曹 燕 曹維娟

蘇州地區(qū)臨床用血漿中亞甲藍(lán)殘留量及安全性調(diào)查分析*

曹 燕 曹維娟

目的 通過(guò)對(duì)血漿病毒滅活后亞甲藍(lán)殘留量檢測(cè)，探討臨床用血漿安全性。方法 隨機(jī)抽取213份病毒滅活血漿，采用高靈敏熒光光度法檢測(cè)不同規(guī)格的病毒滅活血漿中亞甲藍(lán)殘留量，并對(duì)亞甲藍(lán)殘留量檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果

亞甲藍(lán) 殘留量 熒光分光光度法

為了降低臨床上輸血感染病毒的風(fēng)險(xiǎn)，增加輸血的安全性，一般采用亞甲藍(lán)光化學(xué)法滅活血漿中的病毒。亞甲藍(lán)滅活血漿病毒的有效濃度為（1.0～5.0） μmol/L（即亞甲藍(lán)釋放量），以保證病毒的有效滅活；在滅活病毒以后，需使用特制的一次性病毒滅活過(guò)濾器濾除亞甲藍(lán)，使最大殘留量不超過(guò)0.3 μmol/L（臨床用血漿的亞甲藍(lán)殘留量），以保證大劑量輸血后亞甲藍(lán)在體內(nèi)的累積不會(huì)過(guò)多，從而保證用血安全。本文利用基于陰離子型環(huán)糊精超分子包合物高靈敏熒光光度分光法檢測(cè)血漿中殘留亞甲藍(lán)[1]，現(xiàn)將2012年至今隨機(jī)抽取的213份病毒滅活血漿亞甲藍(lán)殘留量檢測(cè)結(jié)果報(bào)告如下。

材料與方法

1 儀器與材料 LS-55 熒光分光光度計(jì)（ 美國(guó)Perkin Elmer 公 司，病毒滅活柜由中?？滇t(yī)療器具公司提供），亞甲藍(lán)（ 純度大于 98. 5%，TCI公司） ，羧甲基-β-環(huán)糊精（ 純度大于98%，山東濱州智源生物科技有限公司） ，其他試劑均為分析純。

2 方法

2.1 按照《全血和成分血質(zhì)量要求》，每月隨機(jī)抽取病毒滅活血漿，100 ml、150 ml、200 ml血漿各71袋。

2.2 溶液配制：稱取亞甲藍(lán)0.074 5 g，置于100ml量瓶中，用磷酸鹽緩沖液（PBS，pH 7.2）溶解并稀釋至刻度。準(zhǔn)確量取5.00 ml，用PBS定容到100 ml，得貯備液（100 μmol/L），避光、密封保存。

2.3 血漿樣品的制備：向420 μl的待測(cè)血漿中加入344μl羧甲基-β-環(huán)糊精飽和溶液（0.01 mol/ L），使羧甲基-β-環(huán)糊精濃度為4.5 mmol/L，充分混勻，避光放置20 min，即得待測(cè)溶液。同時(shí)，用空白血漿按前述方法配制不含亞甲藍(lán)的待測(cè)溶液，即得空白溶液。

2.4 熒光分光光度法測(cè)定血漿中亞甲藍(lán)含量：將待測(cè)溶液（或空白溶液）置于熒光比色皿中，以665 nm 為激發(fā)波長(zhǎng)、680 nm為發(fā)射波長(zhǎng)、激發(fā)狹縫寬度5 nm、發(fā)射狹縫寬度5 nm、激發(fā)光程2 mm、發(fā)射光程10 mm，測(cè)定其熒光強(qiáng)度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算亞甲藍(lán)含量。

結(jié) 果

蘇州市中心血站向各醫(yī)院供應(yīng)病毒滅活血漿，血漿容量為75 ml、100 ml、150 ml、200 ml四種規(guī)格，其中75 ml和100 ml血漿病毒滅活時(shí)采用同一種過(guò)濾器，除過(guò)濾時(shí)造成血漿容量損耗外，不會(huì)對(duì)75 ml血漿亞甲藍(lán)殘留量產(chǎn)生影響，故未對(duì)75 ml病毒滅活血漿進(jìn)行亞甲藍(lán)殘留量檢測(cè)。213袋病毒滅活血漿亞甲藍(lán)殘留量結(jié)果顯示，60袋血漿亞甲藍(lán)殘留量低于高靈敏度熒光分光光度法的最低定量限0.089 μmol/L[3]，亞甲藍(lán)殘留量濃度為0.089～0.20 μmol/L 157袋，0.21～0.30 μmol/L 12袋。病毒滅活血漿亞甲藍(lán)殘留量均低于0.3 μmol/L，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。三種規(guī)格的病毒滅活血漿亞甲藍(lán)殘留量檢測(cè)結(jié)果如表1。

表1 三種不同規(guī)格病毒滅活血漿亞甲藍(lán)殘留量檢測(cè)結(jié)果

從表1中可以看出，三種規(guī)格的血漿采用標(biāo)準(zhǔn)容量的濾器，亞甲藍(lán)殘留量隨血漿量的增加而增加，但均符合質(zhì)量要求。

討 論

病毒滅活作為一種降低輸血風(fēng)險(xiǎn)的新技術(shù)，除了能有效滅活血液或血液成分中可能存在的病毒、對(duì)血液成分的功能無(wú)顯著不良影響外，更重要的是病毒滅活劑的殘留不能對(duì)用血者的安全方面造成影響[2]，因此各血站均對(duì)病毒滅活后亞甲藍(lán)殘留量進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。

從本站病毒滅活血漿殘留量檢測(cè)的結(jié)果分析，三種規(guī)格的血漿均符合國(guó)家質(zhì)量要求。由于濾器對(duì)血漿的損耗，建議廠家能提供用于75 ml甚至更小規(guī)格血漿的滅活耗材；本站血漿分離全部采用全自動(dòng)血液成分分離機(jī)分離，血漿容量標(biāo)準(zhǔn)化，與一次性病毒滅活耗材匹配；100 ml和150 ml血漿采用同一款過(guò)濾器過(guò)濾血漿中亞甲藍(lán)，濾盤材質(zhì)與直徑完全相同，只是后者所用一次性病毒滅活耗材所加入的亞甲藍(lán)量多于前者。該濾器對(duì)亞甲藍(lán)的濾除效果較好。血漿在病毒滅活光照后在過(guò)濾的過(guò)程中由于濾器材質(zhì)對(duì)血漿的粘附與截留，會(huì)對(duì)血漿容量產(chǎn)生損耗，廠家提供的濾器也考慮了容量的損耗與過(guò)濾效果的平衡。隨著血漿容量的增大，過(guò)濾時(shí)間延長(zhǎng)，亞甲藍(lán)過(guò)濾效果可能下降，因此建議在全血分離時(shí)定量取漿便于病毒滅活耗材的選擇。

在日常的病毒滅活過(guò)程中常會(huì)遇到過(guò)濾不暢，不得不人為用力擠壓光照袋才能流入的情況，均有可能對(duì)亞甲藍(lán)殘留量產(chǎn)生影響，建議采用無(wú)菌接駁的方式更換濾器再次過(guò)濾，保證亞甲藍(lán)殘留量，加強(qiáng)血漿病毒滅活后殘留亞甲藍(lán)的質(zhì)量控制，進(jìn)一步降低臨床上輸血感染病毒的風(fēng)險(xiǎn)，提高血漿輸注的安全性。

1 周群剛，謝蓮，方敏，等.基于陰離子型環(huán)糊精超分子包合物高靈敏熒光光度分光法檢測(cè)血漿中殘留亞甲藍(lán)[J].中國(guó)藥房，2014，25（6）：519-521.

2 于建華，王明靜.病毒滅活血漿若干問(wèn)題探討[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2010，4（12）：20-22.

3 謝蓮，周群剛.血漿中亞甲藍(lán)釋放量和殘留量的超分子熒光分析[J].化學(xué)研究與應(yīng)用，2014，26（3）：432-435.

（本文編輯：2016-11-17）

R457.1+4

A

1671-2587（2017）02-0125-02

王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.008

*本課題受蘇州市科教興衛(wèi)項(xiàng)目（No.KJXW2012034）資助

215006 江蘇省蘇州市中心血站

曹燕（1981–），女，江蘇蘇州人，主管護(hù)師，學(xué)士，主要從事成分制備與質(zhì)量控制工作，（E-mail）55176352@qq.com。

病毒滅活血漿亞甲藍(lán)殘留量均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論 通過(guò)對(duì)病毒滅活耗材的原料監(jiān)測(cè)，采用高質(zhì)量的過(guò)濾器材，并加強(qiáng)制備過(guò)程中關(guān)鍵控制點(diǎn)的監(jiān)測(cè)，可以避免亞甲藍(lán)殘留量超標(biāo)現(xiàn)象，保證輸血安全。