任國(guó)華，胡濤

(濱州醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室，山東煙臺(tái)264003)

消銀顆粒聯(lián)合窄譜中波紫外線(xiàn)對(duì)尋常型銀屑病血清中IL-17、IL-23及皮損組織PAR-2表達(dá)的影響

任國(guó)華，胡濤

(濱州醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室，山東煙臺(tái)264003)

目的探討消銀顆粒聯(lián)合窄譜中波紫外線(xiàn)對(duì)尋常型銀屑病患者治療前后血清中白介素-17、白介素-23及皮損組織蛋白酶活化受體2表達(dá)。方法口服消銀顆粒，3.5 g/次，一日3次，一個(gè)月為一療程，兩個(gè)療程觀(guān)察療效。觀(guān)察組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上加用窄譜中波紫外線(xiàn)治療。檢測(cè)血清白介素-17、白介素-23水平采用ELISA法；皮損處蛋白酶活化受體2表達(dá)量的變化采用免疫組化。應(yīng)用SPSS16.0軟件，所獲數(shù)據(jù)采用方差分析和t檢驗(yàn)。結(jié)果兩組治療前PASI評(píng)分比較,P＞0.05。觀(guān)察組治療前后PASI評(píng)分比較,P＜0.0005;對(duì)照組治療前后PASI評(píng)分比較，P＜0.0005。兩組治療后PASI評(píng)分比較，P＜0.001。兩組治療前與正常對(duì)照組比較，白介素-17、白介素-23，P＜0.0005。兩組治療前比較，白介素-17、白介素-23，P＞0.05。觀(guān)察組治療前后白介素-17、白介素-23比較，P＜0.0005；對(duì)照組治療前后白介素-17、白介素-23比較，P＜0.0005。兩組治療后白介素-17、白介素-23比較，P＜0.005。兩組治療后與正常對(duì)照組白介素-17、白介素-23比較，對(duì)照組白介素17，P＜0.0005;觀(guān)察組白介素17，P＜0.01，對(duì)照組白介素23，P＜0.0005;觀(guān)察組白介素23,P＜0.005。治療前病灶區(qū)胞膜及胞質(zhì)呈棕黃色細(xì)顆粒狀均勻分布及蛋白酶活化受體2陽(yáng)性表達(dá)較多，皮膚較厚。治療后病灶區(qū)胞膜及胞質(zhì)呈較小棕黃色細(xì)顆粒狀仍均勻分布及蛋白酶活化受體2陽(yáng)性表達(dá)，皮膚較薄，厚度接近正常皮膚。觀(guān)察組治療前皮損內(nèi)角質(zhì)形成細(xì)胞PAR-2染色的平均吸光度與治療后比較，P＜0.0005。結(jié)論消銀顆粒聯(lián)合窄譜中波紫外線(xiàn)治療后血清中炎癥因子白介素-17、白介素-23及蛋白酶活化受體2在銀屑病患者皮損表達(dá)降低。

消銀顆粒/治療應(yīng)用;窄譜中波紫外線(xiàn)/治療應(yīng)用;銀屑病/治療;蛋白酶活化受體2;白介素-17;白介素-23

銀屑病是一種慢性炎性反應(yīng)性皮膚疾病，以皮膚紅斑、丘疹、鱗屑為主要臨床表現(xiàn)[1]。該病的發(fā)病機(jī)理至今尚不清楚。在多種可能的致病因素中，目前遺傳因素和免疫功能紊亂備受關(guān)注[2]，免疫學(xué)的T細(xì)胞失常在銀屑病發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮了重要作用，是Th1細(xì)胞過(guò)度活化導(dǎo)致的自身免疫性疾病。銀屑病患者的血清腫瘤壞死因子（TNF-α）、白介素-17（IL-17）、白介素-23（IL-23）等炎性細(xì)胞因子水平與疾病的炎性反應(yīng)過(guò)程存在密切聯(lián)系[3]，角質(zhì)形成細(xì)胞蛋白酶激活受體(PAR-2)的前炎癥效應(yīng)可作為治療皮膚炎癥的一個(gè)新的靶位。銀屑病治療困難，治療方案較多，但效果均不理想。為此，我們自2015年10月—2016年12月間采用消銀顆粒聯(lián)合窄譜中波紫外線(xiàn)治療尋常型銀屑病前后血清中IL-17、IL-23表達(dá)變化及皮損蛋白酶活化受體2表達(dá)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料尋常型銀屑病的患者70例，其中男49例，女21例，年齡18～60歲，平均年齡37.1歲。病程從5個(gè)月～20年不等，發(fā)病年齡均在40歲以上，10例患者均為家族史。皮疹分布以軀干、四肢為主，皮疹形態(tài)為斑疹、斑丘疹，其上覆銀白色鱗屑，皮疹大小不等。（1）入選標(biāo)準(zhǔn)。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)[3]。隨機(jī)分為兩組，觀(guān)察組20例，對(duì)照組50例。兩組一般資料比較，P＞0.05,無(wú)顯著性差異，具有可比性。同時(shí)選擇健康查體的志愿者30例。本研究通過(guò)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者均簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

1.2.1 治療方法對(duì)照組采用消銀顆?？诜淮?.5 g，一日3次。一個(gè)月為一療程，兩個(gè)療程觀(guān)察療效。治療組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上加用窄譜中波紫外線(xiàn)治療，SS-5紫外線(xiàn)光療儀。用法[4]。

1.2.2 ELISA檢測(cè)消銀顆粒聯(lián)合NB-UVB治療銀屑病前及治療后2個(gè)月分別采取晨起靜脈血5 ml，并采取正常對(duì)照組晨起靜脈血5 ml，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定IL-17、IL-23（武漢默沙克生物科技有限公司）的表達(dá)量，操作按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行，各指標(biāo)均設(shè)副孔，酶標(biāo)儀于波長(zhǎng)450 nm處測(cè)吸光度（A）值。

1.2.3 皮膚標(biāo)本制備治療前及治療后2個(gè)月分別環(huán)鉆切取4 mm患者軀干或四肢皮損；正常對(duì)照30例，取自非炎癥性皮膚病（色素痣等）外科手術(shù)切口邊緣正常皮膚，性別、年齡及取材部位與患者相匹配。切取的皮膚組織浸入4%甲醛固定。

1.2.4 皮損處PAR-2組化[3]。療效判定標(biāo)準(zhǔn)[5]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS16.0軟件，所獲數(shù)據(jù)采用方差分析和t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 治療前和治療兩個(gè)療程以后的PASI評(píng)分比較見(jiàn)表1。

表1 治療前后PASI評(píng)分比較（分

表1 治療前后PASI評(píng)分比較（分

兩組治療前PASI評(píng)分比較,P＞0.05。同組治療前后PASI評(píng)分比較，觀(guān)察組治療前后PASI評(píng)分比較,P＜0.0005;對(duì)照組治療前后PASI評(píng)分比較，P＜0.0005。兩組治療后PASI評(píng)分比較，P＜0.001。

2.2 治療前后尋常型銀屑病患者血清IL-17、IL-23表達(dá)見(jiàn)表2。

表2 兩組治療前后血清IL-17、IL-23水平比較（pg/ml,

表2 兩組治療前后血清IL-17、IL-23水平比較（pg/ml,

兩組治療前與正常對(duì)照組比較，IL-17，P＜0.0005；IL-23比較，P＜0.0005。兩組治療前比較，IL-17、IL-23比較，P＞0.05。同組治療前后IL-17、IL-23比較：觀(guān)察組治療前后IL-17、IL-23比較，P＜0.0005；對(duì)照組治療前后IL-17、IL-23比較，P＜0.0005。兩組治療后IL-17、IL-23比較，P＜0.005。兩組治療后與正常對(duì)照組IL-17、IL-23比較，對(duì)照組IL-17比較，P＜0.0005;觀(guān)察組IL-17比較，P＜0.01，對(duì)照組IL-23比較，P＜0.0005;觀(guān)照組IL-23,P＜0.005。

2.3 觀(guān)察組前后皮損PAR-2表達(dá)情況與正常皮膚比較見(jiàn)圖1。

圖1 銀屑病治療前后及正常對(duì)照組皮損PAR-2的表達(dá)(DAB×200)

3 討論

銀屑病是一種多因素所指的皮膚損傷，確切病因尚不清楚。治療上國(guó)內(nèi)外尚無(wú)有限的治療方法。病理上為角質(zhì)細(xì)胞增生與分化異常并有明顯的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，紫外線(xiàn)在311 nm波段照射可使角化異常逆轉(zhuǎn)，抑制表皮細(xì)胞增生，調(diào)節(jié)黏附分子和表面抗原功能增加損傷皮膚中T淋巴細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)維生素D3的合成，有效加強(qiáng)多種免疫抑制介質(zhì)，抑制朗格漢斯細(xì)胞的功能，DNA吸收峰值不在紫外線(xiàn)窄譜，避免了DNA的突變，降低了致癌率[6]。

中成藥銀屑顆粒改善微循環(huán)，清熱涼血，促進(jìn)代謝，增加紫外線(xiàn)窄譜的效果。既防止復(fù)發(fā)，又避免了使用糖皮質(zhì)激素所致的皮膚萎縮。

銀屑病屬祖國(guó)醫(yī)學(xué)的牛皮癬、松皮癬、干癬、白癬、白疤及白庀等。體素虧損營(yíng)血、風(fēng)生化燥、內(nèi)蘊(yùn)血熱，病久氣結(jié)血瘀，皮毛失去濡養(yǎng)。消銀顆粒主要成分有生地黃、赤芍、牡丹皮、苦參、當(dāng)歸、玄參、金銀花、牛蒡子、白鮮皮、蟬蛻、防風(fēng)、大青葉、紅花等。生地黃、赤芍、紅花、牡丹皮、當(dāng)歸可促進(jìn)細(xì)胞表皮分化，并具有降低內(nèi)皮素、抑制表皮細(xì)胞增殖等功效；金銀花和苦參可調(diào)節(jié)免疫作用及炎癥反應(yīng)[7]。玄參、牛蒡子、白鮮皮具有清熱解毒、涼血祛風(fēng)、利濕去燥、滋陰潤(rùn)膚等作用，牛蒡子尚有明顯的抗誘變作用[8]。方中諸藥物相互協(xié)作，共同發(fā)揮養(yǎng)血潤(rùn)燥、清熱涼血、祛風(fēng)止癢之功效。

兩組治療前PASI評(píng)分比較,P＞0.05，無(wú)顯著性差異。尋常型銀屑病通過(guò)治療，觀(guān)察組治療前后PASI評(píng)分比較,P＜0.0005;對(duì)照組治療前后PASI評(píng)分比較，P＜0.0005。兩組治療后PASI評(píng)分比較，P＜0.0005。說(shuō)明兩種治療方案均有較好的效果,觀(guān)察組效果更好。兩組治療前與正常對(duì)照組比較，白介素-17、白介素-23，P＜0.0005。兩組治療前比較，白介素-17、白介素-23，P＞0.05，無(wú)顯著性差異。觀(guān)察組治療前后白介素-17、白介素-23比較，P＜0.0005，有非常顯著性差異；對(duì)照組治療前后白介素-17、白介素-23比較，P＜0.0005，有非常顯著性差異；說(shuō)明兩種方案對(duì)白介素-17、白介素-23均有向好的影響。兩組治療后白介素-17、白介素-23比較，P＜0.005，有非常顯著性差異，說(shuō)明消銀顆粒與紫外線(xiàn)治療效果明顯優(yōu)于單純使用消銀顆粒。兩組治療后與正常對(duì)照組白介素-17、白介素-23比較，對(duì)照組白介素-17，P＜0.0005，有非常顯著性差異；消銀顆粒與紫外線(xiàn)治療組白介素-17，P＜0.01，有顯著性差異；對(duì)照組白介素-23，P＜0.0005，有非常顯著性差異；消銀顆粒與紫外線(xiàn)治療組白介素-23,P＜0.005，有非常顯著性差異。說(shuō)明消銀顆粒與紫外線(xiàn)治療恢復(fù)程度更接近正常。

PAR-2屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族，廣泛分布人體內(nèi)各組織和細(xì)胞，角質(zhì)形成細(xì)胞和真皮血管內(nèi)皮細(xì)胞是PAR-2的主要效應(yīng)細(xì)胞[9]，在炎癥性皮膚病如AD和銀屑病皮損中，角質(zhì)形成細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)PAR-2均顯著增加[10]。

治療前病灶區(qū)細(xì)胞胞膜及胞質(zhì)呈棕黃色細(xì)顆粒狀均勻分布及蛋白酶活化受體2陽(yáng)性表達(dá)較多，皮膚較厚。治療后棕黃色細(xì)顆粒狀變小仍均勻分布及蛋白酶活化受體2陽(yáng)性表達(dá)，皮膚較薄，厚度接近正常皮膚。消銀顆粒與紫外線(xiàn)組治療前皮損內(nèi)角質(zhì)形成細(xì)胞PAR-2染色的平均吸光度與治療后比較，P＜0.0005，有非常顯著性差異；說(shuō)明消銀顆粒與紫外線(xiàn)治療尋常型銀屑病皮損內(nèi)角質(zhì)形成細(xì)胞PAR-2恢復(fù)良好。

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執(zhí)行編委：吳效普

責(zé)任編輯：吳效普邵文錦

英文編輯：楊馨

責(zé)任校對(duì)：吳效普邵文錦

微機(jī)排版：邵文錦張東方

EliminationofSilverParticlesCombinedNarrowSpectrumUvbraystoPatientswithPsoriasis VulgarisSerum IL-17、IL-23 and the Influence of Skin Tissue PAR-2 Expression

Ren Guohua,Hu Tao
(Binzhou Medical College,Yantai 264003,Shandong)

ObjectiveEliminate silver particles combine narrow spectrum uvb rays to patients with psoriasis vulgaris before and after treatment serum interleukin 17,interleukin 23 and skin tissue Protease activated receptor 2 expression.MethodsSilver particles oral,3.5 g/times,3 times a day.A month for a period of treatment,the two courses of treatment.On the basis of the control group and treatment group treated with narrow spectrum uvb rays.Detection of serum interleukin 17,interleukin 23 level by ELISA method.The quantity of proteinase activated receptor 2 expression in skin lesions by immunohistochemistry.Using SPSS16.0 software,the obtained data analyzed by variance and t test.ResultsThe two groups before treatment PASI score comparison,P＞0.05.Treatment group PASI score comparison beforeand after treatment,P＜0.0005.PASI score comparison before and after the treatment,the control groupP＜0.0005.PASI score compared the two groups after treatment,P＜0.001.The two groups before treatment compared with normal control group,interleukin 17,interleukin 23,P＜0.0005.Compared the two groups before treatment,interleukin 17,interleukin 23,P＞0.05.Observation group of interleukin 17,interleukin 23 comparison before and after treatment,P＜0.0005.Control group interleukin 17,interleukin 23 comparison before and after treatment,P＜0.0005.Interleukin 17,interleukin 23 comparison the two groups after treatment,P＜0.005.The two groups after treatment compared with normal control group interleukin 17,interleukin 23,interleukin 17,the control groupP＜0.0005.Interleukin 17 observation group,P＜0.01,the control group interleukin 23,P＜0.0005.Witness interleukin 23,P＜0.005.In a normal skin full-thickness skin protease activated receptor 2 hair follicles,sweat glands,vascular endothelial cells and nerve fiber structure expression of cell membrane and cytoplasm a tan.Treatment before the cell membrane and cytoplasm a tan fine particle uniform distribution and protease activated receptor 2 more positive expression,thicker skin.After treatment of cell membrane and cytoplasm a small tan fine granular is evenly distributed and protease activated receptor 2 positive expression,the skin is thinner,the thickness is close to normal skin.Observed within groups before treatment skin cutin cells formed Protease activated receptor 2 compared with after treatment,the average absorbance of dyeingP＜0.0005.ConclusionCombined narrow spectrum of silver particles elimination uvb rays after treatment serum interleukin 17 of proinflammatory factor,interleukin 23 and protease activated receptor 2 expression in patients with psoriasis skin lesions.

Away silver particles/therapeutic use;A narrow spectrum of uvb rays/therapeutic use;Psoriasis/therapyt;Protease activated receptor 2;Interleukin-17;Interleukin-23

R758.63

A

1008-4118（2017）01-0019-04

10.3969/j.issn.1008-4118.2017.01.006

2016-10-05

任國(guó)華（1976.7-），女，漢，山東菏澤人，現(xiàn)在菏澤市立醫(yī)院工作。研究方向：分子生物學(xué)。

胡濤。E-mail：hutao0408@sina.com。