15% 雙氟·氯氟吡氧乙酸異辛酯懸浮劑高效液相色譜分析

2017-06-05 15:08河南省農(nóng)藥檢定站馬麗娜郝小磊王青霞

河南農(nóng)業(yè) 2017年5期

河南省農(nóng)藥檢定站馬麗娜郝小磊王青霞

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雙氟磺草胺是由美國陶氏農(nóng)業(yè)科學公司開發(fā)的三唑并嘧啶磺酰胺類除草劑。雙氟磺草胺是三唑并嘧啶磺酰胺類超高效除草劑，雙氟磺草胺是內(nèi)吸傳導型除草劑，可以傳導至雜草全株。在低溫下藥效穩(wěn)定，即使是在2 ℃時仍能保證穩(wěn)定藥效，這一點是其他除草劑無法比擬的。雙氟磺草胺殺草譜廣，可防除麥田大多數(shù)闊葉雜草，包括豬殃殃（茜草科）﹑麥家公（紫草科）等難防雜草，并對麥田中最難防除的澤漆（大戟科）有非常好的抑制作用。氯氟吡氧乙酸異辛酯，屬內(nèi)吸傳導型苗后莖葉處理除草劑，施藥后很快被雜草吸收，使敏感植物出現(xiàn)典型激素類除草劑的反應并傳導到全株各部位。適用于小麥﹑大麥﹑玉米﹑葡萄﹑果園﹑牧場﹑林地﹑草坪等地防除闊葉雜草；如豬殃殃﹑卷莖蓼﹑馬齒莧﹑龍葵﹑田旋花﹑蓼﹑莧等，對禾本科雜草無效。本文研究了雙氟磺草胺﹑氯氟吡氧乙酸異辛酯的分析方法，該方法快速﹑準確﹑分離效果佳，能滿足產(chǎn)品的分析要求。

一、試驗部分

（一）試劑和溶液

乙腈：色譜純；水：二次蒸餾水；雙氟磺草胺標樣：已知含量為95%；氯氟吡氧乙酸異辛酯標樣：已知含量為96%；15%雙氟·氯氟吡懸浮劑試樣。

（二）儀器

高效液相色譜儀：美國Agilent1260型，帶有紫外光檢測器（VWD）和自動進樣器；Agilent色譜工作站；色譜柱：150 mm×4.6 mm（i.d）不繡鋼柱，內(nèi)裝XDB-C18，5μm填料。

（三）液相色譜操作條件

流動相：乙腈+水=80+20（V+ V）；流量：1.0 mL/min；柱溫：室溫；檢測波長：265 nm；進樣體積：5μl。上述色譜條件下雙氟磺草胺的保留時間約為1.523 min，氯氟吡氧乙酸異辛酯保留時間約為6.160 min。

上述液相色譜操作條件，系典型操作參數(shù)，可根據(jù)不同儀器特點，對給定的操作參數(shù)作適當?shù)恼{(diào)整，以期獲得最佳效果。標樣和樣品典型色譜圖（見圖1﹑圖2﹑圖3）。

圖1 雙氟磺草胺標樣高效液相色譜圖

圖2 氯氟吡氧乙酸異辛酯高效液相色譜圖

圖3 15%雙氟?氯氟吡懸浮劑高效液相色譜圖

（四）測定步驟

1.標樣溶液的配制。稱取雙氟磺草胺標準品0.03 g（精確至0.0002 g）氯氟吡氧乙酸異辛酯標準品0.03 g（精確至0.0002 g），各置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解稀釋至刻度，超聲波震蕩10 min，取出冷卻至室溫，搖勻。用0.45 μm濾膜過濾，搖勻備用。

環(huán)腐棒桿菌在種薯中越冬，成為翌年初侵染源。病薯播下后，一部分芽眼腐爛不發(fā)芽，一部分是出土的病芽，病菌沿維管束上升至莖中部或沿莖進入新結(jié)薯塊而致病。適合環(huán)腐棒桿菌生長溫度20～23℃，最高31～33℃，最低1～2℃。致死溫度為干燥情況下50℃。

2.試樣溶液配制。稱取1.0 g（精確至0.0002 g）置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解稀釋至刻度，超聲波震蕩10 min，取出冷卻至室溫，搖勻。用0.45 μm濾膜過濾，搖勻備用。

3.測定。在上述色譜操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標樣溶液，計算各針相對響應值，待相鄰2針響應值變化小于1.5%時，按照標樣溶液﹑試樣溶液﹑試樣溶液﹑標樣溶液的順序進行測定。

4.計算。將測得的2針試樣溶液和2針標樣溶液色譜圖上雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯的峰面積分別進行平均，試樣中雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯的質(zhì)量分數(shù)X按式（1）計算：

式中：

——雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯標樣的質(zhì)量，g；

——試樣的質(zhì)量， g；

——標樣溶液色譜圖上雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯峰面積的平均值；

——試樣溶液色譜圖上雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯峰面積的平均值；

二、結(jié)果與分析

（一）流動相的優(yōu)化

根據(jù)該化合物特點，使用不同比例的甲醇和水，乙腈和水作為流動相對試樣進行檢測分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，用乙腈+水=80+20（V+V），作為流動相，分離效果好，峰形對稱，因此選擇該流動相。

（二）檢測波長的選擇

通過Agilent1260高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，獲得雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯紫外波掃描圖。從圖中看到雙氟磺草胺的最大吸收在260 nm附近，氯氟吡氧乙酸異辛酯的最大吸收波長在254 nm附近，為減少雜質(zhì)的干擾﹑達到分離的效果，將檢測波長定為265 nm。

（三）色譜柱的優(yōu)化

色譜柱經(jīng)C18和C8對比，選用反相填料C18柱，在保證雜質(zhì)分離徹底的情況下，大幅縮短分析時間。

（四）分析方法的線性測定

將標樣溶液在上述色譜條件下分別進行分析，進樣量依次為1 μL﹑2 μL﹑3 μL﹑4 μL﹑5 μL，以雙氟磺草胺的峰面積為縱坐標，以它們不同進樣質(zhì)量為橫坐標作圖繪制標準曲線，得雙氟磺草胺線性方程：Y=7482.3X+53.1，線性相關(guān)系數(shù)0.9 998（見表1，圖4）。

將試樣溶液在上述色譜條件下分別進行分析，進樣量依次為1 μL﹑2 μL﹑3 μL﹑4 μL﹑5 μL，以氯氟吡氧乙酸異辛酯的峰面積為縱坐標，以它們不同進樣質(zhì)量為橫坐標作圖繪制標準曲線，得氯氟吡氧乙酸異辛酯線性方程：Y=1011.7X+11，線性相關(guān)系數(shù)0.9 998（見表2，圖5）。

（五）方法的精密度試驗

按照測定步驟對同一試樣5次平行測定，結(jié)果見表3。

（六）方法準確測定

稱取5份一定量的試樣，分別準確加入適量標樣溶液，在上述色譜條件下測定，測得雙氟磺草胺的平均回收率為 98.84% ，氯氟吡氧乙酸異辛酯的平均回收率為 99.78 %，結(jié)果見表4。