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在宮頸癌篩查中液基細(xì)胞學(xué)制片方法及染色法探討

2017-04-02 22:01王瓏吳霞謝愛華盧志勇朱良劉敏
關(guān)鍵詞:載玻片巴氏細(xì)胞學(xué)

王瓏,吳霞,謝愛華,盧志勇,朱良,劉敏

(1、瑞金市婦幼保健院檢驗(yàn)科,江西瑞金342500;2、浦東新區(qū)曹路鎮(zhèn)社區(qū)醫(yī)院,上海201209;3、瑞金市中醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西瑞金342500)

在宮頸癌篩查中液基細(xì)胞學(xué)制片方法及染色法探討

王瓏1,吳霞2,謝愛華3,盧志勇1,朱良1,劉敏1

(1、瑞金市婦幼保健院檢驗(yàn)科,江西瑞金342500;2、浦東新區(qū)曹路鎮(zhèn)社區(qū)醫(yī)院,上海201209;3、瑞金市中醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西瑞金342500)

目的探討宮頸癌及癌前病變?cè)缙诤Y查工作中液基細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)(TCT)配合手工制片法靈活應(yīng)用的實(shí)用檢測(cè)價(jià)值。方法根據(jù)液基細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)(TCT)制片原理,采取離心法制片配合手工法制片,用巴氏染色法染色。結(jié)果液基細(xì)胞學(xué)檢查能有效提高制片滿意率和診斷準(zhǔn)確性,在宮頸癌篩查中具有實(shí)用推廣價(jià)值,TCT檢測(cè)其最終的目的是制作出可診斷的細(xì)胞數(shù)量多、無重疊的薄層細(xì)胞學(xué)均勻涂片,然后用巴氏染色,使用液基細(xì)胞學(xué)TBS診斷標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告結(jié)果。我科采用離心制片法加上配合手工制片法制片,確保制片質(zhì)量,從2008年9月至2016年9月20日,收集制作門診婦科及住院婦科液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本22848例,經(jīng)過離心制片法配合手工法制片,作出客觀準(zhǔn)確報(bào)告。結(jié)論用離心制片法配合手工制片法制片,二種制片方法配合應(yīng)用能夠取長(zhǎng)補(bǔ)短,快速制片,經(jīng)巴氏法染色,能確保標(biāo)本制片質(zhì)量高,從而提高病變陽性檢出率,為液基細(xì)胞學(xué)TBS診斷標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告的準(zhǔn)確性提供可靠保證,具有臨床實(shí)用推廣價(jià)值。

液基細(xì)胞學(xué);離心;離心法制片;手工法制片;制片質(zhì)量;巴氏染色

宮頸癌是我國女性很常見的婦科惡性腫瘤,也是導(dǎo)致婦女死亡率增加的重要疾病。隨著液基細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)(TCT)的廣泛應(yīng)用,宮頸細(xì)胞學(xué)篩查成為我國婦科防癌篩查、監(jiān)視早期發(fā)病和臨床診斷最為實(shí)用和最有效的方法。液基細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)(TCT)作為宮頸癌篩查的首選,其制片與染色方法特別重要,這是TCT能夠發(fā)出正確報(bào)告的保障。我科從2008年9月開始至今2016年9月20日,收集制作門診婦科,保健科,及住院婦科液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本22848例,采用離心制片法配合手工制片法,對(duì)標(biāo)本染片細(xì)胞作出客觀準(zhǔn)確報(bào)告。現(xiàn)將制片方法和染色方法的一些經(jīng)驗(yàn)體會(huì)介紹如下。

1 資料與方法

1.1材料湖北泰康醫(yī)療設(shè)備有限公司提供以下所有設(shè)備和試劑:微電腦控制的TKY-B6B液基薄層細(xì)胞自動(dòng)片機(jī),液基細(xì)胞保存液,宮頸刷,一次性專用塑料吸管,載玻片制片夾,振蕩器,巴氏染色液。另外,鹽酸酒精,堿性溶液等自配,95%乙醇,中性樹膠,蓋玻片(22mm×22mm),帶攝像的顯微鏡(OLYMPUS,CX31),高級(jí)鏡頭紙等醫(yī)院自備。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集門診婦科和保健科及住院部婦科醫(yī)生要嚴(yán)格按照操作程序認(rèn)真進(jìn)行標(biāo)本的采集,標(biāo)本采集時(shí)要盡量避免標(biāo)本內(nèi)含有過多的血液和黏液。標(biāo)本采集完后直接將宮頸刷頭放人液基細(xì)胞保存液中,瓶?jī)?nèi)含有7ml左右細(xì)胞保存液,把瓶蓋擰緊,同時(shí)在標(biāo)本瓶上貼好標(biāo)注有患者:姓名、年齡,序號(hào)信息的標(biāo)簽。

1.2.2液基薄層細(xì)胞學(xué)片的制備將保存液瓶分別用紅色記號(hào)筆編號(hào)分組,首先,把可用離心制片法制片的大部分標(biāo)本分為第一組;其次,把含有較多血液、或者黏液的少部分標(biāo)本,或者標(biāo)本液很清亮內(nèi)含細(xì)胞數(shù)少的標(biāo)本,挑選出來組成按照手工法制片的第二組。然后,將已經(jīng)編號(hào)的第一組液基細(xì)胞保存液瓶依次放入振蕩器內(nèi)振蕩20min左右,每次12瓶;使其刷頭內(nèi)的細(xì)胞充分脫落入保存液中。然后,打開瓶蓋,用鑷子夾住宮頸刷連接部分,輕輕在細(xì)胞保存液中涮洗幾次,以便刷頭部分的細(xì)胞全部進(jìn)入保存液中,丟棄刷頭,加入2ml細(xì)胞處理液,充分混和均勻,把保存液瓶標(biāo)本全部倒入10ml塑料刻度離心管內(nèi),擰緊蓋,再放入離心機(jī)中,以1200r/min的速度離心沉淀5min,取出,打開試管蓋,用一次性專用1ml塑料吸管插入保存液內(nèi),吸去上清液,剩余底部沉淀物1ml左右,充分混合均勻沉淀物,用吸管從底部吸取0.7ml左右混合均勻液體,滴人載玻片夾的小孔濾膜中,將載玻片夾放入細(xì)胞離心涂片機(jī)中,以1200r/min的速度離心制片5min,從制片機(jī)中取出已涂片的載玻片夾,從載玻片夾中取出已涂片的載玻片,自然晾干,然后盡快用95%乙醇固定15min,OG/EA染色(即巴氏染色),常規(guī)用22mm×22mm蓋玻片與中性樹膠封片,高倍鏡鏡檢。

1.2.3手工操作法制片⑴把含有較多血液、或者黏液的少部分標(biāo)本,或者標(biāo)本液很清亮內(nèi)含細(xì)胞數(shù)少的標(biāo)本,挑選出來組成按照手工法制片的第二組,并且把保存液瓶編號(hào),然后在該組細(xì)胞保存液瓶中加入lml冰醋酸(保存液與冰醋酸之比為9:1)振搖,再把第二組標(biāo)本瓶依次放入振蕩器內(nèi)振蕩25min,這樣可使大量的紅細(xì)胞充分溶解,黏液消化。⑵用1ml一次性塑料吸管,將振蕩好的保存液瓶中的液體和底部沉淀物打混勻,全部吸入一次性10ml塑料刻度離心管,用離心機(jī)1200r/min的速度離心5min。⑶將離心好的10ml塑料刻度離心管中的保存液,快速頃倒去上清液,留下管底0.5ml左右的底部沉淀物,再加入2ml細(xì)胞清洗處理液,充分混和均勻。再用離心機(jī)1200r/min的速度離心5min。然后將離心好的的10ml塑料刻度離心管中的保存液2ml左右,用1ml一次性塑料吸管吸去大部分,留下管底大概0.4ml左右的底物液即可。⑷用1ml塑料吸管,吸取管底部0.3ml左右混合均勻液體,在已經(jīng)編號(hào)的干凈載玻片上,用懸滴法,滴下2~3滴液體,均勻涂片即成合格制片。⑸將已涂勻制片成功的載玻片,放入一個(gè)方型器皿中,讓載玻片一頭墊高2cm,使其多余液體向載玻片低的一方緩慢流去,放置0.5h左右膜片自然晾干后,立即放人95%乙醇液中固定5min。⑹染色,離心法制成的標(biāo)本片先放置在標(biāo)本架固定,等待手工操作法把標(biāo)本制片好后,放入上述標(biāo)本架固定好,將二組標(biāo)本片按照順序放置并同時(shí)進(jìn)行巴氏染色,鏡檢。⑺優(yōu)點(diǎn):手工操作法制片載玻片涂片面積大是常規(guī)TCT制片面積的3倍左右,顯微鏡下可以查看的細(xì)胞數(shù)多,可以提高陽性率。缺點(diǎn):制片速度慢,整個(gè)過程耗時(shí)1.5h左右。

1.2.4巴氏染色步驟將二組標(biāo)本片同時(shí)進(jìn)行巴氏染色,首先,95%乙醇固定,10min。清水沖洗,2~3遍脫醇。建議:用一個(gè)可以裝下染色架的塑料杯,在自來水龍頭下,用緩慢的水流速度放水進(jìn)入塑料杯,不要直接將染色架放在水龍頭下直接沖洗標(biāo)本片,那樣容易把片中的細(xì)胞膜沖走部分。再進(jìn)行下面染色步驟。蘇木素,5~10min。清水沖洗,2~ 3遍直至干凈。鹽酸分化液,1~2s,清水緩慢沖洗,2~3遍直至干凈。飽和碳酸鋰溶液,2min用于返藍(lán),(飽和碳酸鋰溶液隨蘇木素染色液更換時(shí)同時(shí)更換)。清水緩慢沖洗,2~3遍直至干凈。95%乙醇固定,漂洗。橙黃-G62-3min,95%乙醇I、Ⅱ缸洗各1min。EA505min。95%酒精Ⅰ、Ⅱ缸洗各1min。無水酒精Ⅰ、Ⅱ缸洗各1min(脫水干凈)。二甲苯2缸各透明3min。

1.2.5液基細(xì)胞學(xué)的診斷使用帶攝像的顯微鏡(OLYMPUS,CX31)觀察標(biāo)本染片,先用低倍鏡觀察細(xì)胞膜片尋找可以診斷的細(xì)胞,然后用高倍鏡做判斷;液基細(xì)胞學(xué)的診斷采用TBS(the Bethesda system,TBS)診斷標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告檢測(cè)結(jié)果。

2 結(jié)果

TCT標(biāo)本經(jīng)離心涂片機(jī)制片,形成一直徑20mm的圓形細(xì)胞膜薄片,其細(xì)胞背景干凈、均勻平鋪、數(shù)量較多、重疊很少。另外有需要的標(biāo)本經(jīng)手工操作法制片,形成一個(gè)長(zhǎng)45mm,寬22mm,細(xì)胞膜薄片,其細(xì)胞數(shù)量是TCT離心涂片機(jī)制片的3倍左右、均勻平鋪、有少部分細(xì)胞重疊現(xiàn)象。標(biāo)本經(jīng)離心涂片或經(jīng)手工法制片,同時(shí)經(jīng)巴氏染色后,色彩艷麗,對(duì)比鮮明,細(xì)胞核呈紫藍(lán)色、藍(lán)色,核仁紅色。底層、中層細(xì)胞胞漿藍(lán)色至淡紫藍(lán)色不等。表層細(xì)胞胞漿呈紅色、粉紅色。紅細(xì)胞呈紅色或橙紅色。黏液呈淡藍(lán)色。二種方法同時(shí)配合靈活使用,可以大大提高細(xì)胞陽性檢出率。為液基細(xì)胞學(xué)TBS診斷標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告的準(zhǔn)確性提供可靠保證。

3 討論

TCT制片技術(shù)和TBS報(bào)告系統(tǒng)能較全面反映宮頸病變的情況,現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于婦科防癌普查,通過定期正規(guī)的篩查,能早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌及癌前病變,從而達(dá)到早期治療的目的,對(duì)此,阻止病變升級(jí)是預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵。我科從2008年9月至2016年9月20日,收集制作門診婦科,保健科婦科,住院部婦科液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本22848例,使用離心涂片機(jī)制作液基薄層細(xì)胞學(xué)涂片配合手工法制片,二種制片方法配合應(yīng)用能夠起到取長(zhǎng)補(bǔ)短,快速制片,為進(jìn)行日常細(xì)胞學(xué)工作和進(jìn)行大范圍的宮頸或者陰道細(xì)胞學(xué)篩查,彌補(bǔ)了單獨(dú)離心涂片機(jī)制片的不足,為臨床作出客觀準(zhǔn)確的TCT結(jié)果報(bào)告。

液基薄層細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)離心沉淀制片方法,一次可以處理12個(gè)標(biāo)本,涂片質(zhì)量可保證,可顯著降低技術(shù)人員的工作量、大大提高工作效率,但是,單獨(dú)使用離心沉淀法制片,在遇到血性標(biāo)本,黏液過多標(biāo)本,或者標(biāo)本液很清亮內(nèi)含細(xì)胞數(shù)少的標(biāo)本時(shí),如繼續(xù)使用離心沉淀法制片,制出的涂片上可以診斷的細(xì)胞數(shù)量很少,從而會(huì)增加假陰性率;所以,為了防止上述情況的發(fā)生,輔助采用手工操作法制片可彌補(bǔ)離心沉淀法制片之不足之處。但是,全部標(biāo)本單獨(dú)采用手工操作法制片,在標(biāo)本數(shù)量多的情況下,手工操作法制片,畢竟速度較慢,會(huì)影響標(biāo)本檢測(cè)速度,導(dǎo)致標(biāo)本出結(jié)果報(bào)告的時(shí)間延長(zhǎng),故二種制片方法靈活配合應(yīng)用才能夠起到取長(zhǎng)補(bǔ)短,快速制片,盡快出結(jié)果報(bào)告的目的。注意以下幾個(gè)重點(diǎn):

⑴獲得高質(zhì)量的標(biāo)本是提高液基細(xì)胞學(xué)涂片檢測(cè)陽性率的保證:臨床送檢的標(biāo)本應(yīng)將刷頭在保存液中充分涮洗,以便獲得較多可診斷的細(xì)胞數(shù)量,一般要求每張液基細(xì)胞涂片要有大約5000個(gè)保存完好、結(jié)構(gòu)形態(tài)清晰的鱗狀上皮細(xì)胞[1,2]。⑵標(biāo)本要及時(shí)固定:固定的目的在于盡可能的保持細(xì)胞原有形態(tài)結(jié)構(gòu),凝固、沉淀細(xì)胞內(nèi)原有產(chǎn)物[3],盡管液基細(xì)胞保存液中含有一定量的固定液.但遠(yuǎn)未達(dá)到固定良好的效果.因此臨床在采集完標(biāo)本后應(yīng)立即將宮頸刷頭放入液基細(xì)胞保存液中,擰緊瓶蓋后盡快送檢;細(xì)胞病理科收到標(biāo)本后,應(yīng)盡快制作薄層細(xì)胞學(xué)涂片,自然晾干后,立即放人95%乙醇液中固定20min。⑶處理前應(yīng)先檢查送檢標(biāo)本質(zhì)量的好壞:造成液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本不滿意的常見原因?yàn)檫^多的血液和(或)黏液,白帶過多等因素[4-6]細(xì)胞保存液中含有紅細(xì)胞和黏液溶解劑,一般不用特殊處理,若送檢標(biāo)本含血液過多,可在細(xì)胞保存液中加入lml冰醋酸(保存液與冰醋酸之比為9:1)振搖,離心沉淀即可[7,8]標(biāo)本含黏液過多,可采用酶消化處理,離心后涂片[9]。⑷操作制片離心機(jī)時(shí):標(biāo)本細(xì)胞保存液瓶每個(gè)瓶蓋要重新擰緊,防止液體溢出瓶蓋外面,放置在振蕩器孔槽內(nèi),振蕩20min.載玻片與制片夾之間墊塞要塞緊,制片夾標(biāo)本放置在懸掛離心機(jī)盤卡槽后,檢查是否對(duì)稱放置牢靠,嚴(yán)防沒有對(duì)稱放置制片夾標(biāo)本就開機(jī)離心制片,不然就此開機(jī),就會(huì)產(chǎn)生離心制片機(jī)內(nèi)制片夾標(biāo)本被毀的嚴(yán)重后果。⑸離心沉淀后移入量的把握是關(guān)鍵:若沉淀物較多,可傾其上清夜,剩下少量細(xì)胞保存液與沉淀物混均.勿太黏稠.用一次性專用塑料吸管(吸管上有刻度1ml,吸取0.7ml左右即可。若沉淀物不多,可直接將吸管插入細(xì)胞保存液瓶底部吸取0.7ml左右然后滴加入載玻片上的微孔濾膜中,混均,充滿整個(gè)濾膜,勿出現(xiàn)空白區(qū),否則離心涂片不均。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)證明,我們認(rèn)為吸取0.7ml左右為最佳,過少容易產(chǎn)生涂片不均,或者有時(shí)出現(xiàn)空白區(qū)不見細(xì)胞。過多易出現(xiàn)殘存液體,不容易干,細(xì)胞漂浮,晾干后細(xì)胞膜厚薄不均,細(xì)胞重疊,不便鏡檢等客觀現(xiàn)象。⑹染色時(shí)間把握要恰當(dāng):液基細(xì)胞學(xué)涂片的常規(guī)染色方法是蘇木素,巴氏染色法(OG/EA染色法)[10]根據(jù)染液配制的時(shí)間長(zhǎng)短,適當(dāng)增加或減少染色的時(shí)間,使用過久的染液要及時(shí)更換,重新配制,或者購買新染色液更換,染色要豐富而鮮艷,細(xì)胞核染色要深淺適度,結(jié)構(gòu)要清晰,不同層次的上皮細(xì)胞胞漿應(yīng)著不同顏色(藍(lán)色、紫藍(lán)、粉紅色、紅色)[1]。細(xì)胞核染色效果的估算可參照下面方法:新染色液,每次按染1000人份左右計(jì)算,用30人份的銅制染色架,總的可染33個(gè)架次;在使用新蘇木素染色液時(shí),可以按照以下簡(jiǎn)單方法估算:第1~11架次,用5~6min;第12~22架次,用7~8min;第23~33架次,用9~10min。染色架次到33架左右,細(xì)胞核著色效果不佳,胞漿不太清晰時(shí),要保持細(xì)胞核染色要深淺適度,結(jié)構(gòu)要清晰,就必須適時(shí)更換染色液(巴氏染色法染色液更換時(shí)間,以蘇木素染色液的細(xì)胞核染色效果為準(zhǔn),需要更換時(shí)全套染色液同時(shí)更換)。還有:氣溫較低時(shí)蘇木素染色液不易著色,可適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間;故冬天與夏天比較,夏天溫度高>35℃時(shí),染色時(shí)間在原來染色時(shí)間的基礎(chǔ)上減低1~3min。冬天溫度低<15℃時(shí),染色時(shí)間在原來染色時(shí)間的基礎(chǔ)上增加1~3min。蘇木素貯存溫度過高會(huì)導(dǎo)致氧化過度,應(yīng)注意避光貯存于5℃~25℃環(huán)境。⑺鹽酸分化時(shí)間,很關(guān)鍵;可以按照下面方法操作:以一份新鹽酸酒精能分化1000人份計(jì)算,每架30人份,大概能夠分化33架次,在新?lián)Q液時(shí):第1~7架次用:1s;第8~13架次用:1.5s,第14~20架次用,2s,第21~27架次,2.5s,第28~33架次用,3s左右。原因:分色是用鹽酸洗去細(xì)胞吸附過多的蘇木素,讓核質(zhì)對(duì)比鮮明,分色時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則核變淡染。另外,鹽酸分化液隨著使用次數(shù)的增加,鹽酸乙醇的濃度會(huì)逐漸減低,所以只有逐漸增加鹽酸分化時(shí)間,來彌補(bǔ)鹽酸乙醇溶液因?yàn)闈舛鹊慕档褪蛊溆绊懠?xì)胞酸化效果。⑻稀釋后的碳酸鋰溶液用于藍(lán)化,時(shí)間不宜超過3min,不然,細(xì)胞膜片會(huì)產(chǎn)生背景灰暗,細(xì)胞胞漿染色偏暗,整體染色不鮮艷等等缺陷。藍(lán)化數(shù)量也應(yīng)該以藍(lán)化1000人份為標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算,使用達(dá)標(biāo)準(zhǔn)的碳酸鋰溶液應(yīng)該及時(shí)更換,以免影響藍(lán)化效果。⑼染色試劑貯存時(shí),應(yīng)盡量避免高溫、低溫及光亮環(huán)境,以免影響品質(zhì)和染色效果。染色試劑應(yīng)該有計(jì)劃購買,特別是南方夏天室外溫度很高,應(yīng)該防止運(yùn)輸途中高溫引起試劑質(zhì)量變化,不宜一次性購買過多。⑽顯微鏡的保養(yǎng):特別重要的是高倍鏡(40×),要經(jīng)常用高級(jí)鏡頭紙粘上鏡液維護(hù),

TCT是臨床上宮頸癌早期篩查的常用方法之一,是現(xiàn)存的最先進(jìn)的宮頸癌細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù),與傳統(tǒng)巴氏染色相比,TCT可明顯提高樣本細(xì)胞的質(zhì)量和宮頸癌細(xì)胞的檢出率,并能發(fā)現(xiàn)部分人處于癌前病變狀態(tài)的細(xì)胞,并且TCT可以減少巴氏染色的重復(fù)次數(shù),更容易被患者接受。離心制片法的大部分標(biāo)本,TCT檢查結(jié)果陽性率為41.5%[11]。引起陽性率不高的一個(gè)重要原因是:當(dāng)部分標(biāo)本含有較多血液、或者黏液時(shí),或者標(biāo)本液很清亮內(nèi)含細(xì)胞數(shù)少的標(biāo)本時(shí),容易造成檢測(cè)假陰性,對(duì)此,我們通過把上述含有較多血液、或者黏液少的部分標(biāo)本,或者標(biāo)本液很清亮內(nèi)含細(xì)胞數(shù)少的標(biāo)本,挑選出來組成按照手工法制片的第二組制片方法,可以大大提高TCT檢查結(jié)果陽性率;作為宮頸癌篩查的首選方法,其制片與染色方法特別重要,這是TCT能夠發(fā)出正確報(bào)告的保障。

現(xiàn)在很多醫(yī)院細(xì)胞病理科都是單獨(dú)使用一種方法在做液基細(xì)胞制片,我們認(rèn)為很不妥當(dāng),因?yàn)閱为?dú)使用離心法做TCT液基細(xì)胞制片,容易產(chǎn)生假陰性,而單獨(dú)使用手工法做細(xì)胞制片,在工作量大的情況下,又會(huì)影響工作效率,綜上所述,我們認(rèn)為二種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),只有同時(shí)把上述二種方法相互靈活配合使用,取長(zhǎng)補(bǔ)短,快速制片,才能夠確保細(xì)胞病理標(biāo)本制片做到高標(biāo)準(zhǔn)高質(zhì)量出報(bào)告結(jié)果,從而提高標(biāo)本病變陽性檢出率。

總之,認(rèn)真掌握好液基細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)(TCT),用離心制片法配合手工制片法制片,二種制片方法配合應(yīng)用,經(jīng)巴氏法染色,能夠確保標(biāo)本制片高質(zhì)量,為液基細(xì)胞學(xué)TBS診斷標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告的準(zhǔn)確性提供可靠保證,并可大大提高病變陽性檢出率,提高臨床診斷準(zhǔn)確性,起到早發(fā)現(xiàn)早診斷早治療的作用,有助于降低宮頸癌的發(fā)病率,具有臨床實(shí)際應(yīng)用推廣價(jià)值。

[1]梁忠泉,袁昌隆,張寶賀.宮頸液基細(xì)胞學(xué)離心涂制片法及體會(huì)[M].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2015,33(2):251-252.

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R737.33,R446.8

A

1674-1129(2017)04-0532-04

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.04.027

2016-11-22;

2017-05-05)

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