陳科成 甄丹丹 甄漢深 韋錦梅 黃鳳音

廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001

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柿葉的研究概況

陳科成 甄丹丹*甄漢深 韋錦梅 黃鳳音

廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001

柿葉作為我國(guó)的傳統(tǒng)中藥材，資源非常豐富，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健價(jià)值越來(lái)越引起人們的重視。柿葉中含有黃酮類(lèi)、三萜類(lèi)、多糖類(lèi)、多酚類(lèi)及揮發(fā)類(lèi)等多種成分，抗老化、抗菌為柿葉中藥效成分的主要藥理作用。為使柿葉資源更好地深入利用和開(kāi)發(fā)，文章對(duì)柿葉的有效成分種類(lèi)、提取分離和檢測(cè)方法、提取物的藥理作用及研究過(guò)程中的不足之處和展望進(jìn)行綜述。

柿葉；有效成分；藥理作用

柿葉為柿樹(shù)科(Ebenaceae)柿樹(shù)屬(Diospyros)植物柿(DiospyroskakiL.f.)的新鮮或干燥葉。柿資源在我國(guó)很多地區(qū)均有分布[1]，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健價(jià)值較高，近年來(lái)越來(lái)越引起人們的關(guān)注?，F(xiàn)代研究表明柿葉的有效成分很多，其中黃酮類(lèi)和三萜類(lèi)成分研究較多，不僅有學(xué)者深入研究其藥理作用，而且這些藥效成分的提取方法和含量檢測(cè)的研究也很多。對(duì)多酚類(lèi)、多糖類(lèi)、揮發(fā)類(lèi)等藥效成分主要進(jìn)行提取方法的研究，抗癌、抗氧化、抗老化、抗菌為柿葉中藥效成分的主要藥理作用；超臨界二氧化碳提取法、大孔樹(shù)脂提取法是近代使用的創(chuàng)新型提取方法，超聲波提取法、微波提取法和溶劑提取法是一直使用至今并且使用較廣泛的方法，提取的效果也比較明顯[2]?？茖W(xué)研究者們也正在研發(fā)新的提取方法和優(yōu)化提取條件。傳統(tǒng)的中藥材分析中，柿葉研究只是其中一小部分，筆者對(duì)柿葉的研究概況進(jìn)行整理，現(xiàn)綜述如下。

1 有效成分種類(lèi)和藥理作用

1.1 黃酮類(lèi)化合物 黃酮類(lèi)化合物作為柿葉中含量較高的藥效成分之一，其藥理作用非常明顯，也是科研者研究較多的藥效成分。黃酮苷類(lèi)和黃酮醇類(lèi)化合物是柿葉中主要的黃酮類(lèi)化合物，其中主要的黃酮苷類(lèi)成分有蘆丁、山萘酚3-O-β-D-葡萄糖苷及異槲皮素等；主要的黃酮醇類(lèi)成分為榭皮素、楊梅黃酮及金絲桃苷等；張勝海等[3]提取并鑒定黃酮類(lèi)成分為：染料木素、異鼠李素、榭皮素、蘆丁等。提取柿葉中黃酮類(lèi)化合物的方法有很多，研究者在不斷優(yōu)化這些提取方法的提取條件，如董江濤等[4]為探討超聲波輔助提取法提取黃酮的最佳提取條件，采用響應(yīng)面曲線(xiàn)法優(yōu)化改法的提取條件；岳紅等[5]不僅深入地探討新型超臨界萃取技術(shù)的影響因子，而且還得出了超臨界萃取技術(shù)的最佳提取工藝。除了以上使用的提取方法，還可以采用溶劑提取法、微波提取法和大孔樹(shù)脂提取法。有研究者測(cè)定柿葉中黃酮類(lèi)成分的含量經(jīng)常用到光譜法，有使用簡(jiǎn)單便捷的紫外-可見(jiàn)吸光光譜法和色譜法，有分離測(cè)定效果較好的高效液相色譜法，如劉紹雄等[6]測(cè)定黃酮的含量用紫外-可見(jiàn)吸光光譜法；王麗峰等[7]測(cè)定黃酮的含量用反向高效液相色譜法；孫彩云等[8]用創(chuàng)新的半仿生提取法，提取并研究了黃酮類(lèi)成分抗氧化和抗菌作用；馬新博等[9]還研究了黃酮成分的抗癌作用。

1.2 多糖類(lèi)化合物 柿葉中含有豐富的降血糖和免疫調(diào)節(jié)等藥理作用明顯的多糖類(lèi)化合物，多糖類(lèi)成分的研究較少以單個(gè)多糖成分作為研究對(duì)象，科研研究者多以總多糖成分為對(duì)象研究其藥理作用，其中葡萄糖、鼠李糖及半乳糖等是主要的多糖類(lèi)成分。根據(jù)以往文獻(xiàn)表明，多糖類(lèi)化學(xué)成分的提取方法很多，超聲波提取法、微波提取法和溶劑提取法是常見(jiàn)的方法，李志平等[10]用傳統(tǒng)的微波輔助提取法來(lái)提取柿葉中的多糖，并探討影響改法的因素，用正交試驗(yàn)優(yōu)化了影響因素；谷維娜等[11]創(chuàng)新了多糖類(lèi)成分的提取方法，用水提醇沉法，因?yàn)槎嗵蔷哂袩崴苄裕瑸榱藴p少脂溶性物質(zhì)溶出,水提醇沉法用熱水提取，相對(duì)于其他提取方法成本較低[12]；鄧航等[13]用昆明種小鼠進(jìn)行多糖的藥理作用研究，得出多糖類(lèi)化合物具有降血糖作用的結(jié)論。

1.3 多酚類(lèi)化合物 柿葉中含有豐富的具有很強(qiáng)的抗氧化作用的多酚類(lèi)化合物,該類(lèi)化合物也含有很多單體成分，研究者分離鑒定出多種單體成分，其中主要的單體成分有食子酸、咖啡酸、綠原酸及肉桂酸等。大孔樹(shù)脂提取法和溶劑提取法等傳統(tǒng)提取法可用于很多藥理成分的提取，不僅可以用于柿葉中黃酮類(lèi)、多糖類(lèi)成分，還可以用于柿葉中多酚類(lèi)成分的提取。魯軍等[14]先用溶劑提取法提取，并用大孔樹(shù)脂進(jìn)行純化柿葉中多酚成分，用純化的多酚類(lèi)成分進(jìn)行研究，證明了柿葉的多酚類(lèi)化合物具有較強(qiáng)的抗氧化作用。含量測(cè)定方法主要是UV-Vis和HPLC，兩者相比來(lái)說(shuō)，研究者常用UV-Vis的方法。趙豐麗等[15]探討了FC法顯色的最佳條件，并用該方法測(cè)定柿葉多酚類(lèi)化合物的含量，對(duì)多酚類(lèi)化合物進(jìn)行抗氧化實(shí)驗(yàn)，證明了柿葉多酚類(lèi)化合物具有較強(qiáng)的抗氧化作用。

1.4 三萜類(lèi)化合物 齊墩果酸和熊果酸是柿葉中主要的三萜類(lèi)化合物，這兩種成分的抗炎保肝、降血糖、降血脂及抗腫瘤的作用明顯[16-18]；除上述的三萜類(lèi)單體成分，研究者還鑒定了其他的單體成分，包括19A- 羥基烏蘇酸、烏蘇酸、烏蘇醇及白樺脂酸等成分。三萜類(lèi)化合物中藥理成分齊墩果酸和熊果酸也可以用傳統(tǒng)的超聲波提取法和溶劑提取法。如周江煜等[19]篩選和探討了影響提取齊墩果酸和熊果酸的因素，采用正交試驗(yàn)得到最佳的提取因素；董海麗等[20]不僅比較證明了超聲波輔助提取熊果酸優(yōu)于微波輔助提取，而且通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)優(yōu)化最佳的提取工藝；盛曉靜等[21]采用方法簡(jiǎn)單準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好的HPLC-ELSD對(duì)齊墩果酸和熊果酸進(jìn)行含量測(cè)定，可用于柿葉質(zhì)量控制；柿葉中三萜類(lèi)成分具有降血糖和抗腫瘤的藥理作用，鄧航等[22-23]用柿葉中三萜類(lèi)化合物對(duì)糖尿病和腫瘤小鼠進(jìn)行治療實(shí)驗(yàn)，證明了三萜類(lèi)化合物具有明顯的降血糖和抗腫瘤的藥理作用。

1.5 揮發(fā)性化合物 柿葉中的醛和醇類(lèi)揮發(fā)性化合物,因其具有較好的香味和抗菌作用,可進(jìn)一步開(kāi)發(fā)為香料和抗菌藥物；而研究者通過(guò)各種方法鑒定了其主要的單體醛類(lèi)揮發(fā)性成分為(E)-2- 己烯醛和(Z)-2- 己烯醛等，單體醇類(lèi)揮發(fā)性成分為3,7,11,15- 四甲基 -2- 十六烯 -1- 醇和(E)-3- 己烯 -1- 醇。很多中藥材都含有揮發(fā)性成分，而且揮發(fā)性成分的提取較容易，研究者對(duì)該成分的提取方法進(jìn)行了很多研究，并優(yōu)化了其工藝條件，如張穎等[24]探討了揮發(fā)油的攪拌提取法以及影響該法的提取工藝條件，優(yōu)化了該法提取工藝條件；岳虹等[25]探討了影響超臨界CO2萃取技術(shù)的因素，通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)優(yōu)化了該技術(shù)的工藝條件。GS-MS法是分離測(cè)定柿葉揮發(fā)性成分的主要方法，安秋榮等[26]對(duì)柿葉揮發(fā)性成分進(jìn)行分離鑒定用GS-MS法，這種方法不僅能夠進(jìn)行分離鑒定，也能夠測(cè)定該成分的含量。柿葉的揮發(fā)油主要的藥理作用是抗菌作用，研究者也對(duì)抗菌活性進(jìn)行研究，陳靜等[27]使用水蒸氣蒸餾法提取柿葉揮發(fā)性成分，并探討了該成分對(duì)各種細(xì)菌的抗菌，認(rèn)為該成分可能是一種作用顯著的臨床抗菌藥物；馮鞏等[28]總結(jié)了幾種常用和效果較好的提取揮發(fā)性成分的方法。

1.6 其他成分 柿葉含有的成分很多，以上概述的5種成分是研究較多的常見(jiàn)成分，柿葉中還含有主要單體成分是維生素C和琥珀酸的有機(jī)酸類(lèi)成分、主要單體成分是棕櫚酸和油酸的脂肪酸類(lèi)成分、主要單體成分是油菜甾醇和豆甾醇的植物甾醇類(lèi)成分、主要成分是6- 羥基 -7- 甲氧基香豆素和莨蓉亭的香豆素類(lèi)成分、β- 胡蘿卜素、纖維素、粗蛋白以及粗脂肪等其他成分；柿葉中其他藥效成分也有明顯的藥理作用，這些成分的主要藥理作用沒(méi)有概述的5種主要成分那么明顯，導(dǎo)致這些成分被研究和發(fā)表的文章的機(jī)會(huì)比較少，但這些成分仍具有抗氧化、抗菌、抗壞血酸、降血脂及抗腫瘤藥理作用[29]，具有較高的研究?jī)r(jià)值，期望研究者加強(qiáng)對(duì)這些成分的研究。

2 資源開(kāi)發(fā)的可能性以及現(xiàn)狀

以柿葉的提取物作為食品添加劑、保健品以及藥品的可能性非常大，原因有：柿葉中各種藥效成分的的作用非常明顯，而且利用這些成分開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品，可產(chǎn)生明顯的治療作用及非常小的副作用，非常綠色健康；我國(guó)柿資源非常豐富，原材料來(lái)源方便且經(jīng)濟(jì)成本低；隨著科技的進(jìn)步，對(duì)柿葉的研究越來(lái)越深入和系統(tǒng)，開(kāi)發(fā)利用柿葉資源的可能性增大，前景廣闊。以前對(duì)柿葉研究不充分，所以絕大部分的柿葉沒(méi)有得到利用，但隨著科技的進(jìn)步，該資源的藥效作用得到了系統(tǒng)地研究，越來(lái)越多的柿葉產(chǎn)品面向市場(chǎng)，但多是以保健產(chǎn)品的形式；其中柿葉茶是開(kāi)發(fā)較早的產(chǎn)品，開(kāi)發(fā)柿葉茶最早的國(guó)家并不是柿資源最豐富的中國(guó)而是日本，日本人很早就以柿葉作為茶飲用，由于其制作工藝簡(jiǎn)單且沒(méi)有其他茶產(chǎn)品的副作用，被當(dāng)作純天然的保健產(chǎn)品[30]；柿葉還用于保健食品的制作，柿葉蛋糕就是其代表，不僅可以作為食物的作用，又可以起到保健作用[31]；柿葉還可以用于復(fù)方制劑的開(kāi)發(fā)，中成藥“腦心清”[32]和“柿葉口服液”就是其代表，其中，“腦心清”獲得澳大利亞 TGA 成功列冊(cè)，面向國(guó)際，其主要用于脈絡(luò)瘀阻、胸痛心痛、胸中憋悶、心悸見(jiàn)短引起的冠心病、腦動(dòng)脈硬化。除了上述產(chǎn)品外，柿葉還用于飲料、祛斑膏及柿葉晶等產(chǎn)品；隨著國(guó)內(nèi)外對(duì)柿葉資源的開(kāi)發(fā)會(huì)越來(lái)越完善，會(huì)有更多高效低毒的柿葉產(chǎn)品面世。

3 研究中存在問(wèn)題

3.1 有效成分的利用率較低 柿葉作為我國(guó)傳統(tǒng)的藥材，其營(yíng)養(yǎng)和保健價(jià)值值得深入研究，其提取分離和鑒定方法、藥效成分的種類(lèi)以及藥理作用一直都是研究者不斷進(jìn)行深入研究的方向。經(jīng)過(guò)研究者多年來(lái)的研究，已經(jīng)對(duì)柿葉提取分離和鑒定方法、藥效成分的種類(lèi)以及藥理作用有了初步了解，科研者可以以此為基礎(chǔ)進(jìn)一步探討和研究柿葉，推動(dòng)柿葉更加成熟的發(fā)展；但柿葉的來(lái)源非常豐富，據(jù)研究表明柿樹(shù)科在全球已達(dá)6屬450余種，其中我國(guó)有2屬50多種[29]，但是科研工作者沒(méi)有探討出柿葉不同生長(zhǎng)期、不同產(chǎn)地和不同品種的有效成分含量差異的規(guī)律。因此，目前不能充分利用柿葉中的主要藥效成分，使更高質(zhì)量的柿葉系列產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)不足。

3.2 柿葉復(fù)方制劑開(kāi)發(fā)極少 柿葉中有明顯藥理作用的成分非常豐富，而且柿葉產(chǎn)品副作用小，安全有效且健康，非常吻合人們所追求的安全、健康和環(huán)保的消費(fèi)理念。目前柿葉主要用于開(kāi)發(fā)飲品、化妝品、保健品、飼料和食品包裝等領(lǐng)域，但是這些領(lǐng)域的產(chǎn)品都與柿葉的各種明顯藥效作用沒(méi)有較大關(guān)聯(lián)，沒(méi)有充分地利用這些藥效成分，與藥用產(chǎn)品的作用相比較低下，復(fù)方制劑的開(kāi)發(fā)和臨床應(yīng)用一系列藥用產(chǎn)品的研發(fā)比較缺乏和空白，民間流傳著各種柿葉的偏方，這就導(dǎo)致柿葉利用率低下，使得柿產(chǎn)品的購(gòu)買(mǎi)說(shuō)服力比較低下；柿葉中藥理作用明顯的功效成分沒(méi)有得到充分地利用，不利于開(kāi)發(fā)柿葉的企業(yè)的高效和可持續(xù)發(fā)展。

4 建議

4.1 加強(qiáng)不同品種、不同產(chǎn)地和不同生長(zhǎng)期柿葉的有效成分的含量差異研究 不同生長(zhǎng)期、產(chǎn)地和品種的柿葉含有的藥效成分具有明顯差異，而且很多研究者對(duì)這方面的研究重視不夠。故需要加強(qiáng)研究，探討不同生長(zhǎng)期、產(chǎn)地和品種的柿葉的活性成分含量變化的規(guī)律，得出柿葉各種主要藥效成分含量最佳的生長(zhǎng)期、品種和地區(qū)。這不僅能夠?yàn)槭寥~的各種活性成分的高效、合理應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，也可更好地研究柿葉開(kāi)發(fā)復(fù)方制劑，使柿葉中藥理作用顯著的成分得到充分利用，大大地提高柿葉的利用率。而且根據(jù)含量變化的規(guī)律選擇藥效成分含量高的優(yōu)良品種、地區(qū)和最佳生長(zhǎng)期的葉用柿，并以這些柿葉進(jìn)行科研實(shí)驗(yàn)，可以明顯地提高科研的成功率再對(duì)其進(jìn)行培育，推動(dòng)更高質(zhì)量的柿葉系列產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)。

4.2 加強(qiáng)對(duì)柿葉復(fù)方制劑的開(kāi)發(fā) 目前國(guó)內(nèi)企業(yè)多數(shù)以柿葉作為原材料進(jìn)行生產(chǎn)，主要生產(chǎn)用于安全和綠色健康保健品，以柿葉的活性成分開(kāi)發(fā)復(fù)方制劑較少，且制劑產(chǎn)品主要有用于皮膚過(guò)敏和面部色素異常的柿葉祛斑膏、用于血小板減少性紫癜和胃出血的柿葉口服液和對(duì)心腦血管疾病療效顯著的腦心清等，這些制劑相比柿葉茶和柿葉飲品來(lái)說(shuō)更有藥用價(jià)值，能夠更充分利用柿葉中高效的藥效成分。

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壯瑤-藥協(xié)同創(chuàng)新中心(桂教科研[2013]20號(hào))；廣西壯瑤藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(桂科基字[2014]32號(hào))；廣西重點(diǎn)學(xué)科壯藥學(xué)(桂教科研[2013]16號(hào))；廣西八桂學(xué)者中藥創(chuàng)新理論與藥效研究(J13162)的項(xiàng)目資助。

陳科成(1993-)，男，漢族，碩士研究生，研究方向?yàn)樗帉W(xué)和中藥學(xué)。E-mail:1969970192@qq.com

甄丹丹(1983-)，女，漢族，碩士，研究方向?yàn)橹嗅t(yī)藥的教學(xué)和科研。E-mail：413523094@qq.com

R282.6

A

1007-8517(2017)13-0060-04

2017-04-28 編輯：梁志慶)