趙登超 侯立群 侯樂峰 唐貴敏 韓傳明 郝兆祥 舒秀閣 梁靜

摘 要 對石榴新品種DUS測試指南的研制原則、測試對象、測試性狀選擇、標(biāo)準(zhǔn)品種、測試方法和判定標(biāo)準(zhǔn)進行概述，選擇35個測試性狀，包括植株、枝條、葉片、花、果實和種子，測試性狀涵蓋石榴的品種特征性狀，包括植株性狀有3個、枝干性狀3個、葉片性狀8個、花性狀9個、果實性狀8個、種子性狀4個；采用花瓣顏色、果實寬度、果皮顏色、籽粒顏色和種子硬度作為分組性狀，其中質(zhì)量性狀（QL）2個、數(shù)量性狀（QN）19個、假性質(zhì)量性狀14個。并概述中國石榴新品種權(quán)申請現(xiàn)狀，石榴DUS測試指南的制訂對增強石榴新品種保護，促進中國植物新品種保護事業(yè)的發(fā)展具有積極意義。

關(guān)鍵詞 石榴；新品種；DUS；新品種測試指南

中圖分類號 Q949.761.5 文獻標(biāo)識碼 A

Abstract The assessment of DUS for pomegranates plant including test principles， subject， selection and adoption of characteristics， states of expression and selection of example varieties were elucidated in detail. Thirty-five testing characteristics（including 3 plants， 3 branches and shoots， 8 leaves， 9 floral organs， 8 fruits and 4 arils）were adopted for DUS test. The corolla color， fruit width， fruit over color， aril main color and seed hardness were selected as useful grouping characteristics（2 qualitative， 19 quantitative and 14 pseudo-quantitative）. At the same time， the application status and development prospect of new varieties of pomegranate in China were reviewed. The preparation of DUS Test Guidelines for pomegranate would have important significance both for promoting the development of PVP and increasing the status of international PVP fields for China.

Key words pomegranates； new varieties； DUS（distinctness，uniformity and stability）； testing guidelines for new varieties

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.02.008

DUS測試是對植物新品種的特異性、一致性和穩(wěn)定性進行分析測試的過程，是植物新品種保護的技術(shù)基礎(chǔ)和授予品種權(quán)的科學(xué)依據(jù)。石榴（Punica granatum L.）屬于石榴科（Punicaceae）石榴屬（Punica L.）果樹，原產(chǎn)于伊朗、阿富汗和高加索等中亞地區(qū)，向東傳播至印度和中國，向西傳播至地中海周邊國家及世界其他各適生地[1]。中國石榴栽培歷史悠久，目前形成了眾多國內(nèi)外聞名的名、特、優(yōu)傳統(tǒng)生產(chǎn)基地，如陜西臨潼市、河南滎陽市、山東棗莊市嶧城區(qū)、四川會理縣、云南蒙自市、安徽淮北烈山區(qū)、新疆喀什地區(qū)葉城縣等[2]。目前，中國石榴栽培面積約為12萬hm2，年產(chǎn)量為120萬t[1]。2013年中國園藝學(xué)會石榴分會組織中國石榴科研工作者編著《中國果樹志-石榴卷》，該書綜述了當(dāng)前中國石榴的種質(zhì)資源現(xiàn)狀，其中包括石榴種1個，月季石榴等11個變種，鮮食、加工兼用品種229個，觀賞石榴品種51個，新選育石榴品種（系）51個，國外引進石榴品種資源8個[1]。2000年以來，隨著生產(chǎn)實際需求和中國石榴科學(xué)研究的深入，越來越多的石榴新品種成功選育并進行了推廣應(yīng)用[3-8]?！爸参镄缕贩N特異性、一致性、穩(wěn)定性（DUS）測試指南-石榴屬”于2006年被國家林業(yè)局列為第4批植物新品種保護名錄，并以項目研究的方式把測試指南研制任務(wù)下達給山東省林業(yè)科學(xué)研究院。項目任務(wù)下達后項目組對中國石榴屬品種資源相關(guān)資料進行系統(tǒng)整理和分類，結(jié)合中國石榴品種資源科研與生產(chǎn)現(xiàn)狀，借鑒目前國際植物新品種保護聯(lián)盟（簡稱UPOV）石榴屬（種）的DUS測試指南[9]，制定出適合中國實際的石榴屬新品種DUS測試指南，為有效的保護石榴育種者、生產(chǎn)者的合法權(quán)益和石榴屬新品種的保護授權(quán)提供技術(shù)支持。2015年3月國家林業(yè)局科技司組織相關(guān)專家對石榴DUS測試指南進行現(xiàn)場審查，筆者主要闡述石榴DUS測試指南的研制原則、內(nèi)容及相關(guān)方法。

1 研制原則

DUS測試指南既是指導(dǎo)測試機構(gòu)開展DUS測試工作的技術(shù)手冊，又是審批機關(guān)審查新品種DUS的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。研制指南的目的是將UPOV總則及相關(guān)TGP文件中的原則細(xì)化為操作性強的具體指導(dǎo)，以開展統(tǒng)一的DUS測試及對品種進行統(tǒng)一的性狀描述[10]。為此，石榴新品種測試指南的研制嚴(yán)格依據(jù)《TGP/7 植物新品種測試指南的研制》、《TG1/3 植物新品種特異性、一致性、穩(wěn)定性測試及統(tǒng)一描述總則》和國標(biāo)GB/T19557.1《植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南總則》等文件的原則和要求，借鑒UPOV石榴屬及其他植物測試指南，并結(jié)合中國石榴育種研究現(xiàn)狀，篩選和確定適宜的測試性狀和標(biāo)準(zhǔn)品種，最終制定出科學(xué)、準(zhǔn)確和可操作性強的石榴新品種DUS測試指南。

2 研制內(nèi)容

2.1 研究對象的確定

石榴屬有2個種，一種產(chǎn)于印度洋的索克拉克島上，其學(xué)名為Punica protopunica Balf.，為石榴野生種，無栽培價值，實際生產(chǎn)栽培的只有1個種，即石榴（Punica granatum L.），并將其作為DUS測試指南的適用對象。園藝學(xué)家[1]把石榴種下分成7個變種：月季石榴（P. granatum var. nana）、白石榴（P. granatum var. albescen）、黃石榴（P. granatum var. flavesens）、瑪瑙石榴（P. granatum var. legrellei）、重瓣白石榴（P. granatum var. multipex）、重瓣紅石榴（P. granatum var. pleniflora）和墨石榴（P. granatum var. nigra）。

2.2 DUS測試材料要求

石榴DUS測試提交的測試材料為無性繁殖的至少3年生的植株，數(shù)量不得少于6株。待測的新品種材料應(yīng)為無病蟲害感染，生長正常，并未進行任何影響性狀表達的額外處理，如已經(jīng)被處理，應(yīng)提供處理的詳細(xì)信息。

2.3 DUS測試性狀的選擇與確定

根據(jù)UPOV要求，對于植物新品種測試性狀的選擇，除要滿足易于操作、費用低和可靠性強等基本要求，還需嚴(yán)格執(zhí)行以下幾項標(biāo)準(zhǔn)[11]：（1）性狀表達必須源于某一特定基因型或基因型組合。（2）測試性狀具有充分的一致性，并且在重復(fù)繁殖或特定環(huán)境條件下可重復(fù)。（3）性狀要能充分顯示出品種間的差異。（4）性狀必須可以被明確定義、準(zhǔn)確識別和清晰描述。（5）性狀要滿足一致性和穩(wěn)定性的要求。為此借鑒UPOV石榴測試指南與《中國果樹志-石榴卷》、《中國植物志》等性狀描述方法和要求，在此基礎(chǔ)上查閱大量文獻，現(xiàn)場考察中國石榴主產(chǎn)區(qū)品種資源，結(jié)合山東省棗莊市嶧城區(qū)石榴種質(zhì)資源圃不同石榴品種資源實際勘測，集合中國教學(xué)、科研實際情況，對中國石榴品種資源外觀形態(tài)、植物學(xué)性狀和生物學(xué)性狀穩(wěn)定性和一致性進行充分的調(diào)查、研究、分析，最終確定石榴DUS測試性狀（表1），選擇35個測試性狀，包括植株、枝條、葉片、花、果實和種子，測試性狀全面涵蓋了石榴的品種特征性狀，其包括植株性狀3個，枝干性狀3個，葉片性狀8個，花性狀9個，果實性狀8個和種子性狀4個；測試指南采用花瓣顏色、果實寬度、果皮顏色、籽粒顏色和種子硬度作為分組性狀，包括質(zhì)量性狀（QL）2個，數(shù)量性狀（QN）19個，假性質(zhì)量性狀14個；星號性狀（*）即新品種審查時為協(xié)調(diào)統(tǒng)一特征描述而采用的重要的品種特征，進行DUS測試時必須測試的性狀15個，加號性狀（+）即圖解說明的特性7個，同時每個性狀的表達狀態(tài)對應(yīng)一個數(shù)字代碼，質(zhì)量性狀代碼用“1、9”，數(shù)量性狀代碼用奇數(shù)“1、3、5、7、9”，假性質(zhì)量性狀代碼用連續(xù)數(shù)字“1、2、3……”，詳細(xì)測試性狀見表1。

2.4 DUS測試標(biāo)準(zhǔn)品種的選用

標(biāo)準(zhǔn)品種是用于準(zhǔn)確、形象的演示石榴屬品種某一性狀特征（特別是數(shù)量性狀）表達狀態(tài)的品種。標(biāo)準(zhǔn)品種是植物新品種DUS測試中各性狀指標(biāo)評價的主要依據(jù)，標(biāo)準(zhǔn)品種可有效消除年份誤差和提高測試可靠性，因此，標(biāo)準(zhǔn)品種的準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性直接關(guān)系到新品種DUS測試結(jié)果的準(zhǔn)確、公正與客觀[12]。根據(jù)選定的性狀測試表，對比棗莊市石榴種質(zhì)資源保存圃收集的293個石榴品種特征性狀表現(xiàn)，最終確定42個為測試指南標(biāo)準(zhǔn)品種（表2），涉及山東、安徽、河南、四川、陜西、新疆等省、市、自治區(qū)石榴品種。

2.5 DUS測試特異性、一致性、穩(wěn)定性的判定

石榴新品種DUS測試性狀的判定主要依靠質(zhì)量性狀、數(shù)量性狀和假性質(zhì)量性狀3種性狀進行判定。質(zhì)量性狀的特異性評價：待測品種與相似品種只要一個性狀有差異，則可判定該品種具備特異性。數(shù)量性狀的特異性評價：待測品種與相似品種至少有2個性狀有差異，或者一個性狀的2個代碼有差異，則可判定該品種具備特異性。假性質(zhì)量性狀的特異性評價：待測品種與相似品種至少有兩個性狀有差異，或者一個性狀的2個不連貫代碼的差異，則可判定該品種具備特異性。如果觀測到的品種間差異非常明顯，只需要一個生長周期的測試。在某些特定的情況下因環(huán)境因素的影響，一個單獨的生長季不足以保證差異一致程度的觀察，則至少需要2個或2個以上的生長周期的測試。

一致性判斷采用異型株法。根據(jù)1%群體標(biāo)準(zhǔn)和95%可靠性概率，6株觀測品種植株中異型株的最大允許值為1。申請品種在測試中，其特異性和一致性的測試結(jié)果如果穩(wěn)定、一致，可將認(rèn)為其具有穩(wěn)定性。

特殊情況或存在疑問時，需要通過世代生長交替或者由申請者提供新的測試材料，測試新品種的穩(wěn)定性，觀察其是否與先前提供的材料具有相同特征。通過雜交獲得的新品種，需要附加對其親本的特異性和一致性測試，進行其穩(wěn)定性測試。

3 石榴屬植物新品種權(quán)保護現(xiàn)狀

林業(yè)植物新品種保護是林業(yè)知識產(chǎn)權(quán)保護的重要內(nèi)容。全國各級林業(yè)主管部門大力宣傳植物新品種保護，不斷完善保護體系，重點加強基礎(chǔ)保障體系建設(shè)，積極參與國際事務(wù)，使中國林業(yè)植物新品種權(quán)益得到有效保護，培育和使用了一大批植物新品種。截至2015年年底，國家林業(yè)局累計受理林業(yè)植物品種權(quán)申請1 788件，共授權(quán)1 003件，授權(quán)林業(yè)植物新品種主要是觀賞植物、林木、果樹和其他經(jīng)濟植物，植物新品種保護申請主要為觀賞植物，而石榴作為果樹經(jīng)濟林植物，其新品種權(quán)保護工作應(yīng)該處于起步階段。目前多數(shù)石榴育種者重視林木良種的審定[3-8]，而忽略新品種權(quán)的保護。2000年以來，隨著中國植物新品種事業(yè)的發(fā)展，經(jīng)過國家林業(yè)局植物新品種權(quán)保護辦公室的宣傳，越來越多的企事業(yè)單位注重自主知識產(chǎn)權(quán)的保護，其中河南、陜西、山東等地石榴育種者先后申請了國家林業(yè)局植物新品種權(quán)保護，主要情況見表3。

4 石榴屬植物新品種保護研究展望

石榴新品種DUS測試指南是在參考國內(nèi)外相關(guān)文獻資料，依據(jù)中國石榴新品種選育研究現(xiàn)狀，結(jié)合生產(chǎn)實際，充分征求了中國石榴育種研究專家及相關(guān)產(chǎn)業(yè)的意見與建議的基礎(chǔ)上制定的。石榴DUS測試指南對石榴品種特征信息描述進行了統(tǒng)一、規(guī)范，對性狀特征的分級、分類進行了標(biāo)準(zhǔn)化。DUS測試指南實際應(yīng)用于‘綠洲御選1號和‘晶榴等6個石榴新品種權(quán)實質(zhì)審查，適用于石榴屬新品種以無性繁殖材料進行的新品種DUS測試，是石榴新品種權(quán)授予的科學(xué)依據(jù)。石榴新品種DUS測試指南的建立，一方面有利于石榴品種育種者和測試者快速、準(zhǔn)確地記錄新品種的信息；另一方面又利于審批機關(guān)對新品種特異性、一致性、穩(wěn)定性的審查，從而促進新品種的選育和新品種保護制度的完善。它的成功研制對于推動中國石榴新品種選育原始創(chuàng)新，提高新品種測試和審查工作水平，保護育種者權(quán)益均有十分重要的意義。

目前，中國有近20個省、市、自治區(qū)均有石榴栽培，其分布區(qū)跨越熱帶、亞熱帶、溫帶3個氣候帶。石榴集營養(yǎng)、藥用、經(jīng)濟、生態(tài)、觀賞和文化價值于一身，越來越受到消費者的喜愛，具有優(yōu)異性狀的石榴品種資源也有待于進一步充分挖掘和利用。實際生產(chǎn)中，石榴苗木可采用扦插繁殖，其技術(shù)操作相對簡單，為此其品種侵權(quán)現(xiàn)象易于發(fā)生。根據(jù)《中華人民共和國植物新品種保護條例》和《指南》要求，需進一步加強石榴育種者、良種繁育者法律意識，尊重新品種權(quán)利，以提高石榴新品種育種者的積極性，為社會提供更多的優(yōu)新品種。農(nóng)業(yè)部和國家林業(yè)局植物新品種保護辦公室陸續(xù)在全國各地建設(shè)了多個植物新品種測試分中心和測試基地，國家林業(yè)局先后批準(zhǔn)了月季、一品紅、竹子等植物新品種測試基地建設(shè)，未見有經(jīng)濟林樹種測試基地建設(shè)，根據(jù)中國植物新品種保護要求亟需建立石榴新品種DUS測試體系和測試基地，山東省、河南省等地分別建立國家級石榴種質(zhì)資源圃，且山東棗莊、河南滎陽為中國著名的石榴主產(chǎn)區(qū)，建議可在以上地區(qū)設(shè)立石榴DUS測試的專門部門或者機構(gòu)，負(fù)責(zé)建立已知石榴品種資源數(shù)據(jù)庫，承擔(dān)中國石榴屬植物新品種DUS測試任務(wù)。當(dāng)前，隨著分子指紋圖譜技術(shù)的不斷普及，在石榴上也取得了一些科技成果，建立石榴屬已知品種資源的DNA指紋數(shù)據(jù)庫、DNA指紋鑒定的標(biāo)準(zhǔn)方法和測試鑒定實驗室也十分必要，主要為石榴屬植物新品種測試、鑒定和保護提供技術(shù)服務(wù)，從而有效推動中國石榴屬植物新品種權(quán)事業(yè)的健康發(fā)展。

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