馮佳

【摘要】 目的：探討胃腸道間質(zhì)瘤（GIST）的病理特點(diǎn)及免疫組化特點(diǎn)。方法：選擇首次診治的GIST患者100例作為研究對(duì)象，觀察大體標(biāo)本以后，采用HE常規(guī)染色法及免疫組化（Envision法）進(jìn)行檢驗(yàn)。結(jié)果：肉眼觀察標(biāo)本大體結(jié)構(gòu)，腫瘤位置位于黏膜下層、肌層、漿膜外及腸系膜上，腫瘤直徑0.8～10.5 cm，極低度和低度侵襲危險(xiǎn)性者在消化道內(nèi)呈膨脹性生長(zhǎng)，邊界清楚，有的無(wú)包膜或有假包膜，切面灰白、局部灰紅、質(zhì)韌；中、高度侵襲危險(xiǎn)性者質(zhì)軟，呈息肉狀，伴有出血、壞死、囊性變。鏡下觀察，腫瘤細(xì)胞呈梭形細(xì)胞型60例（60.00%），呈上皮樣細(xì)胞型占28例（28.00%）、混合型12例（12.00%）；免疫組化分析結(jié)果顯示，CD117陽(yáng)性的占92.00%、CD34陽(yáng)性的占84.00%、兩者同時(shí)表達(dá)占72.00%；S100陽(yáng)性占36.00%、SMA陽(yáng)性占28.00%。在高、中、低、極低度侵襲危險(xiǎn)性的GIST中免疫標(biāo)記Ki67陽(yáng)性率分別占73.68%、40.00%、23.40%、11.11%，高、中度侵襲危險(xiǎn)性組與低、極低侵襲危險(xiǎn)性組Ki67陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：CD117和CD34標(biāo)記陽(yáng)性是確定GIST具有診斷價(jià)值的依據(jù)，免疫組化染色法能夠有效地判斷并證實(shí)GIST腫瘤細(xì)胞。

【關(guān)鍵詞】 胃腸道間質(zhì)瘤； CD117； CD34； 免疫組化

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.30.026 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2016）30-0047-02

胃腸間質(zhì)腫瘤（Gastrointestinal stromal tumor，GIST）為消化系統(tǒng)常見(jiàn)腫瘤之一，起源于胃腸道起搏細(xì)胞，多由未分化或梭行或上皮樣細(xì)胞構(gòu)成，為臨床研究中發(fā)現(xiàn)的與其他經(jīng)典的腫瘤類型不同的消化系統(tǒng)的腫瘤，但由于過(guò)去科學(xué)技術(shù)及臨床檢測(cè)水平有限，導(dǎo)致GIST經(jīng)常會(huì)被誤診為其他具有梭形細(xì)胞特征的腫瘤，比如平滑肌腫瘤或神經(jīng)鞘腫瘤等[1]，隨著免疫組化、電鏡以及分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，診斷治療水平有了顯著提高。本文通過(guò)分析筆者所在醫(yī)院GIST患者常規(guī)HE及免疫組織化學(xué)檢查結(jié)果，并進(jìn)行總結(jié)，為臨床診治提供可靠依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取江蘇省南通大學(xué)附屬醫(yī)院2010年1月-2014年6月診治的100例GIST患者作為研究對(duì)象，均經(jīng)術(shù)后病理檢查確診，根據(jù)NIH危險(xiǎn)性分為4級(jí)：高度危險(xiǎn)19例（19.00%，19/100），中度危險(xiǎn)性25例（25.00%，25/100），低度危險(xiǎn)性47例（47.00%，47/100），極低度危險(xiǎn)性9例（9.00%，9/100）。男56例，女44例，年齡27～83歲，平均（45.65±10.23）歲，體重47～89 kg，平均（63.58±8.43）kg；病程2周～3年，平均（1.25±0.44）年。腫瘤部位：食道6例、胃58例、小腸25例、結(jié)直腸11例，患者主要癥狀表現(xiàn)為腹部不適、脹痛、腹部腫塊、便血、腸梗阻等；所有選取患者術(shù)前均未進(jìn)行放化療治療；B超、CT影像提示腹腔內(nèi)有實(shí)質(zhì)性占位。

1.2 方法

觀察大體標(biāo)本以后，將所采集標(biāo)本行10%中性緩沖福爾馬林固定，利用石蠟進(jìn)行包埋處理，之后對(duì)標(biāo)本連續(xù)切片，再平均分為2份，一份采用HE染色法檢驗(yàn)，另一份采用免疫組化染色法檢驗(yàn)。利用免疫組化法對(duì)標(biāo)本的陽(yáng)性率進(jìn)行檢驗(yàn)，運(yùn)用即用型試劑，分別對(duì)標(biāo)本中含有的瘤細(xì)胞（CD117）、i型跨膜糖蛋白分子（CD34）、SMA、Ki67、S100蛋白分子進(jìn)行檢測(cè)。在檢測(cè)的過(guò)程中，采用邁新公司生產(chǎn)的試劑盒，每次檢測(cè)都將陽(yáng)性與陰性進(jìn)行對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定

免疫表型CD117、CD34著色于瘤細(xì)胞胞漿和胞膜上為陽(yáng)性（圖1、圖2）；SMA以陽(yáng)性表達(dá)面積>20%記為陽(yáng)性，細(xì)胞呈棕黃色，為細(xì)胞漿著色（圖3）；S100陽(yáng)性定位細(xì)胞核著色（圖4）；切片顯微鏡下觀察細(xì)胞表達(dá)情況，Ki67選擇陽(yáng)性區(qū)域，隨機(jī)選取10個(gè)HPF，統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>5%為陽(yáng)性，否則為陰性（圖5）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所得數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較用字2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大體標(biāo)本肉眼特征

腫瘤組織可以位于黏膜下層、肌層、漿膜外以及腸系膜上，腫瘤直徑為0.8～10.5 cm，腫瘤邊界清，質(zhì)地硬，切面呈編織狀，分界尚清，切面紅、白，部分灰白、灰黃相間，表面有糜爛及潰瘍形成，有壞死及囊性變。極低度和低度侵襲危險(xiǎn)性者在消化道內(nèi)呈膨脹性生長(zhǎng)，邊界清楚，有的無(wú)包膜或有假包膜，切面灰白、局部灰紅、質(zhì)韌；中、高度侵襲危險(xiǎn)性者質(zhì)軟，呈息肉狀，伴有出血、壞死、囊性變。

2.2 鏡下觀察

多原發(fā)于消化道固有肌層，可在肌層膨脹性生長(zhǎng)，邊緣與平滑肌相互交叉，局部呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)為梭形、圓形、上皮樣或混合性形態(tài)，細(xì)胞界限不清，胞質(zhì)輕度或中度嗜伊紅，核呈梭形或卵圓形，核膜薄，染色質(zhì)細(xì)膩，可見(jiàn)小核仁，部分見(jiàn)腫瘤內(nèi)部局灶或大片腫瘤細(xì)胞發(fā)生凝固性壞死，呈均質(zhì)紅染的細(xì)胞影及殘留的核碎片。本組中梭形細(xì)胞型60例（60.00%，60/100），上皮樣細(xì)胞型28例（28.00%，28/100），混合型12例（12.00%，12/100）。

2.3 免疫組化分析

CD117陽(yáng)性92例（92.00%，92/100）、CD34陽(yáng)性84例（84.00%，84/100）、兩者同時(shí)表達(dá)72例（72.00%，72/100）；S100陽(yáng)性36例（36.00%，36/100）、SMA陽(yáng)性28例（28.00%，28/100）。在高、中、低以及極低度侵襲危險(xiǎn)性的GIST中Ki67陽(yáng)性分別為14例（73.68%，14/19）、10例（40.00%，10/25）、11例（23.40%，11/47）、1例（11.11%，1/9）；統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示高、中度侵襲危險(xiǎn)性組與低、極低侵襲危險(xiǎn)性組Ki67陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=8.39，P<0.05）。

3 討論

GIST是臨床常見(jiàn)腫瘤疾病，屬間葉源型腫瘤，患者由食道至直腸都可以成為腫瘤的多發(fā)部位，約占胃腸道腫瘤的0.1%～3%[2]，而其中發(fā)生腫瘤最頻繁的部位應(yīng)為胃部和小腸，發(fā)生于胃部的概率在60%左右，發(fā)生在小腸的概率在30%左右，有10%左右的概率會(huì)發(fā)生在食道至直腸其他部位[3]，本文GIST位于胃的為58例（58.00%，58/100），其次是腸道，小腸多于大腸，與文獻(xiàn)報(bào)道相似；GIST各年齡段均可發(fā)生，本組患者年齡位于27～83歲，平均（45.65±10.23）歲，發(fā)病率無(wú)性別和年齡差異。

GIST臨床表現(xiàn)各異，無(wú)特異性，術(shù)前確診較為困難，尤其是小腸間質(zhì)瘤，確診必須依賴病理檢查和免疫組化結(jié)果[4]，GIST大體形態(tài)上表現(xiàn)為大小不等，差異明顯，多數(shù)界限清晰，但腫瘤纖維包膜不明顯，表面光滑，呈結(jié)節(jié)狀或分葉狀，可有出血、壞死、黏液變和囊性變，而如果GIST是呈現(xiàn)惡性腫瘤且程度比較高，則界限多不清晰，質(zhì)軟，呈魚(yú)肉樣外觀，可與周圍組織發(fā)生炎性粘連或直接浸潤(rùn)。

鏡下觀察GIST的組織學(xué)形態(tài)各異，種類繁多，主要是由上皮樣細(xì)胞亦或梭形細(xì)胞構(gòu)成，本組中梭形細(xì)胞型60.00%、上皮樣細(xì)胞型28.00%、混合型12.00%，腫瘤細(xì)胞的排列方式各異，通常有魚(yú)骨狀、編織狀以及束狀，少量腫瘤細(xì)胞的排列呈現(xiàn)柵欄狀，由于GIST的胞漿呈現(xiàn)為紅色，且腫瘤核的兩端呈圓形，所以在HE染色法的檢測(cè)下，經(jīng)常會(huì)誤診為神經(jīng)源型或平滑肌型腫瘤，GIST在病理形態(tài)上主要由梭形或上皮樣細(xì)胞構(gòu)成，梭形細(xì)胞的形態(tài)與其他梭形細(xì)胞類的腫瘤相似，因此僅憑常規(guī)染色很難區(qū)別[5]。

借助于免疫組化檢測(cè)是國(guó)際上對(duì)GIST確診共識(shí)水平，GIST干細(xì)胞的特征性表達(dá)很高，CD117和CD34可呈彌漫性表達(dá)，CD34是臨床應(yīng)用較早的應(yīng)用于胃腸道間質(zhì)腫瘤鑒別診斷的細(xì)胞標(biāo)記物，它在GIST中有較高的陽(yáng)性率，達(dá)60%～70%[6]，且特異性較好，而真正平滑肌源性或神經(jīng)源性腫瘤不表達(dá)CD34，CD117較CD34具有更高的特異性和敏感性，其化學(xué)本質(zhì)為酪氨酸激酶跨膜受體蛋白，它在胃腸道間質(zhì)腫瘤中的陽(yáng)性率達(dá)80%～90%，因而在胃腸道間質(zhì)腫瘤的診斷中可能更有效，是鑒別GIST與平滑肌瘤和神經(jīng)鞘瘤的重要標(biāo)記物[7]，本組CD117陽(yáng)性92.00%、CD34陽(yáng)性84.00%、兩者同時(shí)表達(dá)有72.00%。GIST除表達(dá)CD117、CD34外，尚可分別或同時(shí)表達(dá)S100（陽(yáng)性率36.00%）、SMA（陽(yáng)性率28.00%），提示GIST是一種不定向分化的間質(zhì)腫瘤。Ki67是與增殖細(xì)胞相關(guān)核抗原，其表達(dá)水平可反映腫瘤細(xì)胞增殖活性，被廣泛用于判定腫瘤的生物學(xué)行為和預(yù)后[8]，本研究顯示在高、中、低、極低度危險(xiǎn)性的GIST中，Ki67陽(yáng)性率分別為73.68%，40.00%，23.40%，11.11%，統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示高、中度侵襲危險(xiǎn)性組與低、極低侵襲危險(xiǎn)性組Ki67陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=8.39，P<0.05），這些結(jié)果提示GIST隨著間質(zhì)瘤危險(xiǎn)性增高，增殖性越強(qiáng)，因此可以認(rèn)為Ki67是判斷GIST良惡性的一個(gè)重要指標(biāo)[9]。

綜上所述，GIST是一種多向分化的間質(zhì)性腫瘤，與HE染色法相比，免疫組化染色法能夠更加有效地診斷GIST[10]，免疫組化對(duì)于CD117以及CD34都有著良好的表達(dá)性，是診斷GIST的主要參照，從而有別于胃腸道間質(zhì)其他腫瘤，GIST個(gè)別病例腫瘤細(xì)胞不表達(dá)CD117，只表達(dá)CD34時(shí)也可診斷為GIST，但當(dāng)腫瘤細(xì)胞均不表達(dá)時(shí)診斷GIST要慎重。

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（收稿日期：2016-06-21）