張會永 閔冬雨 賈連群 楊關林

(1 遼寧中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院血脈病研究室,沈陽,110032; 2 遼寧中醫(yī)藥大學中醫(yī)臟象理論及應用教育部重點實驗室,沈陽,110847)

理論研究

基于巨噬細胞泡沫化探討脾病“脈道不利”的科學內(nèi)涵

張會永1,2閔冬雨1賈連群2楊關林1,2

(1 遼寧中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院血脈病研究室,沈陽,110032; 2 遼寧中醫(yī)藥大學中醫(yī)臟象理論及應用教育部重點實驗室,沈陽,110847)

脾主運化水谷,布散精微。血脂亦由水谷化生,并依賴脾氣散精,經(jīng)“脈道”布散周身。脾失健運脂質代謝異常時,痰濁內(nèi)生,阻礙氣血運行,導致“脈道不利”。脾失健運脂質代謝異常是導致早期動脈粥樣硬化形成的主要因素。脾失健運脂質代謝異常,可影響內(nèi)皮細胞結構及功能,促使異常代謝的脂質在血管內(nèi)膜下沉積,形成脂質條紋,導致血管管腔變窄,結構異常,即“脈道不利”。巨噬細胞內(nèi)膽固醇吸收與排泄障礙,穩(wěn)態(tài)失衡,使得巨噬細胞內(nèi)脂質蓄積形成泡沫細胞,這一病理過程的使動環(huán)節(jié)與脾失健運脂質代謝異常密切相關。從“泡沫細胞”形成機制入手,探討脾失健運脂質代謝異常狀態(tài)下,早期動脈粥樣硬化形成機制,可為厘清“脾失健運”與“脈道不利”的關系提供科學依據(jù),亦為中醫(yī)臨床“從脾論治”冠心病提供科學依據(jù)。

血脂異常;高脂血癥;高密度脂蛋白;痰濁血瘀;化瘀祛痰;血脈

因飲食結構及生活方式的改變,我國冠心病發(fā)病逐年上升。研究發(fā)現(xiàn),冠心病患者多伴有血脂異常或肥胖[1]?，F(xiàn)代醫(yī)學認為,血脂代謝異常是冠心病等動脈粥樣硬化性疾病的危險因素。關于血脂代謝異常引發(fā)動脈粥樣硬化的機制及動脈粥樣硬化的早期干預調脂治療一直是心血管領域研究熱點。近年來,隨著“治未病”理念的興起,中醫(yī)界更加關注動脈粥樣硬化的早期預防及干預。目前學術界多采用健脾益氣、祛痰化瘀等防治血脂異常及動脈粥樣硬化,并開展了大量基礎研究,在基因蛋白水平上揭示了動脈粥樣硬化病理過程中的痰瘀物質基礎。以《黃帝內(nèi)經(jīng)》(以下簡稱《內(nèi)經(jīng)》)“脾病,脈道不利”理論為指導,將動脈粥樣硬化研究重心前移,探討脾失健運脂質代謝異常對動脈粥樣硬化早期病理變化的影響機制,闡述中醫(yī)“脾失健運”與“脈道不利”的關系,可為中醫(yī)“從脾論治”冠心病提供科學依據(jù),豐富脾臟象理論,促進中醫(yī)學術水平進步。

1 《內(nèi)經(jīng)》脾病“脈道不利”理論

“脾病,脈道不利”之說出自《素問·太陰陽明論》:“四肢皆稟氣于胃,而不得至經(jīng),必因于脾,乃得稟也。今脾病不能為胃行其津液,四肢不得稟水谷氣,氣日以衰,脈道不利,筋骨肌肉,皆無氣以生,故不用焉?！彼闹δ苷?是因為得到胃中水谷精氣的充養(yǎng),但水谷精氣不能直達四肢,必須依賴脾氣散精,經(jīng)脈道輸送,才能到達。如果“脾病”則不能為胃輸散精微,四肢不能稟受水谷精微,出現(xiàn)“脈道不利”,肌肉失養(yǎng)而不用。后世醫(yī)家受此啟發(fā),治療肌肉痿廢多從脾著手。上述“脾病”導致“脈道不利”的病機為水谷精氣不足,氣日以衰,脈道不盈或失養(yǎng);但對于“脾病”導致“脈道不利”的其他病機,尚未進行深入的探討。

《內(nèi)經(jīng)》中“脈道”強調的是“脈”的形體,即運行氣血的管道,即血脈[2]?！懊}道”通暢,是行使脈的生理功能的前提,“脈道”中空運行氣血,而有“血之府”“奇恒之腑”之稱。“脈道不利”泛指血脈運行不暢?！捌⒉　敝钙⑴K的各種病證,雖種類繁多,但其病機不離脾失健運、運化失常?！秲?nèi)經(jīng)》亦記載“久坐傷肉”及“膏粱之變”等,均可影響脾胃正常功能,而變生它病。因此,“脾病,脈道不利”可因藜藿之虧,脾無運化,氣血衰少,脈道不盈,失其充養(yǎng),導致“脈道不利”;亦可因膏粱過逸,脾失健運,痰濁內(nèi)生,氣機阻滯,血行不暢,痰濁、瘀血阻塞脈道,而致“脈道不利”。

“脾病,脈道不利”為中醫(yī)防治動脈粥樣硬化性疾病提供了理論依據(jù)。遼寧中醫(yī)藥大學已故名老中醫(yī)田嘉禾曾以此為理論依據(jù),提出“脾胃受傷,運化功能減弱……過食肥甘……滋長陰濁彌漫,極易化為脂液,因其性質黏膩,浸淫脈道,附著于脈壁,造成心脈瘀塞”,主張“從脾論治”冠心病[3]。

2 脾病“脈道不利”與動脈粥樣硬化

脾屬土居中焦,主運化水谷,布散精微。血脂亦由水谷化生,并依賴脾的轉輸功能布散周身。脂質代謝異常表現(xiàn)為總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)升高,高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)降低等。中醫(yī)認為脾失健運是脂質代謝異常的主要病機。嗜食肥甘厚味,脾失健運,不能將多余脂質運化,積存在血脈之中而致血脂異常,即內(nèi)生之痰濁。正如《景岳全書》所說:“水谷……隨食隨化,皆成血氣,焉得留而為痰？惟其不能盡化,而十留一二,則一二為痰矣;十留三四,則三四為痰矣”。

脾失健運,痰濁內(nèi)生,阻礙脈道氣血運行,久而出現(xiàn)“脈道不利”,即由脂質代謝異常導致動脈粥樣硬化。周學文[3]認為動脈粥樣硬化的關鍵病機為脾虛運化失司升降失常,痰濁瘀血流于脈中,痰瘀互結,脈道不暢。王東生[4]也提到脾虛失運,痰濁凝聚,結于脈道而致動脈粥樣硬化。沈紹功、袁肇凱、宋劍南等[5-6]多位學者通過臨床及實驗研究,從基因、蛋白水平揭示了動脈粥樣硬化脾虛生痰、由痰致瘀、痰瘀互結的病機演變過程。

我們所在研究團隊以脾失健運脂質代謝異常為切入點,采用高脂喂養(yǎng)先后復制小鼠、大鼠、家兔及小型豬動脈粥樣硬化模型,系統(tǒng)闡釋了脾失健運脂質代謝異常狀態(tài)下模型動物血脂譜、內(nèi)皮細胞功能、血小板活化、炎性因子、平滑肌細胞增殖的變化及規(guī)律,并通過中藥干預,發(fā)現(xiàn)具有健脾祛痰化瘀作用的中藥制劑能夠降低模型動物血清中TG、TC、LDL、apoB100,升高HDL、apoA1等水平;減少動脈管腔中粥樣斑塊面積和管壁脂質沉積,降低巨噬細胞荷脂量;上調肝臟LDL-R、LCAT、CYP7A1、SR-BⅠ等基因表達[7]。證實了健脾祛痰化瘀中藥通過調節(jié)血脂,抑制粥樣斑塊形成,尤其是調節(jié)膽固醇逆向轉運等而起到抗動脈粥樣硬化作用。

3 脂質代謝異常對血管內(nèi)皮的影響

血管內(nèi)皮是連續(xù)的細胞單層,保持血管內(nèi)膜的完整,維持血液正常循行。內(nèi)皮細胞分泌多種血管活性物質及細胞因子,維持正常血管張力及功能。血脂異常脂質代謝紊亂時,內(nèi)皮細胞分泌細胞因子異常及活性減低等,導致內(nèi)皮功能障礙及結構異常,促使血液中的膽固醇等以脂蛋白形式從內(nèi)膜進入血管壁。

血液中的單核細胞也粘附血管內(nèi)皮細胞經(jīng)單核細胞趨化因子等遷移至內(nèi)膜下轉變成為巨噬細胞。巨噬細胞在內(nèi)皮下可大量吞噬吸收氧化修飾低密度脂蛋白(ox-LDL),結果在巨噬細胞內(nèi)大量膽固醇酯蓄積,成為了超載脂質的泡沫細胞。這些泡沫細胞在體內(nèi)趨化移行,造成脂質堆積而形成脂質條紋,成為動脈粥樣硬化早期的重要特征,也是血脂異常常伴有的動脈粥樣硬化病理改變。

巨噬細胞清道夫受體是泡沫化過程的一個重要靶點,包括清道夫受體A(SR-A)及清道夫受體B(SR-B)。SR-A在單核/巨噬細胞表面表達,研究發(fā)現(xiàn)動脈血管損傷處的巨噬細胞通過SR-A不斷攝取ox-LDL和糖基氧化的LDL,導致巨噬細胞內(nèi)脂質蓄積,最終形成動脈粥樣硬化病變早期特征性標志泡沫細胞[8]。CD36是SR-B的亞型,也參與了泡沫細胞的形成過程。研究表明,利用基因干擾技術降低SR-A或CD36活性時,可減少動脈粥樣硬化斑塊及泡沫細胞的形成[9]。由此可見,通過糾正脂質代謝紊亂,保護血管內(nèi)皮細胞,阻斷巨噬細胞“泡沫化”,可以起到防治動脈粥樣硬化的作用。

4 巨噬細胞泡沫化與動脈粥樣硬化

巨噬細胞向泡沫細胞的轉變與細胞內(nèi)膽固醇穩(wěn)態(tài)失衡、膽固醇的吸收與排泄密切相關[10]。過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)、肝X受體(LXRα)、及三磷酸腺苷結合盒轉運體A1(ABCA1)、三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白G1(ABCG1)直接參與調控巨噬細胞內(nèi)膽固醇平衡。對PPARγ-LXRα-ABCG1/ABCA1信號通路表達的研究成為巨噬細胞“泡沫化”研究的熱點。

在泡沫細胞中PPARγ呈高表達,通過巨噬細胞清道夫受體介導攝取的ox-LDL刺激PPARγ基因表達,加速巨噬細胞內(nèi)膽固醇酯的累積[11]。LXR調控細胞內(nèi)膽固醇及脂肪酸的代謝,LXR激動劑可促進巨噬細胞內(nèi)膽固醇的外流。ABCG1是ABC轉運體超家族成員之一,可抑制巨噬細胞內(nèi)大量脂質負荷;ABCA1是一種較大的膜蛋白,控制巨噬細胞內(nèi)膽固醇外流并參與膽固醇逆轉運。PPAR-γ可通過激活LXR信號途徑,上調巨噬細胞內(nèi)ABCA1、ABCG1的表達,刺激膽固醇外流至外周HDL[12],通過HDL將膽固醇轉運進入肝臟,并減少膽固醇的吸收,抑制了巨噬細胞泡沫化過程[13]。

劉萍[14]發(fā)現(xiàn)益氣化瘀祛痰中藥可以上調大鼠主動脈LXRα及ABCA1基因表達,薛偕華[15]證實了澤瀉、白術可上調大鼠腹腔巨噬細胞內(nèi)的LXRα及ABCA1基因表達。我們所在課題組通過提取小鼠腹腔巨噬細胞,發(fā)現(xiàn)祛痰化瘀中藥可以上調巨噬細胞源性泡沫細胞ABCA1基因表達;降低細胞內(nèi)TC、TG含量,證實了中藥可以調節(jié)細胞內(nèi)膽固醇平衡,起到抗巨噬細胞“泡沫化”的作用。

5 問題與展望

脾主運化水谷,布散精微。血脂亦由水谷化生,并依賴脾的轉輸功能布散周身。脾失健運,不能將多余脂質運化,積存在血脈之中而致血脂異常,即內(nèi)生之痰濁,阻礙脈道氣血運行,導致“脈道不利”。脾失健運脂質代謝異常是導致早期動脈粥樣硬化病理變化的主要因素。脾失健運脂質代謝異常,可影響內(nèi)皮細胞結構及功能,促使異常代謝的脂質在血管內(nèi)膜下沉積,形成脂質條紋,導致血管管腔變窄,結構異常,即“脈道不利”。但對其中的具體發(fā)病機制,仍有待進一步闡明。巨噬細胞內(nèi)膽固醇吸收與排泄障礙,穩(wěn)態(tài)失衡,使得巨噬細胞內(nèi)脂質蓄積形成泡沫細胞,這一病理過程的使動環(huán)節(jié)與脾失健運脂質代謝異常密切相關,這其中,可能是脾失健運狀態(tài)下,血管內(nèi)清道夫受體活性受抑及巨噬細胞內(nèi)相關信號通路的異常表達有關。通過實驗研究雖然發(fā)現(xiàn)健脾祛痰中藥可起到保護血管內(nèi)皮細胞、抑制泡沫細胞形成等作用,但其作用機制仍有待進一步補充。闡明脾失健運脂質代謝異常狀態(tài)下,究竟是哪些關鍵環(huán)節(jié)導致了巨噬細胞泡沫化,可為厘清“脾失健運”與“脈道不利”的關系提供科學依據(jù),亦為中醫(yī)“從脾論治”冠心病提供科學依據(jù)。

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(2016-06-17收稿 責任編輯：王明)

Exploration of Spleen Diseases Leading to “Unsmooth Vessels” Based on Macrophage Foam

Zhang Huiyong1, 2, Min Dongyu1, Jia Lianqun2, Yang Guanlin1, 2

(1Blood-vesselLaboratory,AffiliatedHospitalofLiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shenyang110032,China; 2KeyLaboratoryofMinistryofEducationforTCMViscera-StateTheoryandApplications,LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shenyang110847,China)

Spleen governs transportation and transformation of water and food, spreads food essence. Lipid also originates from food and water, and relies on spleen qi distributing essence, and is spread to the whole body by “vessels”. If abnormal lipid metabolism caused by spleen weakness happens, phlegm generates in the body which would obstruct of qi and blood running, leading to “unsmoothness of vessels”. Therefore, abnormal lipid metabolism caused by spleen weakness is a major factor which results in early atherosclerosis formation of fatty streaks. Focusing on the pathological change of fatty streak during early atherogenesis, begin from foam cell formation mechanism, with the aid of in vivo and in vitro experiments, exploration in the effects of lipid metabolic disorder caused by dysfunction of spleen in transportation in macrophage “foam cell formation” and to clarify the pathogenesis of “dysfunction of spleen in transportation” to “unsmoothness of vessels” by the influence of scavenger receptor on macrophages uptake of cholesterol in the blood vessels and the related gene expression of regulation of cholesterol metabolism in macrophages, which can reveal acting mechanism of invigorating spleen for eliminating phlegm Chinese medicine to protect vascular endothelial cells and inhibiting effect mechanism of macrophage “foam cell formation”. To illustrate scientific connotation “spleen disease syndrome, unsmoothness of vessels” in The Inner Cannon of Huangdi, and thus theoretical basis for clinical treated atherosclerosis from spleen could be provided.

Dyslipidemia;Hyperlipemia;High density lipoprotein;Turbid phlegm and blood stasis;Removing blood stasis and dispelling phlegm; Blood vessels

國家重點基礎研究發(fā)展計劃(973計劃)資助項目(編號:2013CB531700);遼寧省自然科學基金資助項目(編號:2015020385);遼寧中醫(yī)藥大學中醫(yī)臟象理論及應用國家教育部重點實驗室開放基金資質項目(編號:2016013)

張會永(1983.12—),男,碩士,副主任中醫(yī)師/副教授,研究方向:中醫(yī)臨床療效評價方法學研究;中醫(yī)藥防治動脈粥樣硬化的基礎研究;名老中醫(yī)學術思想

楊關林(1962.10—),男,碩士,主任醫(yī)師/教授,研究方向:中西醫(yī)結合防治心腦血管疾病;中醫(yī)臟象理論研究,E-mail:yangguanlin945@163.com

R221

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10.3969/j.issn.1673-7202.2017.05.010