王學(xué)強(qiáng) 譯

（河南省開封市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南開封 475000）

豬繁殖與呼吸綜合征病毒 （PRRSV）傳播的研究進(jìn)展及其對(duì)免疫程序的影響

Emanuela PileriEnric Mateu

王學(xué)強(qiáng) 譯

（河南省開封市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南開封 475000）

豬繁殖與呼吸綜合征 （PRRS）被認(rèn)為是影響集約化養(yǎng)豬最嚴(yán)重的疾病之一，給全世界生豬養(yǎng)殖帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失?？刂曝i繁殖與呼吸綜合征病的關(guān)鍵就是控制該病的傳播。豬繁殖與呼吸綜合征病的控制包括疾病監(jiān)測、快速診斷、生物安全、合理的免疫程序等一系列綜合措施。盡管目前已經(jīng)報(bào)道了大量關(guān)于豬藍(lán)耳病病毒流行病學(xué)的研究成果，但關(guān)于該病感染傳播相關(guān)的綜述報(bào)道相對(duì)較少。本文綜述了豬場間、豬個(gè)體間PRRSV傳播機(jī)制的研究進(jìn)展，同時(shí)探討了病毒的傳播對(duì)疫苗接種的影響。

豬繁殖與呼吸綜合征；傳播；免疫程序；研究進(jìn)展

2 PRRSV的傳播

2.1 PRRSV傳播途徑和方法

PRRS一般通過直接接觸或間接污染物感染。PRRSV的暴露一般發(fā)生在呼吸道、口腔以及黏膜和皮膚。傳播方式主要包括空氣傳播（長距離或短距離），性傳播（性交或人工授精）、通過血液接觸（最常見是接種傳播）以及垂直傳播（主要發(fā)生在妊娠的最后三個(gè)月）。眾所周知，PRRS的特點(diǎn)是高傳染性，主要表現(xiàn)在病毒的最小感染劑量（MID）低，而PRRSV最小感染劑量跟不同傳播方式和不同的毒株有關(guān)。Hermann等[8]對(duì)PRRSV-2型病毒VR-2332進(jìn)行研究，結(jié)果顯示病毒VR-2332通過口腔和鼻內(nèi)傳播的最低感染劑量 50 （MID50）分別是105.3和104.0TCID50；而通過肌肉接種疫苗傳播的MID50是102.2TCID50。相比之下，Yoon等[9]研究PRRSV-2型病毒ISU-P時(shí)，發(fā)現(xiàn)僅需小于10個(gè)拷貝就可通過接種疫苗進(jìn)行病毒的傳播。這種由于不同菌株導(dǎo)致感染力存在差異的報(bào)道目前還有很多。Cutler[10]報(bào)道了PRRSV-2型病毒MN-184通過空氣傳播的MID50是2 TCID50，這比Hermann等[11]報(bào)道的病毒VR-2332通過空氣感染的MID50（103.1TCID50）要低很多。數(shù)據(jù)顯示最容易導(dǎo)致感染傳播的方式仍然是血液接觸。豬場中血液接觸頻繁發(fā)生，如耳緣采血、斷尾、剪牙、注射藥物和疫苗等。病毒血癥高峰的發(fā)病豬的病毒載量至少是103～104TCID50/mL，這樣僅需1～10 μL的血液就能輕易傳播病毒[12]。事實(shí)上，Otake[13]已經(jīng)通過試驗(yàn)證明了使用一根污染的針頭就可以成功完成PRRSV的傳播。同樣的，Baker[14]證實(shí)使用無針頭的注射設(shè)備能夠減少PRRSV的傳播，但不能避免病毒的傳播。這種傳播現(xiàn)象到今天也無法解釋，起初懷疑是空氣傳播，但最后也被對(duì)照試驗(yàn)所否定。另外，豬群的一些正?；顒?dòng)也會(huì)導(dǎo)致病毒的傳播，如撕咬、撞傷、摔傷或是個(gè)體之間的爭斗等。Bierk[15]就證明了侵略行為能夠促進(jìn)PRRSV在感染母豬與正常母豬之間進(jìn)行傳播。

2.2 病毒血癥的進(jìn)程以及淋巴組織的持續(xù)時(shí)間

病毒感染后，首先侵入淋巴組織，并最初在淋巴組織的巨噬細(xì)胞里進(jìn)行復(fù)制，然后通過淋巴循環(huán)迅速擴(kuò)展到全身，形成病毒血癥。2型PRRSV感染模型可以看出，病毒血癥早在病毒感染后12小時(shí)就已經(jīng)出現(xiàn)，在感染7～10天后，體內(nèi)血清病毒載量可以達(dá)到頂峰[16]。病毒血癥的持續(xù)時(shí)間跟病毒毒株以及患病動(dòng)物的年齡有關(guān)。許多研究表明PRRSV感染成年豬或生長育肥豬病毒血癥的持續(xù)時(shí)間一般不超過4周，但感染更年幼的仔豬持續(xù)時(shí)間可能達(dá)數(shù)月。 Karniychuk等使用 1型PRRSV感染成年母豬，病毒血癥持續(xù)時(shí)間只有1周左右，而Wills等使用2型PRRSV感染2周齡的仔豬，在感染251天后仍然能夠在3.6%的感染豬血清中檢測出病毒RNA。

感染初期，豬的肺和淋巴器官（如扁桃體、集合淋巴結(jié)、胸腺、脾）是病毒含量最高的載體。隨后病毒進(jìn)入次級(jí)淋巴組織，病毒復(fù)制變緩，但持續(xù)時(shí)間更長。有些學(xué)者使用2型PRRSV開展研究，發(fā)現(xiàn)直到感染157天還能夠在感染動(dòng)物的口腔碎片中分離出病毒。而Horter研究發(fā)現(xiàn)86%的患病動(dòng)物（51/59）在被PRRSV感染63～105天之間，其口腔碎片或扁桃體中可以檢測出病毒。對(duì)于先天性感染存活的仔豬到感染132天后仍然可以在血清和扁桃體中檢測到病毒的基因組。以上研究都證明了病毒在患病動(dòng)物能夠存活時(shí)間很長，但這并不代表病毒一定能夠傳播，這需要直接的證據(jù)。Allende提供了傳播的潛在證據(jù)，使用2型PRRSV作為研究材料，感染母豬150天后在2/3的扁桃體組織中發(fā)現(xiàn)足量用于傳播的感染病毒。Bierk證明了無臨床癥狀的母豬在感染PRRSV 49、56、84天后，通過與未感染的成年豬直接接觸傳播病毒。Charpin使用1型PRRSV感染仔豬，發(fā)現(xiàn)病毒感染9天后傳染力達(dá)到頂峰，在感染42天后逐漸下降；但感染仔豬將病毒傳播給未感染動(dòng)物的現(xiàn)象，直到感染后112天仍然能夠觀察到。綜上所述，可以肯定的是隨著時(shí)間的推移，病毒的傳染性逐漸下降，但水平傳播持續(xù)時(shí)間可以長達(dá)3個(gè)月，對(duì)于先天性感染的仔豬來說水平傳播持續(xù)的時(shí)間會(huì)更長。

3 影響PRRSV傳播的因素

3.1 感染時(shí)豬的年齡

Klinge等研究發(fā)現(xiàn)不管使用何種病毒株進(jìn)行感染，相比成年豬來說，3周齡大的仔豬病毒血癥持續(xù)時(shí)間會(huì)更長。同時(shí)，不管病毒的毒力如何，2個(gè)月齡大的豬比6個(gè)月的在淋巴結(jié)、肺部以及支氣管拭子中病毒載量會(huì)更高。另外，Thanawongnuwech研究發(fā)現(xiàn)4周齡病豬肺內(nèi)巨噬細(xì)胞的病毒滴度要比4月齡病豬的高很多。綜上所述，盡管沒有精確的統(tǒng)計(jì)和計(jì)算，現(xiàn)有的大量研究資料已間接指出仔豬比成年豬傳染性更強(qiáng)。

3.2 病毒株的毒力差異

Cho研究發(fā)現(xiàn)將基因2型高致病毒株MN-184用來接種，比低毒力毒株MN-30100產(chǎn)生更高的病毒載量。這是由于高致病毒株MN-184能夠更長時(shí)間產(chǎn)生污染性氣溶膠（aerosols）所致。此外，F(xiàn)rydas通過幾組試驗(yàn)證實(shí)不同的PRRSV毒株在鼻黏膜細(xì)胞中的復(fù)制程度是不同的，至少對(duì)于1型PRRSV是這樣的。這可能會(huì)影響氣溶膠的形成?？傊?，使用高毒力的病毒感染動(dòng)物比低毒力病毒有更強(qiáng)的致病性，血清中檢測到病毒數(shù)和病毒滴度都更高，這種差異可能跟不同病毒在鼻黏膜中的復(fù)制程度有關(guān)。

3.3 PRRSV的免疫反應(yīng)

病毒的免疫反應(yīng)可能是影響病毒傳播的最重要的因素。中和抗體和細(xì)胞介導(dǎo)免疫與病毒清除保護(hù)有直接關(guān)系。此外，病毒的遺傳多樣性、抗原多樣性以及每個(gè)個(gè)體的特征對(duì)病毒清除和保護(hù)都起著一定的作用。

4 免疫與PRRSV傳播

母豬和仔豬接種疫苗是最常用的防控PRRS的策略之一，另外兩項(xiàng)常用策略是嚴(yán)格的豬場管理和生物安全措施。疫苗免疫的效果需要分別從個(gè)體和群體水平進(jìn)行評(píng)估。在個(gè)體水平上，免疫的主要目的是減少豬個(gè)體感染病毒、減輕臨床癥狀；對(duì)于群體水平，免疫的目的是為了減少疾病引起的經(jīng)濟(jì)損失以及避免病毒的群體傳播。目前市面上有基因1型和2型毒株的弱毒或滅活疫苗可用，其中弱毒疫苗是免疫的主流，它能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制，誘導(dǎo)與低毒力病毒相似的免疫反應(yīng)。Stadejek評(píng)估了弱毒疫苗免疫豬群后的實(shí)際效果：開展免疫試驗(yàn)之前，豬場主要流行的毒株是波蘭野生型PRRSV毒株，它與弱毒疫苗的1型PRRSV毒株的序列相似率僅為82.6%。隨機(jī)選擇14日齡的仔豬12只，弱毒疫苗接種后繼續(xù)追蹤監(jiān)測到132日齡。在免疫后68～92天時(shí)，只有兩只仔豬被波蘭野生型PRRSV毒株感染。同樣的，Martelli也做了相似的試驗(yàn)，弱毒疫苗毒株與當(dāng)?shù)亓餍卸局辍獯罄局曛挥?%的序列同源性，免疫后僅有56%仔豬血清中能夠檢測出野生型意大利毒株，并且臨床癥狀有了明顯改善。總之，目前疫苗免疫的效果評(píng)價(jià)主要從病毒學(xué)方面考慮，流行病學(xué)方面的效果評(píng)價(jià)還是較少，其實(shí)，疫苗免疫對(duì)于病毒的傳播是有明顯抑制和停止作用的。特別是對(duì)于弱毒疫苗來說，一方面是能夠增強(qiáng)個(gè)體抵抗力，降低感染病毒的風(fēng)險(xiǎn)，更重要的是能夠降低感染病畜的傳播力。在這個(gè)意義上，疫苗效果評(píng)價(jià)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)病毒傳播相關(guān)生物學(xué)參數(shù)的考量（間接的參數(shù)有：病毒血癥的持續(xù)時(shí)間，慢性傳染期的動(dòng)物數(shù)；直接的參數(shù)：PRRSV的繁殖率）。Cano免疫以前被同源菌株感染過的豬，在感染127天后發(fā)現(xiàn)慢性感染豬的數(shù)量有明顯減少，盡管通過這種方式不能完全消除野生毒株的流行，但可以有效降低病毒的釋放。Linhares也做了相似的試驗(yàn)，經(jīng)過疫苗免疫的豬雖然沒有縮短病毒血癥的持續(xù)時(shí)間，但對(duì)減少空氣中的病毒含量還是有明顯幫助的。

5 PRRSV在豬場間的傳播

病毒可以通過多種方式在豬場間進(jìn)行傳播。感染種豬的引進(jìn)，特別是種公豬和母豬的購入是病毒傳播的最普遍的方式。Mortensen研究了2型PRRSV在丹麥豬場間的擴(kuò)散，發(fā)現(xiàn)這種傳播跟購買感染病豬有關(guān)。Thakur也做了同樣的研究，發(fā)現(xiàn)加拿大的PRRSV傳播跟不同豬場間種公豬的引入有很大關(guān)系。

PRRSV豬場間傳播的另一個(gè)主要途徑是使用已感染病毒的精子。Botner證實(shí)丹麥1996年7月暴發(fā)的PRRS疫情的1型病毒株跟1995年用于采精的公豬體內(nèi)的病毒序列同源性高達(dá)99%。另外，2012年11月進(jìn)口德國的精子感染了瑞士的5個(gè)豬場。其實(shí)，只要不使用污染的設(shè)備，對(duì)采精公豬和母豬進(jìn)行嚴(yán)格的檢測，這種通過精子或引入母豬傳播PRRSV的方式是很容易避免的。

現(xiàn)在許多研究證實(shí)用于運(yùn)送豬、動(dòng)物產(chǎn)品、飼料、內(nèi)臟和污染物的運(yùn)輸工具（如卡車、拖車或其他車輛）也具有豬藍(lán)耳病蔓延的潛在風(fēng)險(xiǎn)。Dee使用≥103TCID50/mL的基因2型低毒力病毒MN-30100人為污染拖車，將未感染的生豬封閉于拖車2小時(shí)，發(fā)現(xiàn)生豬感染的情況。有兩個(gè)研究團(tuán)隊(duì)模擬了普通養(yǎng)豬場工作人員的日常情況，包括污染物（鞋子和容器）的擺放、車輛衛(wèi)生、人員流動(dòng)等，這些日常習(xí)慣都會(huì)對(duì)病毒的傳播起到輔助作用。同時(shí)研究結(jié)果還指出感染性病毒無處不在，運(yùn)輸車、洗車地板、拖車底板、駕駛員靴子以及各種容器表面都能夠分離到。另外，該研究小組發(fā)現(xiàn)在低溫環(huán)境下（＜0℃）感染性病毒可以重新獲得活性。相反，在較溫暖的環(huán)境（＞15℃）下，病毒的檢出率反而降低。這表明溫度對(duì)于污染物中病毒的生存是至關(guān)重要的。因此，對(duì)于冬季污染物的及時(shí)處理可以有效地預(yù)防病毒傳播。車輛處理一般是使用苯酚消毒，然后用80℃的熱水沖洗，過夜晾干。也可以使用加熱輔助干燥凈化系統(tǒng)或戊二醛熏蒸來進(jìn)行消毒處理。

空氣對(duì)于病毒的傳播也有一定的影響，不過通過空氣傳播跟病毒品系和飼養(yǎng)距離有關(guān)。Torremorell通過試驗(yàn)證實(shí)基因2型病毒VR-2332在彼此間隔1 m的生豬間就可以進(jìn)行傳播，而使用MN-1b病毒后上述試驗(yàn)結(jié)果就不能實(shí)現(xiàn)。有學(xué)者使用MN-184免疫豬群，從距離豬場4.7 km的排風(fēng)設(shè)備中檢測到病毒RNA，最遠(yuǎn)距離甚至可以到9.1 km，但是使用MN-1-18-2和MN-1-26-2毒株后，上述試驗(yàn)結(jié)果依然不能實(shí)現(xiàn)。低風(fēng)速、低氣溫、高相對(duì)濕度以及低日照水平都是空氣傳播的有利因素。目前在美國明尼蘇達(dá)南部和愛荷華北部的農(nóng)場都安裝了空氣過濾系統(tǒng)，空氣過濾能夠幫助減少80%的病毒進(jìn)入豬場?？偠灾?，豬場間病毒的傳播通過空氣是可以實(shí)現(xiàn)的，只是需要特殊的氣候條件和特異性毒株，其流行病學(xué)具有明顯的地域性。

另外，節(jié)肢動(dòng)物如蒼蠅、蚊子也可以傳播病毒，但由于養(yǎng)豬場生產(chǎn)條件的差異（通風(fēng)系統(tǒng)、空氣過濾裝置、飼養(yǎng)環(huán)境等），使得節(jié)肢動(dòng)物受影響的因素太多，這種通過蚊蠅媒介傳播的方式對(duì)于豬場間病毒的傳播并不是十分重要。

通過豬肉以及肉制品在不同的國家間傳播病毒現(xiàn)在也越來越受到重視，不過，傳統(tǒng)的屠宰后處理或冷凍后的豬肉產(chǎn)品，以及加工后的肉成品，這些產(chǎn)品中傳染性毒量很低，甚至可以忽略不計(jì)。因此，通過進(jìn)口肉制品導(dǎo)致PRRSV傳播的可能性是很有限的，但也要盡可能的防范。

6 結(jié)論

針對(duì)PRRSV流行病學(xué)的研究還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，但通過現(xiàn)有的知識(shí)，至少定性上已經(jīng)可以判斷豬場感染病毒的來源以及豬場間病毒傳播的機(jī)制。執(zhí)行嚴(yán)格的生物安全措施結(jié)合設(shè)計(jì)合理的免疫程序完全可以控制豬場及其周邊環(huán)境的PRRSV傳播。

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譯自：Pileri E,Mateu E.Review on the transmission porcine reproductive and respiratory syndrome virus between pigs and farms and impact on vaccination[J].Veterinary Research,2016, 47(1):108.

S828.2

A

1673-4645(2017)04-0037-05

1 病原學(xué)簡介

2017-03-24

王學(xué)強(qiáng)（1970-），男，本科，獸醫(yī)師，國家執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師，E-mail：619533819@qq.com

豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）成為全球集約化養(yǎng)豬生產(chǎn)最重要的疾病之一。該病主要感染母豬和斷奶仔豬，通過母豬繁殖障礙引起產(chǎn)仔率下降，對(duì)于斷奶仔豬則會(huì)造成呼吸系統(tǒng)損傷，導(dǎo)致仔豬成活數(shù)量降低；同時(shí)，該病可以作用于生長育肥豬，主要引起抵抗力降低、繼發(fā)感染，從而導(dǎo)致生長阻滯，屠宰期體重下降以及頻繁使用藥物，最終給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。2005年P(guān)RRS對(duì)美國生豬養(yǎng)殖造成的經(jīng)濟(jì)損失是5.6億美元，其中母豬繁殖階段損失6 700萬美元，斷奶仔豬是2.01億美元，而生長育肥豬損失最多，達(dá)到了2.92億美元[1]。2013年，Holtkamp等[2]估算PRRS對(duì)美國生豬養(yǎng)殖造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)到了6.63億美元，這比2005年高出了10%。歐洲2012年的數(shù)據(jù)[3]顯示PRRS導(dǎo)致的經(jīng)濟(jì)損失是126歐元/頭，這比2005年美國的數(shù)據(jù)（121美元/頭）還要高。鑒于此，越來越多的學(xué)者開始大力研發(fā)控制病毒傳播的方法和措施。PRRS的控制主要依賴于以下4種措施：早期的診斷和監(jiān)控、生物安全控制、嚴(yán)格的豬群管理系統(tǒng)以及合理的免疫程序。深入了解病毒在個(gè)體間傳播以及豬場間擴(kuò)散的途徑對(duì)殺滅病毒以及預(yù)防病毒復(fù)發(fā)至關(guān)重要。本文闡述了近些年來豬場間、個(gè)體間PRRSV傳播機(jī)制的研究進(jìn)展，同時(shí)探討了病毒的傳播對(duì)疫苗接種的影響，以期為豬場PRRS的防控提供理論參考。

豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）是一種小的、單股正鏈、有囊膜RNA病毒，該病毒在脂質(zhì)溶液、加熱、干燥以及pH小于5或大于7的環(huán)境下迅速滅活[4]。有研究證明PRRSV在56℃6分鐘以及37℃3小時(shí)即被滅活[5]；在4℃可以穩(wěn)定存活140個(gè)小時(shí)，而在pH=7.5的細(xì)胞培養(yǎng)基中-70℃可以存活幾個(gè)月之久。完全滅活病毒則可以通過碘 （0.0075%） 或季銨鹽化合物（0.0063%）處理1分鐘來實(shí)現(xiàn)[6]。當(dāng)然，含氯的消毒劑以及紫外光照射同樣也能將病毒進(jìn)行完全滅活，只是需要處理的時(shí)間較長（10分鐘）[7]。