王 鳳，吳珊珊，萬(wàn)麗平

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116011 2.大連醫(yī)科大學(xué) 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院，遼寧 大連 116044)

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論 著

震蕩對(duì)血小板聚集功能檢測(cè)的影響

王 鳳1，吳珊珊2，萬(wàn)麗平1

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116011 2.大連醫(yī)科大學(xué) 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院，遼寧 大連 116044)

目的 研究震蕩對(duì)血小板聚集功能檢測(cè)的影響。方法 選取2016年8月到2016年11月就診于大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院臨床確定診斷為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的患者40例，采用PL-12血小板功能分析儀檢測(cè)震蕩前后血小板聚集功能，誘導(dǎo)劑分別是花生四烯酸(arachidonic acid,AA)和二磷酸腺苷(adenosine disphosphate, ADP)，分析血小板最大聚集率(maximum aggregation rate,MAR)和平均聚集率(average aggregation rate,AAR )。結(jié)果 以AA為誘導(dǎo)劑組,震蕩前全血標(biāo)本的MAR為31.93±19.86，震蕩后全血標(biāo)本MAR 28.83±17.31,兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.128，P>0.05);震蕩前全血標(biāo)本的AAR為33.27±19.78，震蕩后全血標(biāo)本AAR 29.95±15.98,兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.320，P>0.05)。以ADP為誘導(dǎo)劑組,震蕩前全血標(biāo)本的MAR為54.48±15.31，震蕩后全血標(biāo)本MAR 45.61±17.20,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.668，P<0.05);震蕩前全血標(biāo)本的AAR為55.34±18.1，震蕩后全血標(biāo)本AAR 49.24±17.45,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.682,P<0.05)。結(jié)論 MAR和AAR是臨床判斷抗血小板聚集藥物療效的重要指標(biāo)，震蕩會(huì)對(duì)全血標(biāo)本血小板聚集功能中MAR和AAR產(chǎn)生影響，故在日常檢驗(yàn)工作中操作人員應(yīng)避免不當(dāng)?shù)恼鹗?，以免造成錯(cuò)誤的檢測(cè)結(jié)果，影響臨床對(duì)患者血小板功能的評(píng)估。

血小板聚集；震蕩 ；血小板分析儀；最大聚集率

血栓性疾病具有高發(fā)病率、高致殘率和高致死率的特點(diǎn)，已成為威脅人類健康和生命的主要疾病。常見(jiàn)的血栓性疾病有心肌梗塞、缺血性腦卒中等。目前常用的治療手段包括抗凝、抗血小板藥物治療、溶栓及介入手術(shù)治療等。其中抗血小板聚集藥物的使用對(duì)預(yù)后尤為重要，在用藥過(guò)程中，針對(duì)不同個(gè)體，為了準(zhǔn)確對(duì)抗血小板聚集藥物的療效進(jìn)行有效評(píng)價(jià)和監(jiān)控，指導(dǎo)臨床醫(yī)生進(jìn)行必要的藥物調(diào)整，確保對(duì)血栓性疾病預(yù)防和治療達(dá)到預(yù)期效果并避免或減少副作用，血小板聚集功能實(shí)驗(yàn)已不可或缺。PL血小板分析儀具有良好的線性范圍[11]，近年來(lái)開(kāi)始投入臨床使用。大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院于2015年8月開(kāi)展了血小板聚集功能檢測(cè)。而此項(xiàng)檢測(cè)過(guò)程中，為保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，要盡量避免可能影響血小板聚集的外部因素，其中標(biāo)本運(yùn)輸過(guò)程中會(huì)有不同程度震蕩，筆者就震蕩因素對(duì)血小板聚集功能試驗(yàn)的主要結(jié)果的影響進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析，分析標(biāo)本在震蕩前后的血小板最大聚集率(MAR)和血小板平均聚集率(AAR)的變化，探討震蕩是否對(duì)血小板聚集功能產(chǎn)生影響，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

收集2016年8月到2016年11月在大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院確診冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的患者40例血液標(biāo)本，患者均遵醫(yī)囑服用阿司匹林腸溶片，聯(lián)合氯吡格雷抗血小板聚集藥物。

1.2 主要儀器與試劑

PL-12血小板功能分析儀(江蘇英諾華醫(yī)療技術(shù)有限公司)，試劑主要包括誘導(dǎo)劑二磷酸腺苷(adenosine disphosphate, ADP)，花生四烯酸(arachidonic acid,AA)。

1.3 研究方法

采集靜脈血于3.8%枸櫞酸鈉抗凝管，采用PL-12血小板功能分析儀，檢測(cè)經(jīng)AA和ADP兩種誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的血小板最大聚集率(MAR)和平均聚集率(AAR)水平；然后將標(biāo)本顛倒震蕩5 min，檢測(cè)震蕩后由AA和ADP兩種誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的血小板最大聚集率MAR及平均聚集率AAR水平。全部實(shí)驗(yàn)均在采血后2 h內(nèi)完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，分別對(duì)AA誘導(dǎo)和ADP誘導(dǎo)的血小板聚集震蕩前后的MAR和AAR進(jìn)行均值比較，采用配對(duì)t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 AA誘導(dǎo)的血小板聚集各參數(shù)的比較

以AA為誘導(dǎo)劑,震蕩前全血標(biāo)本的MAR為31.93±19.86，震蕩后全血標(biāo)本的MAR 28.83±17.31,兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.128，P>0.05)。震蕩前全血標(biāo)本的AAR為33.27±19.78，震蕩后全血標(biāo)本的AAR為29.95±15.98,兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.320,P>0.05)。

2.2 ADP誘導(dǎo)的血小板聚集各參數(shù)的比較

以ADP為誘導(dǎo)劑,震蕩前全血標(biāo)本的MAR為54.48±15.31，震蕩后全血標(biāo)本的MAR 為45.61±17.20,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.668,P<0.05);震蕩前全血標(biāo)本的AAR為55.34±18.1，震蕩后全血標(biāo)本的AAR 為49.24±17.45,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.682,P<0.05)。

3 討 論

血小板聚集是血小板的一個(gè)重要生理特性，在維持止血和血栓形成過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用[1-3]，抗血小板藥物是血栓疾病預(yù)防和治療的基石。近年來(lái)大量的血栓疾病治療實(shí)踐和臨床研究證實(shí)抗血小板藥物存在抵抗或者反應(yīng)多樣性的情況[4-5]，在服用抗血小板藥物后，血小板功能水平仍然高的患者，發(fā)生或再發(fā)生血栓的幾率更高，相反血小板功能水平過(guò)低，患者出血的風(fēng)險(xiǎn)比較大。血小板聚集形成血栓是臨床急性冠脈綜合征和經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療術(shù)后發(fā)生不良心血管事件的基本原因[6]?？寡“逅幬镏委熓欠乐构跔顒?dòng)脈粥樣硬化的基石。為評(píng)估抗血小板治療效果安全性和有效性，提高血小板功能檢測(cè)顯得至關(guān)重要[7]。

目前臨床上檢測(cè)血小板聚集功能的常用方法有比濁法、電阻抗法等。PL血小板分析儀是國(guó)家863科技部項(xiàng)目成果，已獲得多項(xiàng)專利，近年來(lái)開(kāi)始投入臨床使用。PL-12血小板功能分析儀基于血小板連續(xù)計(jì)數(shù)法，排除紅細(xì)胞、白細(xì)胞等其他血液成分的影響，通過(guò)觀察誘聚劑加入前后引起的血小板聚集數(shù)量的變化來(lái)評(píng)估血小板的功能，且不受溶血、脂血等標(biāo)本濁度的影響，在檢測(cè)結(jié)果的線性范圍、精密度、和變異性上表現(xiàn)出極大的優(yōu)勢(shì)。研究發(fā)現(xiàn)[9-10]，PL分析儀與傳統(tǒng)的檢驗(yàn)血小板聚集功能的LT法、Verify Now分析儀法對(duì)比具有良好的相關(guān)性[8]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，由ADP誘導(dǎo)的血小板聚集標(biāo)本經(jīng)過(guò)震蕩后，MAR及AAR較震蕩前有顯著性差異。由AA誘導(dǎo)的血小板聚集標(biāo)本經(jīng)過(guò)震蕩后MMR及AAR較震蕩前無(wú)顯著性差異。原因可能與其不同的作用機(jī)制有關(guān)。由AA誘導(dǎo)的血小板聚集與血小板環(huán)氧化酶及血栓素A2生成有關(guān)；而由ADP誘導(dǎo)的血小板聚集則與血小板細(xì)胞內(nèi)的高密度顆粒有關(guān)及血小板膜上的ADP受體相關(guān)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，標(biāo)本在運(yùn)輸過(guò)程中出現(xiàn)的震蕩可能會(huì)激活血小板表面的受體比如ADP受體、膠原受體和血栓素A2受體等，這些受體在接觸到相應(yīng)的誘導(dǎo)劑之后激活血小板，促使血小板表形成Ⅱb、Ⅲa復(fù)合物即纖維蛋白原受體，與血液中的纖維蛋白原相結(jié)合，最終使得血小板活化聚集，形成血小板血栓。血小板在被激活的同時(shí)，還會(huì)釋放一些物質(zhì)，這些物質(zhì)會(huì)激活人體的凝血系統(tǒng)，將血液中的纖維蛋白原活化成纖維蛋白，進(jìn)而以血小板血栓為核心將紅細(xì)胞、白細(xì)胞等網(wǎng)在一起形成一個(gè)更大的血栓，從而導(dǎo)致缺血性事件的發(fā)生。由于實(shí)驗(yàn)采用的是全血標(biāo)本，保存了全部血小板，震蕩容易造成血小板體外激活。因此，在臨床標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中，應(yīng)盡量避免氣泵運(yùn)輸或血液標(biāo)本在運(yùn)輸途中試管反復(fù)顛倒引起震蕩，標(biāo)本采集完成后，應(yīng)盡快送檢，為臨床提供真實(shí)準(zhǔn)確全面的分析結(jié)果。

[1] Bray PF，Cannon CP，Goldschmidt-Clermont P，et al．The platelet PIA 2 and angiotensin converting enzyme (ACE) Dallele polymorphism and the risk of recurrent events after acute myocardial infarction[J]．Am J Cardio，2001,88(4):347-352．

[2] Davì G，Patrono C． Platelet activation and atherothrombosis[J]．N Engl J Med，2007,357 (24) : 2482-2494．

[3] Angiolillo DJ，Capodanno D，Goto S．Platelet thrombin receptor antagonism and atherothrombosis[J]．Eur Heart J,2010,31 (1) :17-28．

[4] 徐士欣,仲愛(ài)芹,許穎智,等.活化血小板在缺血性腦卒中病理機(jī)制中的作用研究進(jìn)展[J].中華老年心腦血管病雜志,2014,16(10)::1112-1113.

[5] 王璐璐,王雁,李培媛,等.5-脂氧合酶激活蛋白基因多態(tài)性增加阿司匹林抵抗易感性[J].中華老年心腦血管雜志,2016,18(10)：1053-1056.

[6] Ong PI, Athanasiadis A,Perne A, et al.Coronary vasomotor abnormalities in patients with stable angina after successful stent implantation but without in-stent restenosis[J]．Clin Res Cardiol，2014，103(1):11-19.

[7] 劉浙波，夏豪，陶波,等.冠心病經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療術(shù)后根據(jù)血小板聚集功能調(diào)整抗血小板治療方案的臨床價(jià)值[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2016,25(22):2429-2431.

[8] 梅金平,周欣，姬文婕，等.流式細(xì)胞術(shù)與光學(xué)比濁法檢測(cè)血小板聚集率的比較[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2015,33(2):81-84.

[9] 彭瑜 張鉦，白明，等.平均血小板體積和血小板聚集率與急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者支架內(nèi)血栓的相關(guān)性研究[J].中國(guó)介入心臟病學(xué)雜志,2015,23(2):75-79.

[10] 陳縉，張海洋，吳同果，等.血小板聚集功能檢測(cè)的臨床應(yīng)用[J].心臟雜志,2015,27(6):732-735.

[11] 張有濤,趙益明,季順東,等.PL- 11 血小板分析儀檢測(cè)功能的性能評(píng)價(jià)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012,35(12):1139-1141.

本刊被國(guó)際重要數(shù)據(jù)庫(kù)收錄情況

截止2011年，本刊已被7種國(guó)際重要數(shù)據(jù)庫(kù)收錄。包括：(1)美國(guó)《化學(xué)文摘》(CA, Chemical Abstracts)；(2)荷蘭《醫(yī)學(xué)文摘》(EM，Excepta Media)，(3)美國(guó)《劍橋科學(xué)文摘(自然科學(xué)版)》(CSA Natural Science)；(4)美國(guó)《烏利希期刊指南》(Ulrich PD，Ulrich's Periodicals Directory)；(5)荷蘭《文摘與引文數(shù)據(jù)庫(kù)》(Scopus)；(6)英國(guó)《農(nóng)業(yè)與生物科學(xué)研究文摘》(CAB Abstracts，Centre for Agriculture and Bioscience Abstracts)；(7)英國(guó)《公共健康》(Global Health，Centre for Agriculture and Bioscience Abstracts)。

Effect of shaking on platelet aggregation function test

WANG Feng1, WU Shanshan2, WAN Liping1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,theFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116011,China; 2.DepartmentofLaboratoryMedicine,DalianMedicalUniversity,Dalian116044,China)

Objective To study the effect of shaking on platelet aggregation function test. Methods Totally, 40 patients with coronary atherosclerotic heart disease diagnosed in the First Affiliated Hospital of Dalian Medical University from August 2016 to November 2016 were selected as subjects in the study. PL-12 platelet function analyzer was used to detect platelet aggregation function. MAR and AAR were detected before and after shaking. Inducers used in this study were AA and ADP. Results In AA inducer group, MAR of blood samples were 31.93±19.86 before shaking and 28.83±17.31 after shaking, respectively; there was no significant difference between the two groups (t=1.128，P>0.05). AAR of blood samples were 33.27±19.78 before shaking and 29.95±15.98 after shaking, respectively; there was no significant difference between the two groups (t=1.320，P>0.05). In ADP inducer group, MAR of blood samples were 54.48±15.31 before shaking and 45.61±17.20 after shaking, respectively; the difference was statistically significant (t=3.668，P<0.05). AAR of blood samples were 55.34±18.1 before shaking and 49.24±17.45 after shaking, respectively; the difference was statistically significant (t=2.682，P<0.05). Conclusion MAR and AAR are important indicators to evaluate platelet function and drug efficacy for clinical physicians. Shaking will affect the results of MAR and AAR. For laboratory technologists, inappropriate shaking may lead to false results and should be avoided.

platelet aggregation; concussion; platelet analyzer; maximum aggregation rate

10.11724/jdmu.2017.02.15

王 鳳(1981-)，女，主管技師。E-mail：wangfeng5006@163.com

萬(wàn)麗平，副主任技師。E-mail：wlplab@163.com

R446.1

A

1671-7295(2017)02-0173-03

王鳳，吳珊珊，萬(wàn)麗平.震蕩對(duì)血小板聚集功能檢測(cè)的影響[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2017,39(2)：173-175.

2017-01-13；

2017-03-19)