曹艷玲 楊書彥
(內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院,內蒙古呼和浩特 010017)
為探究其在類風濕關節(jié)炎中的參與作用,選取本院類風濕關節(jié)炎患者與正常者進行對照研究,結果如下。
病例來源于2015年3月—2017年3月本院收治的50例類風濕關節(jié)炎患者,作為觀察組,男22例,女28例,年齡27~64歲,平均年齡(48.5±6.6)歲,該組患者符合類風濕關節(jié)炎的臨床診斷標準[1]。對照組為在我院健康體檢的30名正常者,其中男12例,女18例,年齡25~69歲,平均年齡(48.9±6.3)歲。醫(yī)學倫理會批準此次研究,納入病例均自愿參與研究,并簽署知情同意書。排除標準:(1)存在重要臟器疾病者及伴隨心、肝、腎功能疾病者;(2)意識模糊及精神紊亂者;(3)合并嚴重器質性病變者;(4)合并感染、腫瘤及其他結締組織疾病者。兩組患者一般資料經(jīng)過統(tǒng)計學分析,差異不存在統(tǒng)計學意義。
于清晨空腹狀態(tài)下取患者外周靜脈血2 mL保存于EDTA抗凝管中流式送檢,從中抽取100 μL放入另一試管,分別加入 20 μL抗CD19-PE-CY5、20 μL抗 CD24-PE以及5 μL抗CD38-APC,充分搖勻,避光狀態(tài)下放置室內,以15 min為宜。在其中加入2 mL紅細胞裂解液,避光10 min,給予2 000 r/min低溫離心處理,時間為5 min,去除上清液,采用2 mL磷酸鹽緩沖液洗滌2次,在其中加入0.5 mL PBS重懸,給予上流式細胞儀檢測,測定淋巴細胞表面熒光素熒光強度,給予Cellquest軟件分析,對陽性細胞百分率予以記錄。CD19+B淋巴細胞采用CD19單抗及SSC參數(shù)標記。
所有的計數(shù)資料均用%表示,進行χ2檢驗,計量資料選擇標準差(x±s)表示,采取t檢驗,數(shù)據(jù)計算在統(tǒng)計學軟件SPPSS18.0上進行處理,數(shù)據(jù)之間的差異有統(tǒng)計學意義表示為P<0.05。
CD24hi、CD38hi在CD19+B淋 巴 細 胞 的 百 分 率 為6.47%±4.83%,略低于對照組的7.24%±3.42%,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見圖1。
圖1 兩組外周血CD19+、CD24hi、CD38hiBregs
類風濕關節(jié)炎患者CD19+、CD24hi、CD38hiBregs比例與年齡、抗CCP抗體滴度水平呈現(xiàn)為明顯負相關,與晨僵時間正相關(P<0.05)。見圖2-4。
動物實驗研究顯示通過負向調節(jié)免疫反應,能夠有效緩解因外周血等引起的自身免疫疾病[2]。本研究探究了調節(jié)B淋巴細胞在類風濕關節(jié)炎中的參與機制,結果顯示類風濕關節(jié)炎患者CD19+、CD24hi、CD38hiBregs比例與年齡、抗CCP抗體滴度水平呈現(xiàn)為明顯負相關,與晨僵時間正相關(P<0.05),研究結果能夠為臨床治療類風濕關節(jié)炎提供參考。綜上所述,類風濕關節(jié)炎發(fā)病機制與調節(jié)B淋巴細胞相關,能夠為類風濕關節(jié)炎治療提供新思路。
圖2 與年齡的相關性分析
圖3 與抗CCP抗體滴度的相關性
圖4 與晨僵時間的相關性分析
[1] 薛麗佳,黃巧容,林輝,等.B淋巴細胞微粒在類風濕關節(jié)炎患者外周血和關節(jié)液中的表達及臨床意義[J].西部醫(yī)學,2016,28(11):1502-1505.
[2] 張智賢,何秋瑩,方偉禎,等.CD19、CD27和 CD38標記的B淋巴細胞亞群在類風濕關節(jié)炎患者外周血中的變化及意義[J].中華微生物學和免疫學雜志,2015(5):382-386.