吳凌潔

摘要：從天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)出發(fā)，對其中蘆丁的提取、分離和鑒定實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了微型化探討，并進(jìn)行了有益的教學(xué)嘗試，教學(xué)效果得到了較大改善。

關(guān)鍵詞：天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)；微型化；教學(xué)實(shí)踐；蘆丁

研究微型化學(xué)實(shí)驗(yàn)的初衷是為了實(shí)驗(yàn)室的安全和保護(hù)，國家環(huán)?？偩职l(fā)布了關(guān)于加強(qiáng)高等學(xué)校實(shí)驗(yàn)室排污的通知，要求地方各級教育和環(huán)保行政主管部門將高校實(shí)驗(yàn)室、試驗(yàn)場列入環(huán)境監(jiān)測范圍。而天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中用到的揮發(fā)性、易燃易爆、有毒有害試劑很多，實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的“三廢”回收處理問題，需要投入大量人力、經(jīng)費(fèi)等等，同時因?qū)嶒?yàn)時間較長，難在規(guī)定的學(xué)時內(nèi)完成相應(yīng)的教學(xué)任務(wù)，所以減少試劑用量和縮短實(shí)驗(yàn)時間成為天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)亟待解決的問題。改變教學(xué)手段，實(shí)施微型實(shí)驗(yàn)是勢在必行的。本研究以天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中蘆丁的提取分離為例在這方面進(jìn)行了有益的嘗試。

1 從教學(xué)實(shí)踐現(xiàn)狀出發(fā)，激發(fā)學(xué)生興趣

蘆丁的提取分離是實(shí)驗(yàn)大綱中一個必做項(xiàng)目。蘆丁有比較廣泛的用途，在醫(yī)藥上用做高血壓病的輔助治療，在食品中做抗氧化劑，化妝品上做防曬霜成分之一。因其在槐米中含量為20%～25%左右，所以通常選用槐米做提取實(shí)驗(yàn)原料。蘆丁提取有幾種方法：甲醇回流提取法、水直接提取法、超聲波提取法等。甲醇提取法雖然很快就能觀察到晶體，但提取率很低；水提取法時間較長，容易導(dǎo)致蘆丁水解，提取率不及堿提酸沉法；超聲波提取提取率較高但雜質(zhì)含量多，收率較低。綜合以上因素，我們選用 工業(yè) 上用的堿提酸沉法。能從天然植物中提取出有效的活性成分（蘆丁的價格2.00元/mg），學(xué)生非常有興趣，但經(jīng)過2012、2013年級學(xué)生163人的教學(xué)實(shí)踐，發(fā)現(xiàn)教學(xué)效果不是很好。主要原因是：抽濾困難，真空泵及水槽中到處是液泡；因溶液量大調(diào)節(jié)酸堿度需用石灰乳及濃鹽酸，不易控制，而且教室中鹽酸的氣味很刺鼻；酸沉及重結(jié)晶的時間較長，很難在規(guī)定的教學(xué)時間內(nèi)完成教學(xué)任務(wù)，通常需要在1～2 d的時間完成；大部分同學(xué)做出來的產(chǎn)品顏色呈褐色或偏綠色與標(biāo)準(zhǔn)品顏色相差較大；大量的殘?jiān)芾速M(fèi)，而且不好處理。基于這樣的情況，我們發(fā)動學(xué)生進(jìn)行思考，從原料取樣量、過濾、酸堿度上對原有操作進(jìn)行改進(jìn)。提出的問題很現(xiàn)實(shí)，再加上學(xué)生也想在短時間內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，所以該實(shí)驗(yàn)大大激發(fā)了學(xué)生的興趣。

2 從實(shí)驗(yàn)微型化出發(fā)，改變實(shí)驗(yàn)條件

微型實(shí)驗(yàn)不僅僅是表現(xiàn)為減量和小型化，更是對實(shí)驗(yàn)裝置的設(shè)計改造，對實(shí)驗(yàn)方案的改進(jìn)與探索。例如我們常常需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和具體情況，尋找適合材料或方法來改善方案，這也是發(fā)揮師生的自主創(chuàng)新精神的好機(jī)會。

為了便于過濾，我們從微型化出發(fā)，以減少過濾溶液的體積。結(jié)果發(fā)現(xiàn)溶液量縮小后雖然利于過濾，但實(shí)驗(yàn)效果并不好，不易觀察到現(xiàn)象。經(jīng)過進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)對其中的一些細(xì)節(jié)進(jìn)行了改動：原料稱樣量由以前的40 g減小到2 g（考慮槐米中蘆丁的含量、估計的提取率及后面的重結(jié)晶和鑒定實(shí)驗(yàn)）；分別用飽和石灰水代替石灰乳，15%HCl代替濃鹽酸調(diào)節(jié)pH（原因是溶液用量縮小后，酸堿調(diào)節(jié)pH的用量減少，所以要降低酸堿的濃度，否則溶液pH易過量）；pH由以前的4～5調(diào)節(jié)至pH=3～4（目的是減少酸沉?xí)r間）；加熱時用表面皿蓋住燒杯以減少水分的損失。條件改變后，實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量和效果都得到了較大改善。

3 從實(shí)驗(yàn)?zāi)康某霭l(fā)，力求實(shí)驗(yàn)效果

改進(jìn)后的方法經(jīng)過藥劑專業(yè)2014級學(xué)生112人的，效果明顯優(yōu)于以前。主要表現(xiàn)在幾個方面：每一個學(xué)生均可做完整的實(shí)驗(yàn)，一方面原料用料少，不會增加原料購買量（2 g/組，以前20～40 g/組），另一方面用到的耗才很普通，常規(guī)，不會增加額外耗才費(fèi)用；實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象明顯，在短時間內(nèi)能觀察到整個提取、分離和重結(jié)晶現(xiàn)象，以前重結(jié)晶需要放置過夜；用到的原料量縮小10～20倍后，溶液易過濾，不會產(chǎn)生大量的氣泡，布什漏斗內(nèi)也不會有大量的濾渣堵塞孔道，從而使過濾容易時間縮短；用料少，提取液體積少，容易調(diào)節(jié)酸堿度；用料減少后并沒有影響實(shí)驗(yàn)效果，提取率較以前的3%左右提高到10%左右，收率也保持在50%～60%左右；實(shí)驗(yàn)時間縮短，在4 h內(nèi)能完成提取、分離及簡單的鑒定實(shí)驗(yàn)；產(chǎn)品與對照品比較一致（外觀呈淡黃色晶體；熔點(diǎn)：172～175℃；經(jīng)色譜鑒定，Rf與對照品一致）。

此方法簡單可行，經(jīng)過藥劑專業(yè)4個教學(xué)班（2014級）的實(shí)踐，效果顯著，完成了大綱中規(guī)定的教學(xué)任務(wù)，同時也避免了學(xué)時與實(shí)驗(yàn)時間不一致的矛盾。它不僅可用做天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，同時也適合于相關(guān)課程如《天然產(chǎn)物開發(fā)與利用》的課程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。

4 微型實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)踐中揭示的幾個問題

小型、微型化儀器精致美觀，引發(fā)了學(xué)生的實(shí)驗(yàn)興趣。由于溶液量少，使學(xué)生普遍更加注意觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，關(guān)注實(shí)驗(yàn)條件和精度純度，操作上粗枝大葉、不規(guī)范的現(xiàn)象大大減少，臺、桌面也明顯整潔。學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過程中提出的問題也比平時多，反映出學(xué)生的興趣和學(xué)習(xí)積極性有所提高。

實(shí)驗(yàn)微型化后試劑用量少。半微量通常只有常規(guī)用量的1/2，微型實(shí)驗(yàn)則通常只有常規(guī)用量的1/10，甚至更少，水電耗用大大減少，除節(jié)省資源、能源外，減少實(shí)驗(yàn)中的“三廢”，大大改善實(shí)驗(yàn)室的空氣，有利于保障師生健康，減少了固體廢棄物處理費(fèi)用。

半微量法和微量法的實(shí)驗(yàn)時間大為縮短，克服了以往實(shí)驗(yàn)課普遍超時，工作量大的問題。可在有限的課時內(nèi)安排更多的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目或進(jìn)行設(shè)計性、開放性實(shí)驗(yàn)，豐富教學(xué)內(nèi)容。

半微量實(shí)驗(yàn)試劑用量是常量1/5～1/2，儀器外型基本與常量一樣，體積縮小一倍以上，能夠較好保證教學(xué)效果。

在教學(xué)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有的微型實(shí)驗(yàn)技術(shù)還存在許多需要完善的地方，不能照搬教材和其他院校的，應(yīng)根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)室條件和教學(xué)要求采取實(shí)施方案。

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