1020160056031）”等。

實(shí)用新型專利主要與蜂王漿的生產(chǎn)有關(guān)，包括“一種新型蜂王漿臺(tái)基條（CN205511588U）”、“用于蜂王漿機(jī)械化生產(chǎn)的移蟲機(jī)（CN205082453U）”和“用于蜂王漿機(jī)械化生產(chǎn)的移蟲機(jī)吹蟲管（CN205305720U）”，還有多種王漿生產(chǎn)采集裝置，如“蜂王漿自動(dòng)采集裝置（CN205567468U）”、“一種蜂王漿快速采集裝置（CN205546993U）”和“蜜蜂仿生免移蟲蜂王漿一體化生產(chǎn)裝置（CN205106015U）”等。

授權(quán)的蜂王漿相關(guān)發(fā)明專利則主要集中于各種蜂王漿制品，包括內(nèi)服的“蜂王漿荔枝核灰樹花微膠囊及其制備方法（CN104116071B）”、“一種藥食同源中藥和蜂王漿的復(fù)合蜂蜜的加工方法（CN103005252B）”、“一種具有抗輻射功效的人參蜂王漿顆粒（CN104095175B）”等，以及外用的“蜂王漿營(yíng)養(yǎng)雪花膏（CN103585076B）”；此外，還有“一種蜂王漿全成分均一凍干制劑及其生產(chǎn)方法（CN102579501B）”和“一種分析不同來(lái)源蜂王漿中揮發(fā)性成分的方法（CN104569270B）”等多種蜂王漿制備與檢測(cè)方法相關(guān)專利獲得授權(quán)。

4 結(jié)語(yǔ)

與2015年相比，2016年蜂王漿相關(guān)的研究論文發(fā)表數(shù)量有了一定程度的回升，在多個(gè)領(lǐng)域也都取得了不錯(cuò)的成果。國(guó)內(nèi)外的專利數(shù)量穩(wěn)中有升，說(shuō)明業(yè)內(nèi)對(duì)知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)越來(lái)越重視，對(duì)蜂產(chǎn)品的創(chuàng)新也有著很高的熱情。

作為一種重要的蜂產(chǎn)品，蜂王漿的質(zhì)量控制一直是蜂王漿相關(guān)研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)，近年來(lái)在蜂王漿新鮮度控制、成分分析等方面也有了不少進(jìn)展。然而隨著相關(guān)研究的深入，這方面的進(jìn)展逐漸遇到瓶頸，缺乏新的突破，本年度國(guó)內(nèi)外均沒有相關(guān)研究報(bào)道，這意味著在蜂王漿新鮮度檢測(cè)方法的研究上也許需要有新的思路和方向。

本年度有兩篇關(guān)于蜂王漿脂肪酸成分的作用機(jī)制研究論文發(fā)表，10-HDA作為蜂王漿的標(biāo)志性成分，早年已經(jīng)有大量的相關(guān)研究，但對(duì)蜂王漿中其他脂肪酸類成分的功能和作用機(jī)制我們?nèi)匀恢跎伲浅Ｖ档眠M(jìn)一步深入探索。

中國(guó)和以日本、歐美為代表的發(fā)達(dá)國(guó)家仍然是蜂王漿研究的主力軍，大部分的高質(zhì)量論文都是來(lái)自這些國(guó)家的研究團(tuán)隊(duì)；而伊朗等中東國(guó)家的研究水平也開始不斷提升，成為一支新的生力軍。加強(qiáng)蜂王漿基礎(chǔ)與應(yīng)用研究相結(jié)合，帶動(dòng)蜂王漿科研與產(chǎn)業(yè)的良性發(fā)展是未來(lái)的必然趨勢(shì)。

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Research Status of Royal Jelly in 2016

Wu Yuqi,Chen Yifan,Hu Fuliang
(College of Animal Sciences,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China)

The research status of royal jelly in China and abroad in 2016 were reviewed in this article.We analyzed and summarized all 71 papers and the related patents based on the geographical distribution and research area,and focused on the research progresses in chemical composition,quality control and biological activity.Compared with 2015,the number of royal jelly related papers increased in 2016,and lots of achievements were obtained.

royal jelly;component determination;quality control;biological activity;patent

國(guó)家蜂產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)（CARS-45）；浙江省重大科技專項(xiàng)（2016C02054-11）

胡福良，E-mail：flhu@zju.edu.cn