熊戰(zhàn)之++汪立新++付佑勝++劉偉中++王宏寶++李茹++高聰芬++張凱

doi：10.15889/j.issn.1002-1302.2016.10.050

摘要：褐飛虱、白背飛虱和灰飛虱是水稻和小麥上重要的害蟲(chóng)，化學(xué)防治是目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的主要防治措施，因而了解其抗性動(dòng)態(tài)非常重要。對(duì)江蘇蘇北5市（淮安、宿遷、鹽城、連云港和徐州）10個(gè)種群的飛虱進(jìn)行了抗藥性監(jiān)測(cè)；此外，在室內(nèi)篩選出了對(duì)白背飛虱具有增效作用的復(fù)配配方。結(jié)果顯示：褐飛虱對(duì)吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪和噻嗪酮產(chǎn)生高至極高水平抗性，而對(duì)烯啶蟲(chóng)胺則處于敏感至敏感下降階段；褐飛虱對(duì)毒死蜱產(chǎn)生低水平抗性、中等水平抗性和高水平抗性分別占20%、70%、10%。白背飛虱對(duì)吡蟲(chóng)啉、噻嗪酮和毒死蜱的抗性存在地域性差異，而對(duì)噻蟲(chóng)嗪和異丙威則較敏感?；绎w虱種群對(duì)吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、烯啶蟲(chóng)胺、吡蚜酮和異丙威均處于敏感狀態(tài)階段，對(duì)毒死蜱處于中等水平抗性。此外，室內(nèi)對(duì)白背飛虱的復(fù)配篩選研究表明，丁烯氟蟲(chóng)腈和噻嗪酮有效成分比例為1 ∶5、1 ∶10、1 ∶15、1 ∶20時(shí)，具有顯著增效作用。

關(guān)鍵詞：褐飛虱；白背飛虱；灰飛虱；抗性；復(fù)配

中圖分類(lèi)號(hào)： S435.112+.3文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2016）10-0191-05

收稿日期：2016-04-13

基金項(xiàng)目：江蘇徐淮地區(qū)淮陰農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所所長(zhǎng)基金（編號(hào)：HNY201406）。

作者簡(jiǎn)介：熊戰(zhàn)之（1979—），男，江蘇淮安人，助理研究員，主要從事殺蟲(chóng)劑與除草劑的抗藥性監(jiān)測(cè)及治理研究。E-mail：zhangkai.2007@163.com。汪立新為共同第一作者。

通信作者：張凱，主要從事殺蟲(chóng)劑毒理與抗藥性研究。Tel：（0517）83668251；E-mail：841731768@qq.com。2016年中央一號(hào)文件將確保糧食等重要農(nóng)產(chǎn)品有效供給、實(shí)現(xiàn)綠色發(fā)展和能源可持續(xù)利用、加快農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化作為主要目標(biāo)；水稻和小麥作為江蘇省最重要的兩大糧食作物，分別占全省糧食總面積的40%和38%[1]；近年來(lái)，蘇北地區(qū)（淮安、鹽城、宿遷、徐州和連云港）成為江蘇省糧食生產(chǎn)大市，對(duì)江蘇的糧食貢獻(xiàn)超過(guò)50%[2]。

飛虱，屬于半翅目（Hemiptera）、飛虱科（Delphacidae），目前是我國(guó)水稻和小麥上重要的害蟲(chóng)之一[3]，其中褐飛虱（Nilaparvata lugens Stl）和白背飛虱（Sogatella furcifera Horvath）主要為害水稻，而灰飛虱（Laodelphax striatellus Fallén）不僅在水稻前期危害水稻，還可以危害小麥[4]。3種飛虱均可以通過(guò)取食、產(chǎn)卵和傳毒危害[5-9]。褐飛虱在中國(guó)每年發(fā)生面積為1 300萬(wàn)～2 000萬(wàn)hm2，約占全國(guó)水稻面積的50%，年均損失稻谷10億多kg。1987年和1991年褐飛虱在我國(guó)大部分稻區(qū)特大發(fā)生，危害面積高達(dá)2 300萬(wàn)hm2 [10-11]；白背飛虱和褐飛虱都屬于遷飛性害蟲(chóng)，其發(fā)生規(guī)律有很多相似之處，但對(duì)水稻產(chǎn)量的影響有著各自的特點(diǎn)[12]。由于水稻—小麥的種植方式，使得灰飛虱的數(shù)量也急速上升[12]。一直以來(lái)，生產(chǎn)上主要以化學(xué)藥劑對(duì)其進(jìn)行防治[13]，主要包括吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、烯啶蟲(chóng)胺、毒死蜱、噻嗪酮、異丙威、吡蚜酮等，但是連續(xù)、大量、不合理使用化學(xué)藥劑使得飛虱對(duì)很多藥劑產(chǎn)生了抗性[14-19]，而飛虱的抗藥性卻是其大發(fā)生的一個(gè)重要原因[20]。

本研究首次監(jiān)測(cè)了蘇北5市10個(gè)種群的稻飛虱對(duì)常規(guī)藥劑的抗性，如吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、烯啶蟲(chóng)胺、毒死蜱、噻嗪酮、異丙威、吡蚜酮等，掌握了蘇北地區(qū)稻飛虱的抗性水平，同時(shí)在室內(nèi)篩選出具有增效作用的農(nóng)藥復(fù)配配方，為綜合防治提供理論基礎(chǔ)和現(xiàn)實(shí)方案。

1材料與方法

1.1供試蟲(chóng)源

于2015年5—9月采集江蘇蘇北5市的灰飛虱、白背飛虱和褐飛虱成蟲(chóng)或若蟲(chóng)，其中每市設(shè)2個(gè)點(diǎn)，共10個(gè)種群（表1）；用于復(fù)配測(cè)定的白背飛虱于2015年采自淮安金湖；采集的灰飛虱在室內(nèi)不接觸任何藥劑，用武育粳稻苗進(jìn)行飼養(yǎng)，白背飛虱和褐飛虱用秈稻飼養(yǎng)，溫度為（26±1） ℃，光—暗周期為16 h—8 h，并選取F1代3齡若蟲(chóng)進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。

1.2供試藥劑

選取原藥作為室內(nèi)測(cè)定飛虱毒力的藥劑（表2）；供試原藥以丙酮作溶劑，加100 g/L乳化劑TritonX-100加工成乳油，供測(cè)定用。

1.3試驗(yàn)方法

褐飛虱和白背飛虱的毒力測(cè)定選用稻莖浸漬法[21]：連根拔出健壯的分蘗期至孕穗期稻莖，洗滌后剪成約10 cm長(zhǎng)的帶根稻莖，2～3株1組，于陰涼處晾至表面無(wú)水痕。用自來(lái)水將供試藥劑按等比稀釋成5～6個(gè)濃度，將稻莖分別在不同濃度的藥液中浸30 s，取出晾干后，放入培養(yǎng)杯，每杯吸入3齡中期若蟲(chóng)15頭，每濃度重復(fù)3次，每濃度共45頭，用含01%曲拉通的水作為對(duì)照。接蟲(chóng)后將培養(yǎng)杯放入溫度為 （26±1） ℃，光暗周期為16 h—8 h的培養(yǎng)箱。

灰飛虱毒力測(cè)定采用稻苗浸漬法[22]：將配制的乳油用水等比稀釋配制成系列濃度，每個(gè)試驗(yàn)設(shè)5個(gè)濃度，以清水處理作對(duì)照。將6 d齡武育粳3號(hào)稻苗30株連根一起在系列濃度的藥液中浸10 s，每個(gè)濃度重復(fù)3次，取出瀝至無(wú)液體滴下后置于墊有濾紙的一次性塑料杯中，30 min后接入3齡中期若蟲(chóng)15頭，每處理共45頭，然后用保鮮膜封口并用3號(hào)昆蟲(chóng)針扎孔。接蟲(chóng)后的培養(yǎng)杯放置于（26±1） ℃、濕度（70±10）%、光—暗周期16 h—8 h的恒溫光照培養(yǎng)箱中。毒死蜱和異丙威48 h后檢查結(jié)果；吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、烯啶蟲(chóng)胺、噻嗪酮處理96 h后檢查結(jié)果；吡蚜酮處理120 h后檢查結(jié)果。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用PoloPlus軟件計(jì)算LC50值及其95%置信限，以LC50的95%置信限不重疊作為判斷毒力差異顯著的標(biāo)準(zhǔn)[23]。

抗性倍數(shù)（RR）=所測(cè)種群的LC50 /敏感種群LC50；抗性水平標(biāo)準(zhǔn)為：抗性倍數(shù)RR≤3為敏感、3.1160為極高水平抗性[24]。

2結(jié)果與分析

2.1褐飛虱對(duì)常用藥劑的敏感性

2015年蘇北5市10個(gè)褐飛虱種群對(duì)常用藥劑的抗性見(jiàn)表3。所監(jiān)測(cè)褐飛虱種群對(duì)吡蟲(chóng)啉均處于極高水平抗性；對(duì)噻蟲(chóng)嗪處于高水平至極高水平抗性，其中泗陽(yáng)和灌南的褐飛虱種群抗性倍數(shù)分別達(dá)到296.2倍和165.0倍；對(duì)烯啶蟲(chóng)胺處于敏感至敏感性下降階段（RR<5）；20%的褐飛虱種群對(duì)噻嗪酮處于高水平抗性，80%的褐飛虱種群對(duì)噻嗪酮處于極高水平抗性；褐飛虱對(duì)毒死蜱的抗性體現(xiàn)出地域差異，睢寧和東臺(tái)褐飛虱種群對(duì)毒死蜱處于低水平抗性，洪澤褐飛虱種群對(duì)毒死蜱產(chǎn)生高水平抗性（RR=61.6），而其余各種群均處于中等水平抗性。由于缺少敏感基線，褐飛虱種群對(duì)異丙威的LC50處于8.043～33.198 mg/L之間。

2.2白背飛虱對(duì)常用藥劑的敏感性

2015年蘇北5市10個(gè)白背飛虱種群對(duì)常用藥劑的抗性見(jiàn)表4。對(duì)吡蟲(chóng)啉處于低水平抗性、敏感性下降、敏感的白背飛虱分別占50%、20%和30%；所監(jiān)測(cè)白背飛虱種群對(duì)噻蟲(chóng)嗪和異丙威均處于敏感狀態(tài)（RR≤3），且對(duì)烯啶蟲(chóng)胺的LC50處于0.083～0.241 mg/L之間，顯示出烯啶蟲(chóng)胺對(duì)白背飛虱具有較高的毒力；灌云和灌南的白背飛虱種群對(duì)噻嗪酮處于低水平抗性，其余均為中等水平抗性，占所測(cè)種群的80%；而對(duì)毒死蜱的敏感性存在較大差異，其中處于敏感、敏感性下降、低水平抗性、高水平抗性分別占10%、10%、10%、70%。

2.3灰飛虱對(duì)常用藥劑的敏感性

2015年蘇北5市10個(gè)灰飛虱種群對(duì)常用藥劑的抗性見(jiàn)表5。所監(jiān)測(cè)的灰飛虱種群對(duì)吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、烯啶蟲(chóng)胺、吡蚜酮和異丙威均處于敏感狀態(tài)階段（RR≤3），對(duì)毒死蜱處于中等水平抗性（10.1

2.4防治白背飛虱復(fù)配藥劑的室內(nèi)篩選

從表6中可以看出，在不同的比例混配中，其共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出一定的增效作用，其中丁烯氟蟲(chóng)腈 ∶噻嗪酮有效成分比例為1 ∶15時(shí)增效作用最明顯，共毒系數(shù)達(dá)到303.595；其次為丁烯氟蟲(chóng)腈 ∶噻嗪酮有效成分比例為1 ∶20時(shí)共毒系數(shù)為266.979。室內(nèi)條件下丁烯氟蟲(chóng)腈、噻嗪酮2種藥劑不同配比的試驗(yàn)結(jié)果表明，按有效成分比例為1 ∶5、1 ∶10、1 ∶15、1 ∶20時(shí)，對(duì)白背飛虱3齡若蟲(chóng)均表現(xiàn)出較強(qiáng)的增效作用， 其中以二者有效成分比例為1 ∶15與1 ∶20時(shí)增效效果最好。

3討論

目前生產(chǎn)上防治稻飛虱仍以化學(xué)防治為主，而長(zhǎng)期大量不合理使用農(nóng)藥，已經(jīng)使得稻飛虱對(duì)多種藥劑產(chǎn)生抗性，這也是稻飛虱大發(fā)生的一個(gè)重要原因[27]。例如：2005年褐飛虱的大暴發(fā)，是由于褐飛虱對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗性急劇上升所致，農(nóng)業(yè)部全國(guó)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心發(fā)文（2005）在褐飛虱對(duì)吡蟲(chóng)啉產(chǎn)生高水平抗性地區(qū)要求暫停使用吡蟲(chóng)啉防治褐飛虱。為了避免由于抗性引起的防效降低或害蟲(chóng)暴發(fā)，對(duì)其抗藥性進(jìn)行了解非常重要；本研究首次對(duì)蘇北地區(qū)的稻飛虱抗藥性進(jìn)行了一次普查，從而為科學(xué)防治提供理論基礎(chǔ)。

吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪和烯啶蟲(chóng)胺為新煙堿類(lèi)殺蟲(chóng)劑[28]，對(duì)半翅目害蟲(chóng)具有很好的防效；自2005年以來(lái)，褐飛虱對(duì)吡蟲(chóng)啉產(chǎn)生了極高水平抗性（200～799倍）[29]，而王鵬等于2008—2013年間對(duì)全國(guó)褐飛虱進(jìn)行抗性普查，發(fā)現(xiàn)褐飛虱對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗性還在急劇上升，其中2011年，安徽潛山的褐飛虱種群對(duì)吡蟲(chóng)啉已達(dá)到1 935.8倍的抗性[30]。本監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，蘇北地區(qū)褐飛虱對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗性亦非常高，其中泗陽(yáng)已經(jīng)達(dá)到2 842倍的極高水平抗性，而白背飛虱和灰飛虱的抗性水平則較低，這種顯著性差異有可能是由物種間的差異引起的。同樣，褐飛虱對(duì)噻蟲(chóng)嗪的抗性也達(dá)到高至極高水平，并且有著上升的趨勢(shì)，而白背飛虱和灰飛虱則對(duì)噻蟲(chóng)嗪較敏感。新煙堿類(lèi)的另一種藥劑烯啶蟲(chóng)胺，則對(duì)3種飛虱的毒力較高。由于褐飛虱和白背飛虱在田間經(jīng)?；旌习l(fā)生，生產(chǎn)上經(jīng)常使用吡蟲(chóng)啉來(lái)防治白背飛虱，這就同時(shí)對(duì)褐飛虱進(jìn)行篩選，使得褐飛虱對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗性一直居高不下。隨著吡蟲(chóng)啉被暫停防治褐飛虱以及氟蟲(chóng)腈禁用，噻蟲(chóng)嗪成為防治褐飛虱的主要手段之一，但單一使用噻蟲(chóng)嗪，使得褐飛虱對(duì)噻蟲(chóng)嗪的抗性也逐漸上升。烯啶蟲(chóng)胺雖然與吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪屬于同一類(lèi)藥劑，且烯啶蟲(chóng)胺對(duì)3種飛虱的毒力較高，但褐飛虱和白背飛虱對(duì)烯啶蟲(chóng)胺的抗性較低，這可能與烯啶蟲(chóng)胺的價(jià)格高、用量小有關(guān)；此外，烯啶蟲(chóng)胺在分子結(jié)構(gòu)上與吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪存在顯著差異[31]，這就降低了交互抗性發(fā)生的可能。這3種藥劑的相互關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。

噻嗪酮作為一種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，由于其特殊的作用機(jī)制，對(duì)飛虱有著較好的防效。上世紀(jì)90年代，隨著吡蟲(chóng)啉的推廣使得噻嗪酮的使用頻率逐漸下降，而隨著吡蟲(chóng)啉被禁止防治褐飛虱，噻嗪酮又重新成為防治褐飛虱的主要藥劑[32]。通過(guò)查閱大量監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯示出噻嗪酮的使用頻率與褐飛虱對(duì)其抗性倍數(shù)成正相關(guān)，而本研究表明褐飛虱對(duì)噻嗪酮產(chǎn)生高至極高水平抗性，80%白背飛虱對(duì)噻嗪酮產(chǎn)生中等水平抗性；灰飛虱于2007年就已經(jīng)對(duì)噻嗪酮產(chǎn)生高水平抗性[33]，到2011年已經(jīng)達(dá)到極高水平抗性，因此噻嗪酮對(duì)于3種飛虱的防治已經(jīng)不具備優(yōu)勢(shì)，建議暫停使用噻嗪酮防治稻飛虱。

毒死蜱目前已成為最大噸位的有機(jī)磷類(lèi)殺蟲(chóng)劑，是全球應(yīng)用廣泛的5種殺蟲(chóng)劑之一[34]，是我國(guó)多年來(lái)主要用于防治螟蟲(chóng)以及稻縱卷葉螟的殺蟲(chóng)劑品種，也被大量用于防治稻飛虱。綜合3種飛虱的監(jiān)測(cè)結(jié)果，大部分種群已對(duì)毒死蜱產(chǎn)生中等水平抗性。王利華等研究表明，2007年江蘇地區(qū)的灰飛虱種群對(duì)毒死蜱為中等水平抗性[35]；班蘭鳳研究結(jié)果表明，2009—2011這3年間灰飛虱種群對(duì)毒死蜱的抗性已從中等水平發(fā)展到高水平，這可能與麥田、稻田長(zhǎng)期、大面積使用毒死蜱有關(guān)[36]。因此建議在抗性水平較高地區(qū)控制使用毒死蜱防治飛虱。

吡蚜酮由于其新穎的作用機(jī)制，近幾年來(lái)一直被用來(lái)防治稻飛虱，政府也在大量采購(gòu)吡蚜酮，但吡蚜酮的抗性卻很少報(bào)道，尤其是白背飛虱和褐飛虱，這可能與我們?cè)谑覂?nèi)依然沒(méi)能建立起白背飛虱和褐飛虱對(duì)吡蚜酮的抗性監(jiān)測(cè)方法相關(guān)。目前國(guó)際上推薦的方法是IRAC（NO.005）[37]，但筆者通過(guò)大量的試驗(yàn)表明，該方法不能有效應(yīng)用于白背飛虱和褐飛虱對(duì)吡蚜酮的抗性監(jiān)測(cè)，因此完善對(duì)吡蚜酮的抗性監(jiān)測(cè)就非常重要。異丙威對(duì)白背飛虱和灰飛虱的毒力較高，因此建議可以將異丙威作為田間防治3種飛虱的主要輪換藥劑。

農(nóng)藥的混用是害蟲(chóng)抗性治理中可采用的一種措施，但是混劑同樣也是化學(xué)藥劑，長(zhǎng)期連續(xù)使用同樣也會(huì)造成抗性的產(chǎn)生，只有科學(xué)合理地使用混劑，才能充分發(fā)揮其在抗性治理中的作用。共毒系數(shù)是用來(lái)衡量一個(gè)混劑是否具有增效作用、相加作用以及拮抗作用的指標(biāo)，但是它不同于增效倍數(shù)，共毒系數(shù)也不是越高越好，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，除了共毒系數(shù)外，還需要考慮復(fù)配的LC50、各個(gè)單劑的成本以及合成上的可行性，因此就丁烯氟蟲(chóng)腈和噻嗪酮的復(fù)配而言，要將監(jiān)測(cè)、復(fù)配結(jié)果與田間藥效試驗(yàn)相結(jié)合，從而更加科學(xué)地指導(dǎo)田間用藥。

本研究首次揭示了蘇北5市10個(gè)種群的稻飛虱對(duì)常用藥劑的抗性動(dòng)態(tài)，基于該研究建議吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪和烯啶蟲(chóng)胺作為防治白背飛虱和灰飛虱的主要藥劑，而烯啶蟲(chóng)胺可以作為防治褐飛虱的主要輪換藥劑；在抗性水平較高的地區(qū)限制使用噻嗪酮和毒死蜱防治這3種飛虱，吡蚜酮可以作為防治灰飛虱的主要藥劑，而異丙威則可作為輪換藥劑使用。復(fù)配結(jié)果顯示：丁烯氟蟲(chóng)腈和噻嗪酮的復(fù)配為田間防治白背飛虱提供了另一種選擇。

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