王紅光 李廣勝(通訊作者)

450008河南中醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院

現(xiàn)代儀器分析技術(shù)在中藥及其制劑研究中應(yīng)用展望

王紅光 李廣勝(通訊作者)

450008河南中醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院

本文簡要闡述了目前常采用的光譜法、色譜法、分子生物學(xué)技術(shù)及聯(lián)用技術(shù)等在中藥及制劑研究中的應(yīng)用。不同類型的中藥及其制劑在鑒定過程中需要采用不同的現(xiàn)代儀器分析技術(shù)，并且準(zhǔn)確鑒定率比較高。因此，現(xiàn)代儀器分析技術(shù)在中藥及其制劑主要成分的鑒定過程中發(fā)揮著重要作用，值得臨床應(yīng)用推廣。

現(xiàn)代儀器分析；中藥及其制劑；成分鑒定；應(yīng)用分析展望

本文對常見的主要現(xiàn)代儀器分析技術(shù)在中藥及其制劑主要成分鑒定中的應(yīng)用進(jìn)行分析展望，主要方法有光譜法、色譜法及其聯(lián)用技術(shù)，其中光譜法表現(xiàn)得更為突出，現(xiàn)報(bào)告如下。

光譜法

光譜法技術(shù)：分為發(fā)射、吸收和散射。常用的有紫外吸收光譜和紅外光譜、原子吸收光譜和發(fā)射光譜、熒光光譜和拉曼光譜[1]。

紫外分光光度法：用于中藥及其制劑成分鑒定、定量及其藥動學(xué)研究，受到普遍重視。李云霞等采用該法對黃芩內(nèi)的某一化合物進(jìn)行分析、研究，從而推測其為黃芩苷。李洪娟等發(fā)現(xiàn)桑白皮具有一定紫外-可見光譜和導(dǎo)數(shù)光譜特征。紫外分光光度法具有操作簡單、成本低廉、速度較快的特點(diǎn)，在中藥及其制劑鑒定分析中得到了越來越廣泛的應(yīng)用。

紅外光譜分析法：目前中藥及其制劑光譜法技術(shù)主要應(yīng)用于生化分析、道地性及真?zhèn)舞b別、中藥材分類及中藥配方顆粒分析。紅外光譜分析法作為光譜法的重要組成部分，具有適用范圍廣、操作簡便、特征性強(qiáng)等特點(diǎn)。如野菊花炒后曬干品和直接曬干品的蒙花苷含量不同，其紅外光譜呈現(xiàn)差異，可根據(jù)此鑒別。近紅外技術(shù)結(jié)合偏最小二乘法可測定牛膝中蛻皮幽酮含量[2]，鑒別菟絲子與其同屬混淆藥材金燈藤、南方菟絲子等[1]；張愛軍、張延瑩等利用近紅外儀器與其他方法結(jié)合，消除誤差，實(shí)現(xiàn)了對丹參生產(chǎn)提取過程的在線質(zhì)量監(jiān)測[3，4]。紅外光譜分析法優(yōu)于常規(guī)分析法，主要在于操作簡單，不需要對樣品提前進(jìn)行處理，且分析速度較快，樣本無損傷。

熒光分光度法：多用于中藥材及其制劑中的痕量元素分析。如Liu Z F等采用該法對4種中藥中的砷和硒在酒石酸介質(zhì)中進(jìn)行了測定[5]；楊連梅等采用該法對黃芪藥材中的黃芪甲苷的含量進(jìn)行測定[6]。

原子吸收光度法：該法具有操作簡單、準(zhǔn)確度好、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。主要用于中藥及其制劑中重金屬和微量元素的測定。如范全民采用該法對牛黃解毒片中三氧化二砷的含量進(jìn)行測定，從而進(jìn)行質(zhì)量控制[7，8]；劉偉等對生長期不同施肥方法柴胡中的微量元素測定[9]；張欣怡等采用該法通過測定血鋅濃度，研究甘草鋅在人體內(nèi)的藥代動力學(xué)過程[10]。

X-射線衍射法(XRD)：已逐漸在中藥材研究和鑒別中廣泛應(yīng)用。該法是研究藥物多晶型的主要技術(shù)之一，對多晶型熱力學(xué)穩(wěn)定性進(jìn)行研究。如采用單晶X-射線衍射法對天然紫杉醇二萜類化合物的分子立體結(jié)構(gòu)進(jìn)行測定[11]。

核磁共振光譜法(NMR)：近年來，在中藥研究中NMR應(yīng)用也越來越受青睞。該法是鑒定有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)的重要方法之一。秦海林等采用該法對不同基源的苦皮藤根皮總提取物A和B的1HNMR指紋圖譜進(jìn)行檢測，從而對苦皮藤基源的鑒定提供理論依據(jù)[12，13]；趙淑杰等采用該法對鹿藥根莖及根的化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，從而對鹿藥的化學(xué)成分鑒定提供依據(jù)[14]。

色譜分析法

薄層色譜法(TLC)：該法是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的分析技術(shù)，為色譜法的經(jīng)典色譜法。如2010版《中國藥典》人參項(xiàng)下的鑒別[15，16]。鄭志偉采用雙波長掃描法測定尿塞通片中鹽酸小檗堿的含量，從而進(jìn)行藥片的質(zhì)量控制[17]；謝仲德等利用薄層色譜法對當(dāng)歸調(diào)經(jīng)膠囊中當(dāng)歸、川芎、白芍3種成分進(jìn)行鑒別。采用薄層色譜法進(jìn)行鑒別，結(jié)果清晰，無干擾[18]。

氣相色譜法：該法對中藥進(jìn)行定性鑒別和定量分析，尤其是含揮發(fā)性成分的中藥，對其中的毒性成分、雜質(zhì)成分進(jìn)行分析，從而控制中藥的質(zhì)量，提高用藥的安全性。張偉等采用該法對肚痛健胃整腸丸中薄荷腦、愈創(chuàng)木酚和丁香酚含量進(jìn)行測定，進(jìn)行藥品的質(zhì)量控制[19]；姚干等采用該法測定梔子提取物中8種有機(jī)溶劑殘留量，檢測結(jié)果穩(wěn)定、簡便、準(zhǔn)確[20]。氣相色譜法亦可測定魚腥草揮發(fā)油中4種成分的含量，準(zhǔn)確性高，重復(fù)性好，可用于質(zhì)量控制[21]。

高效液相色譜法：是中藥進(jìn)行含量測定和構(gòu)建指紋圖譜的重要方法之一，樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性對該法的檢驗(yàn)結(jié)果基本無影響，具有操作簡便、分析速度快、準(zhǔn)確性高、重復(fù)性較好、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)[22]。如采用該方法可同時測定銀黃顆粒中7種有機(jī)酸類成分和4種黃酮類成分的含量[23]。

超高效液相色譜法：其固定相為粒徑＜2 μm的小顆粒，并依此增加了色譜柱效能，同常規(guī)高效液相色譜法相比，該法的峰容量、分析效率、靈敏度和分辨率有很大的提高[24-26]。如劉梅等建立丹參藥材中丹酚酸類和丹參酮類的超高效液相指紋圖譜方法，可用于丹參藥材及其制劑的指紋圖譜研究和質(zhì)量控制[27]；韓艷全等采用UPLC-ELSD法檢測重樓中的重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ[28]。

高效毛細(xì)管電泳色譜法：高效毛細(xì)管電泳色譜法是電泳技術(shù)和層析技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物，具有高速、高效分辨率、高效率的特點(diǎn)，其選擇性與高液相色譜層析有很大的互補(bǔ)性[29]。該法為近年來快速發(fā)展起來的一種新的分離技術(shù)，其優(yōu)點(diǎn)是高效、快速、低耗、環(huán)保等，而重復(fù)性差是其目前存在的缺陷。

聯(lián)用技術(shù)

聯(lián)用技術(shù)結(jié)合了各種分析方法的優(yōu)點(diǎn)，更有利于對中藥進(jìn)行質(zhì)量控制，所以近年來應(yīng)用廣泛，如GC-MS、 GC-IR-MS、 GC-MS/MS、LC-MS、 LC-MS/MS、 SIZE-HPLC-MS等。如劉暉等以GC-MS聯(lián)用技術(shù)測定當(dāng)歸地上部分與根部的揮發(fā)油成分，通過分析可知其化學(xué)組成上有明顯不同，在當(dāng)歸的開發(fā)利用中起到了非常重要的作用；Fuzzati等采用LC-MS分析人參根提取物，檢測出了25種人參皂苷；采用MS/MS分析，確定了糖基和苷元的位置。

討論

中藥及其制劑成分復(fù)雜，進(jìn)一步加強(qiáng)現(xiàn)代儀器分析技術(shù)，仍然是一項(xiàng)重要的工作。在應(yīng)用光學(xué)分析儀器基礎(chǔ)上，將分析法聯(lián)合現(xiàn)代儀器，如SERS光譜技術(shù)和IbVia共聚焦的結(jié)合等。還有將紅外光譜儀、激光掃描共聚焦顯微鏡和掃描電鏡等光譜儀器進(jìn)行聯(lián)合應(yīng)用。中藥及其制劑是一種復(fù)雜的混合體，其光譜信號復(fù)雜且微弱。對光譜信號進(jìn)一步處理，使中藥及其制劑光譜研究達(dá)到新高度。綜合利用現(xiàn)代儀器技術(shù)，開拓中藥及其制劑光譜研究新的領(lǐng)域和方向。

隨著社會和時代的發(fā)展，LC-MS在中藥分析研究領(lǐng)域已成為主流技術(shù)，很多現(xiàn)代儀器分析技術(shù)已在中藥及其制劑研究中應(yīng)用，而UHPLC/UPLC/RRLC作為一種新技術(shù)尚未推廣普及。常言道“言而不文，傳之不遠(yuǎn)”。隨著科技的發(fā)展，各種技術(shù)水平都大大提高，使現(xiàn)代儀器分析技術(shù)在中醫(yī)藥知識的傳播駛上網(wǎng)絡(luò)高速公路。這將大大加快中藥現(xiàn)代化的進(jìn)程。綜合應(yīng)用現(xiàn)代儀器分析技術(shù)和方法，對中藥材既要分離，測定其指標(biāo)成分，又要把它當(dāng)成一個整體來分析。這些技術(shù)體現(xiàn)出了準(zhǔn)確度高、靈敏度高等諸多優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用前景廣闊。應(yīng)用現(xiàn)代儀器分析技術(shù)對中藥及其制劑進(jìn)行鑒定分析，不僅對中藥的真?zhèn)?，而且對中藥及其制劑的臨床用藥安全和降低藥物不良反應(yīng)發(fā)生率都將發(fā)揮重要作用。

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Application prospect of modern instrumental analysis technology in the traditional Chinese medicine and its preparation research

Wang Hongguang,Li Guangsheng(Corresponding author)
The Third Affiliated Hospital of Henan University of Traditional Chinese Medicine 450008

In the research of traditional Chinese medicine and its preparation,this paper briefly introduced the application of spectroscopy method,chromatography method,molecular biology technology and hyphenated techniques in the research of traditional Chinese medicine and preparations.Different types of modern instrumental analysis technology were needed in the identification process of different types of traditional Chinese medicine and its preparation,and its accurate identification rate was relatively high.Then modern instrumental analysis technology plays an important role in the identification process of the main components of traditional Chinese medicine and its preparation,which is worthy of clinical application.

Modern instrumental analysis;Traditional Chinese medicine and its preparation;Component identification;Application analysis prospect

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.15.1

河南省中醫(yī)藥科研專項(xiàng)課題(編號：2014ZY02040)

Fund projectHenan Province Traditional Chinese Medicine Scientific Special Subject(No：2014ZY02040)